KOMORA THOMA/BÜRKERA

• Głębokość komory

0,1 mm

Szkiełko nakrywkowe

KOMORA BÜRKERA

3 mm

3 mm

1 mm

1 mm

3 mm x 3 mm x 0,1 mm = 0,9 mm

3

Morfologia
krwi –
liczenie
leukocytów
,
erytrocytó
w,
trombocyt
ów

KOMORA THOMA

– liczenie komórek

w hodowlach in vitro

1 mm

1 mm

1 mm x 1 mm x 0,1 mm = 0,1 mm

3

= 0,1 ml

Komórki liczone

Komórki nie liczone

Reguła dwóch boków Burkera

Liczenie komórek

X = a/2 x b (komórek /0,1 ml)
X – ilość komórek
a – suma komórek na obu siatkach
b – rozcieńczenie komórek
np.:
Sporządź 10 ml zawiesiny komórek o gęstości 3 x 10

4

kom./ml, gdy hodowle do

liczenia rozcieńczono dziesięciokrotnie.

1.

Liczymy 10 krotnie rozcieńczoną zawiesinę komórek. Na pierwszej siatce
otrzymujemy 40 a na drugiej 38 komórek.

2.

Ze wzoru obliczamy ilość komórek w komorze: X = 78/2 x 10 = 390
(kom./0,1 ml) 1 ml – 1000 ul

X = 390 x 10

4

kom./ml

3.

Sporządzanie zawiesiny: X =390x10

4

kom./ml, V=10 ml zawiesiny, g =

3x10

4

kom./ml

V x g / X = Y ilość zawiesiny komórek liczonych na komorze w 10 ml
płynu hodowlanego
V - Y = ilość płynu hodowlanego

10 ml x 3x10

4

/ 390x10

4

= 0,077 ml (zawiesiny komórek policzonych na

komorze)
10 ml - 0,077 ml = 9,923 ml (płynu hodowlanego)

Barwienie błękitem trypanu

Proste barwienie dające możliwość oceny żywotności populacji
komórek. Barwnik przenika do komórek przez uszkodzoną błoną
komórkową, barwiąc je na niebiesko. Nie pozwala rozróżnić
komórek nekrotycznych i apoptotycznych.

Martwe neurony wybarwione błękitem trypany i żywe - fuksyną