KOMORA THOMA/BÜRKERA

Głębokość komory 0,1 mm

Szkiełko nakrywkowe

KOMORA BÜRKERA

3 mm

3 mm

1 mm

1 mm

3 mm x 3 mm x 0,1 mm = 0,9 mm

3

Morfologia
krwi – liczenie
leukocytów,
erytrocytów,
trombocytów

KOMORA THOMA

– liczenie komórek w

hodowlach in vitro

1 mm

1 mm

1 mm x 1 mm x 0,1 mm = 0,1 mm

3

= 0,1

m

l

Komórki liczone

Komórki nie liczone

Reguła dwóch boków Burkera

Liczenie komórek

X = a/2 x b (komórek /0,1

m

l)

X – ilość komórek
a – suma komórek na obu siatkach
b – rozcieńczenie komórek
np.:
Sporządź 10 ml zawiesiny komórek o gęstości 3 x 10

4

kom./ml, gdy hodowle do liczenia

rozcieńczono dziesięciokrotnie.

1.

Liczymy 10 krotnie rozcieńczoną zawiesinę komórek. Na pierwszej siatce otrzymujemy 40 a
na drugiej 38 komórek.

2.

Ze wzoru obliczamy ilość komórek w komorze: X = 78/2 x 10 = 390 (kom./0,1

m

l)

1 ml – 1000 ul

X = 390 x 10

4

kom./ml

3.

Sporządzanie zawiesiny: X =390x10

4

kom./ml, V=10 ml zawiesiny, g = 3x10

4

kom./ml

V x g / X = Y ilość zawiesiny komórek liczonych na komorze w 10 ml płynu hodowlanego

V - Y = ilość płynu hodowlanego

10 ml x 3x10

4

/ 390x10

4

= 0,077 ml (zawiesiny komórek policzonych na komorze)

10 ml - 0,077 ml = 9,923 ml (płynu hodowlanego)

Barwienie błękitem trypanu

Proste barwienie dające możliwość oceny żywotności populacji komórek. Barwnik
przenika do komórek przez uszkodzoną błoną komórkową, barwiąc je na niebiesko.
Nie pozwala rozróżnić komórek nekrotycznych i apoptotycznych.

Martwe neurony wybarwione błękitem trypany i żywe - fuksyną