rozwiązanie zadań 2010/2011
kasiabanas napisał/a:
1.a) zawartość białka =1a) 100mg/ml
b) stężenie = 10 000 mg%
c) stężenie = 500mg
2.0,8g/l i 80mg% (rozcienczenie 2*5)
3.1,4g/l i 0,14g%(rozcieńczenie 4*5)
4.1,25g/l i 0,125g% (rozcienczenie 5*5)
5.10mg/ml
6.320 000mg/l
7.160mg/ml=16 000mg% i 400mg w probce
zadania 2009/2010
zawo napisał/a:
1. Z próbki 5 ml płynu wysiękowego pobrano 10 ?l i uzupełniono do 10 ml solą fizjologiczną. Z tak rozcieńczonego roztworu pobrano 100 ?l i oznaczono stężenie białka metodą Bradforda. Absorbancja przy lambda=595 nm wynosiła A = 0.15. Co odpowiadało stężeniu c = 10 ?g/ml.
Obliczyć:
a) całkowitą zawartość białka w próbce wyjściowej
b) stężenie białka w mg%
c) stężenie w g/L
2. Do 0.5 ml surowicy dodano taką samą objętość 0.9 % NaCl i 0.45 M kwasu sulfosalicynowego. Wytrącone białko odwirowano, a w płynie nad osadem oznaczono stężenie seromukoidu metodą taninową, które wynosiło 80 ?g/ml. Do oznaczenia pobrano 0.2 ml supernatantu.
Obliczyć:
a) stężenie seromukoidu w mg%
b) stężenie seromukoidu w g/L
3. Do 2 ml surowicy pacjenta dodano 6 ml soli fizjologicznej. Z tak rozcieńczonego roztworu pobrano 200 ml i oznaczono bałko metodą Lowry?ego (objętość próbki w metodzie Lowry?ego, 1ml). Po zakończeniu reakcji zmierzono absorbancję próby, która wynosiła A=0.3, co odpowiadało stężeniu białka 70 mg/ml, odczytanemu z krzywej standardowej.
Obliczyć stężenie białka w badanej surowicy. Wynik podać w mg/ml i g%.
4. Oznaczono białko całkowite metodą Lowry?ego. Sporządzono krzywą standardową biorąc odpowiednie objętości roztworu standardowego albuminy ludzkiej o stężeniu 1mg/ml i uzupełniano wodą (objętość próbki w metodzie Lowry?ego). Następnie wykonano oznaczenie w próbce o nie znanym stężeniu białka. Próbkę tą rozcieńczono wstępnie 5x i do oznaczenia białka pobrano
0,2 ml. Odczytana wartość absorbancji wynosiła A=0,5. Odpowiadało to stężeniu białka c=50 ?g/ml. Obliczyć stężenie białka w badanej próbce. Wyniki podać w mg/ml i g%
5. Oznaczano białko całkowite metodą Lowry'ego. Sporządzono krzywą standardową biorąc odpowiednie objętości roztworu standardowego albuminy ludzkiej o stężeniu 1 mg/ml i uzupełniając wodą do 1 ml (objętość próbki w metodzie Lowry'ego). Po przeprowadzeniu reakcji barwnej otrzymano następujące wartości:
?l r-ru standardowego A750
10 0.10
30 0.25
60 0.65
100 1.00
Wykonano oznaczenie w próbce o nieznanym stężeniu białka. Próbkę tą rozcięńczono wstępnie 20x i do oznaczenia pobrano 0.1 ml. Odczytana absorbancja wynosiła A750= 0.50. Wykreślić krzywą standardową i obliczyć stężenie białka w badanej próbce. Wyniki podać w mg/ml i mg/l.
6. Wykonano krzywą standardową do oznaczania białka metodą biuretową. Dla poszczególnych stężeń otrzymano następujące wartości absorbancji:
c mg/ml A 540nm
2 0.085
4 0.160
6 0.250
8 0.320
10 0.400
Oznaczano stężenie albuminy w roztworze. Absorbancja w metodzie biuretowej wyniosła dla badanej próbki A=0.16. Próba była 4-razy rozcieńczona. Do oznaczeń pobrano 50 ?l rozcieńczonego roztworu. Posługując się krzywą standardową podać stężenie albuminy w roztworze w mg/l, mg%, mol/l (M). Masa cząsteczkowa albuminy 65 kDa.
7. Wykonano krzywą standardową do oznaczania białka metodą taninową. Dla poszczególnych stężeń otrzymano następujące wartości absorbancji:
c ?g/ml A630nm
20 0.095
40 0.180
60 0.280
80 0.390
100 0.5
Z próbki 2.5 ml płynu wysiękowego pobrano 25 ?l i dodano do 50 ml soli fizjologicznej. Do oznaczeń pobrano 0.5 ml rozcieńczonego roztworu. Wartość absorbancji po wykonaniu reakcji wynosiła A=0.180. Posługując się krzywą standardową podaj:
a) ile białka było w próbce (białko całkowite)
b) jakie było stężenie białka wyrażone w mg/l, mg%
mediva napisał:
w każdej metodzie jest 1ml... oprócz Bradforda - tu jest 100 mikrolitrów.
Daimon napisał:
Wyniki:
1a) 50mg białka
1b) w ostatecznym rozcieńczeniu -> 1 mg% ; w wyjściowym -> 1000 mg%
1c) w ostatecznym rozcieńczeniu -> 0,01 g/l ; w wyjściowym -> 10 g/l
2a) w końcowym (0,2 ml rozcieńczonych do 1ml) 8 mg% ; w wyjściowym (0,5 ml surowicy) 16 mg%
2b) w końcowym 0,080 g/l ; w wyjściowym 0,160 g/l
3) C= 1,4 mg/ml i 0,140 g%
4) C= 1,250 mg/ml i 0,125 g%
5) C= 10,32 mg/ml i 10320 mg/l
7) 16 000mg/l = 1600mg%
8a) 200,1mg
8b) 80040mg/l = 8004mg%