Zadanie

W laboratorium, z komórek E.coli szczepu XL-1 Blue, otrzymano homogenny preparat kolistego DNA wektora ekspresyjnego pTS-2 o stężeniu 2,5×10³ ng/μl. Aby wklonować
do tego wektora docelowy insert student musi strawić 7,5 μg wektora enzymami EcoRI i HindIII. Stężenia enzymów wynoszą odpowiednio 10,0×10³ U/ml (EcoRI) i 5,0×10³ U/ml (HindIII). Długość wektora pTS-2 wynosi 4,950 kpz, a długość DNA faga λ wynosi
48502 pz, każdy enzym „trawi” plazmid tylko w jednym miejscu. Zaproponuj skład mieszaniny restrykcyjnej (proszę nie zapomnieć o podaniu temperatury) na jedną próbkę razem z odpowiednią kontrolą zakładając czas trawienia 2h.

.......................................................................................................................................................

EcoRI: Reaction conditions: roztwory wyjściowe wszystkich buforów są stężone 10×

Number of recognition sites in DNA molecule: λDNA: 5 * star activity

(FERMENTAS)

HindIII: Reaction conditions: roztwory wyjściowe wszystkich buforów są stężone 10×

Number of recognition sites in DNA molecule: λDNA: 7 * star activity

POWODZENIA

---