Badania DNA na usługach

Badania DNA na usługach

kryminalistyki

kryminalistyki

mgr Marcin Woźniak

mgr Marcin Woźniak

Katedra i Zakład Medycyny Sądowej

Katedra i Zakład Medycyny Sądowej

AM w Bydgoszczy

AM w Bydgoszczy

nasienie

ślina

Analiza śladów

Analiza śladów

biologicznych metodą

biologicznych metodą

klasyczną (AB0)

klasyczną (AB0)

plamy krwi



Duże ślady

Duże ślady



Możliwość analizy tylko

Możliwość analizy tylko

niektórych rodzajów śladów

niektórych rodzajów śladów



Świeży materiał

Świeży materiał



Często wynik nie wnosił

Często wynik nie wnosił

żadnej informacji

żadnej informacji

Analiza śladów

Analiza śladów

biologicznych

biologicznych

z użyciem DNA

z użyciem DNA

włosy

małe ilości śliny

drobne ślady krwi

mocz i kał

Analiza DNA w starych

Analiza DNA w starych

śladach biologicznych

śladach biologicznych

20 - letnie

plamy krwawe

Mieszanina komórek

Mieszanina komórek

nabłonkowych i plemników

nabłonkowych i plemników

Plemniki

Plemniki

po izolacji różnicowej

po izolacji różnicowej

Ślady nasienia -

Ślady nasienia -

wykorzystanie badań DNA

wykorzystanie badań DNA

Zabezpieczanie

Zabezpieczanie

dowodów rzeczowych

dowodów rzeczowych

DNA jest obecny

w każdej komórce

naszego ciała

Technika PCR pozwala na analizę

DNA w ilości odpowiadającej

kilkudziesięciu komórkom.

Człowiek traci dziennie

kilkadziesiąt MILIONÓW

komórek i ponad 100 włosów

Zabezpieczanie

Zabezpieczanie

dowodów rzeczowych

dowodów rzeczowych

drobne ślady na ciele

ślady ugryzień

dokładne oględziny

zabezpieczenie śladów

Zabezpieczanie

Zabezpieczanie

dowodów rzeczowych

dowodów rzeczowych

Zabezpieczenie przed starciem

Osobne pakunki

Zabezpieczanie

Zabezpieczanie

dowodów rzeczowych

dowodów rzeczowych

Materiał porównawczy

Materiał porównawczy

Niewielkie ilości krwi

Wymaz z policzka

Włosy z cebulkami

Schemat postępowania ze

Schemat postępowania ze

śladami krwawymi

śladami krwawymi

Badania klasyczne

Badania klasyczne

(historyczne?)

(historyczne?)

Badania DNA

Badania DNA

DNA

DNA

Hybrydyzacja z sondą D17Z1

Określenie przynależność gatunkowej

Określenie przynależność gatunkowej

i śladów krwi, nasienia, śliny itp.

i śladów krwi, nasienia, śliny itp.

Badania wstępne

Badania wstępne

Analiza układów DNA-STR

Analiza układów DNA-STR

w oparciu o układy

w oparciu o układy

multipleksowe

multipleksowe

z detekcją fluorescencyjną

z detekcją fluorescencyjną

Sekwenatory DNA ABI 377

Sekwenatory DNA ABI 377

Analiza 15 loci STR

Analiza 15 loci STR

Wyniki

Wyniki

badań DNA

badań DNA

genotyp DNA ze śladu

genotyp

porównawczy 2

CSF1PO

TH01

TPOX

10/11

6/9.3

8/11

CSF1PO

TH01

TPOX

10/11

6/9.3

8/11

genotyp

porównawczy 1

CSF1PO

TH01

TPOX

10/11

7/9.3

8/11

D5S818

D13S317

D7S820

D16S539

vWA

TH01

allel

ilość

częstość

allel

ilość

częstość

allel

ilość

częstość

allel

ilość

częstość

allel

ilość

częstość

allel

ilość

częstość

7

2

0,002

6

2

0,002

7

10

0,010

8

5

0,005

13

3

0,003

5

1

0,001

8

1

0,001

8

146

0,146

8

174

0,174

9

95

0,095

14

102

0,102

6

226

0,226

9

46

0,046

9

81

0,081

9

152

0,152

10

52

0,052

15

105

0,105

7

126

0,126

10

82

0,082

10

46

0,046

10

280

0,280

11

288

0,288

16

177

0,177

8

103

0,103

11

341

0,341

11

394

0,394

11

199

0,199

12

326

0,326

17

291

0,291

9

218

0,218

12

366

0,366

12

209

0,209

12

139

0,139

13

191

0,191

18

213

0,213

9.3

312

0,312

13

150

0,150

13

79

0,079

13

45

0,045

14

39

0,039

19

94

0,094

10

14

0,014

14

9

0,009

14

42

0,042

14

1

0,001

15

4

0,004

20

15

0,015



1000

1,000

15

3

0,003

15

1

0,001

 1000

1,000

 1000

1,000

 1000

1,000

 1000

1,000

 1000

1,000

TPOX

D3S1358

LPL

F13B

FES/FPS

CSF1PO

allel

ilość

częstość

allel

ilość

częstość

allel

ilość

częstość

allel

ilość

częstość

allel

ilość

częstość

allel

ilość

częstość

8

541

0,541

11

1

0.004

6

1

0,001

6

79

0,079

7

6

0,006

8

3

0,003

9

102

0,102

14

29

0.113

7

1

0,001

7

10

0,010

8

24

0,024

9

39

0,039

10

61

0,061

15

47

0.184

9

46

0,046

8

234

0,234

9

4

0,004

10

268

0,268

11

262

0,262

16

65

0.254

10

452

0,452

9

254

0,254

10

279

0,279

11

288

0,288

12

34

0,034

17

70

0.273

11

275

0,275

10

421

0,421

11

487

0,487

12

303

0,303

 1000

1,000

18

39

0.152

12

202

0,202

11

1

0,001

12

155

0,155

13

81

0,081

19

5

0.020

13

23

0,023

12

1

0,001

13

40

0,040

14

16

0,016



256

1,000

 1000

1,000

 1000

1,000

14

5

0,005

15

1

0,001

 1000

1,000

16

1

0,001

 1000

1,000

F13A01

D2S1338

D8S1179

D21S11

D18S51

D19S433

Allel

ilość

częstość

allel

ilość

częstość

allel

ilość

częstość

allel

ilość

częstość

allel

ilość

częstość

allel

ilość

częstość

3.2

84

0,084

16

16

0.063

8

5

0.020

26

1

0.004

10

2

0.008

11

2

0.008

4

44

0,044

17

41

0.160

9

4

0.016

27

6

0.23

11

3

0.012

12

20

0.078

5

193

0,193

18

13

0.051

10

15

0.059

28

47

0.184

12

20

0.078

13

59

0.230

6

307

0,307

19

26

0.102

11

13

0.051

29

50

0.195

13

27

0.105

13.2

2

0.008

7

323

0,323

20

37

0.145

12

49

0.191

30

61

0.238

14

32

0.125

14

87

0.340

8

6

0,006

21

11

0.043

13

81

0.316

30.2

11

0.043

15

43

0.168

14.2

6

0.023

13

8

0,008

22

4

0.016

14

59

0.230

31

16

0.063

16

44

0.172

15

54

0.211

14

6

0,006

23

29

0.113

15

25

0.098

31.2

23

0.090

17

34

0.133

15.2

7

0.027

15

16

0,016

24

39

0.152

16

4

0.016

32

2

0.008

18

32

0.125

16

12

0.047

16

9

0,009

25

34

0.133

17

1

0.004

32.2

23

0.090

19

7

0.027

16.2

5

0.020

17

2

0,002

26

4

0.016



256

1,000

33.2

15

0.059

20

7

0.027

17.2

2

0.008

18

2

0,002

27

1

0.004

34.2

1

0.004

21

1

0.004



256

1,000

 1000

1,000

28

1

0.004



256

1,000

22

2

0.008



256

1,000

23

2

0.008



256

1,000

FGA

17

2

0.008

23.2

4

0.016

18

1

0.004

24

31

0.121

19

16

0.063

24.2

1

0.004

20

37

0.145

25

12

0.047

21

56

0.219

26

6

0.023

21.2

1

0.004

27

1

0.004

22

64

0.250

28

1

0.004

22.2

2

0.008



256

1,000

23

21

0.082

Częstości alleli loci STR

Częstości alleli loci STR

AB0

DQA1 3 STR 8 STR

A

1

1.1/4.1

genotyp

genotyp

1 na
3 (!)

1 na

12

1 na

150

1 na

milion

TH01, TPOX,
CSF1PO

Siła dowodowa

Siła dowodowa

badań DNA i badań

badań DNA i badań

klasycznych

klasycznych

TH01, TPOX, CSF1PO,
D5S818,
D13S317, D7S820,
D16S536,
vWA, płeć

Każde z tych badań wymaga

podobnej ilości czasu !!!

GenePrint

GenePrint

FFFL

FFFL

4 loci

4 loci

0.999

0.999

GenePrint

GenePrint

PowerPlex

PowerPlex

8 loci

8 loci

0.999 999 99

0.999 999 99

AmpFlSTR SGM Plus

AmpFlSTR SGM Plus

10 loci

10 loci

0.999 999 999 99

0.999 999 999 99

Siła dyskryminacji

Siła dyskryminacji

systemów

systemów

multipleksowych

multipleksowych

Interpretacja danych

Interpretacja danych

zawartych w opinii

zawartych w opinii

z badań DNA

z badań DNA



MP - Procentowa częstość danego genotypu

MP - Procentowa częstość danego genotypu

w populacji

w populacji



LR - Raz na ile osób występuje dany

LR - Raz na ile osób występuje dany

genotyp w populacji

genotyp w populacji



MP

MP

2

2

- Prawdopodobieństwo napotkania

- Prawdopodobieństwo napotkania

dwóch niespokrewnionych osób o danym

dwóch niespokrewnionych osób o danym

genotypie

genotypie



fst (albo

fst (albo





) - współczynnik pokrewieństwa w

) - współczynnik pokrewieństwa w

populacji (0.01 dla populacji ogólnej, 0.25

populacji (0.01 dla populacji ogólnej, 0.25

dla rodzeństwa)

dla rodzeństwa)

Wynik analizy krwi zamordowanego

Wynik analizy krwi zamordowanego

Wynik analizy śladu krwi

Wynik analizy śladu krwi

D5S8181, D13S317, D7S820,

D5S8181, D13S317, D7S820,

D16S539, vWA, TH01, TPOX,

D16S539, vWA, TH01, TPOX,

CSF1PO, AMG (płeć)

CSF1PO, AMG (płeć)

Praktyczne wykorzystanie

Praktyczne wykorzystanie

multipleksowej reakcji PCR

multipleksowej reakcji PCR

w badaniach śladów krwi

w badaniach śladów krwi

0.0000000000000

0.0000000000000000000000677

000000000677

Praktyczne wykorzystanie

Praktyczne wykorzystanie

multipleksowej reakcji PCR

multipleksowej reakcji PCR

w badaniach śladów krwi

w badaniach śladów krwi

MP= 0.00000000000000039%

LR=107 000 000 000 000 000

MP

2

=8.81  10

-35

Badania DNA w Polsce

Badania DNA w Polsce



Laboratorium 1:

Laboratorium 1:

MS31, MS 43A (bez wielkości fragmentów!), DQA1, vWA, D1S80,

MS31, MS 43A (bez wielkości fragmentów!), DQA1, vWA, D1S80,

TH01

TH01



Laboratorium 2:

Laboratorium 2:

DQA1, Polymarker

DQA1, Polymarker



Laboratorium 3:

Laboratorium 3:

AMG, D3S1358, vWA, FGA, D8S1179, D21S11, D18S51, D5S818,

AMG, D3S1358, vWA, FGA, D8S1179, D21S11, D18S51, D5S818,

D13S317, D7S820 (Amp

D13S317, D7S820 (Amp

FL

FL

STR Profiler Plus)

STR Profiler Plus)



Laboratorium 4:

Laboratorium 4:

vWA (bez genotypowania)

vWA (bez genotypowania)



Laboratorium 5:

Laboratorium 5:

AMG, D3S1358, vWA, D16S539, D2S1338, D8S1179, D21S11,

AMG, D3S1358, vWA, D16S539, D2S1338, D8S1179, D21S11,

D18S51, D19S433, TH01, FGA (AmpFL STR SGM Plus)

D18S51, D19S433, TH01, FGA (AmpFL STR SGM Plus)

Obowiązujące zakresy

Obowiązujące zakresy

badań na świecie

badań na świecie

CODIS

CODIS



vWA

vWA



THO1

THO1



D8S1179

D8S1179



D3S1358

D3S1358



FGA

FGA



D21S11

D21S11



D18S51

D18S51



TPOX

TPOX



CSF1PO

CSF1PO



D5S818

D5S818



D13S317

D13S317



D7S820

D7S820



D16S539

D16S539

ENFSI / FSS

ENFSI / FSS

(Interpol)

(Interpol)



vWA

vWA



THO1

THO1



D8S1179

D8S1179



D3S1358

D3S1358



FGA

FGA



D21S11

D21S11



D18S51

D18S51

7

Europa

13

USA

Atesty

Atesty

Bazy danych

Bazy danych

Badania śladów

Badania śladów

biologicznych

biologicznych

a rozwój technik analizy DNA

a rozwój technik analizy DNA

Korzyści

Korzyści



zmniejszenie rozmiarów badanych

zmniejszenie rozmiarów badanych

śladów

śladów



nowe rodzaje analizowanych śladów

nowe rodzaje analizowanych śladów



badania starych śladów

badania starych śladów



materiał porównawczy - nowe możliwości

materiał porównawczy - nowe możliwości



wprowadzenie kategorii „ dowodu

wprowadzenie kategorii „ dowodu

obiektywnego”

obiektywnego”

Badania śladów

Badania śladów

biologicznych

biologicznych

a rozwój technik analizy DNA

a rozwój technik analizy DNA

Wyzwania

Wyzwania



zwiększone ryzyko wprowadzenia

zwiększone ryzyko wprowadzenia

„obcych” śladów przez osoby

„obcych” śladów przez osoby

zabezpieczające dowody rzeczowe

zabezpieczające dowody rzeczowe



konieczność kształcenia osób

konieczność kształcenia osób

czytających opinie co do zasad

czytających opinie co do zasad

interpretacji zawartych w niej

interpretacji zawartych w niej

informacji

informacji