07.04.2008r. (zacznij słuchać od 10 minuty)

Podział metod oznaczania aktywności enzymów

1. Spektrofotometryczne

1. hydrataza fumaranowa

2. dehydrogenazy sprzężone z NAD⁺ lub NADP⁺

2. Fluorometryczne

3. Monometryczne

4. Potencjometryczne

5. Z odbioru prób (np. kolorymetryczne)

6. Wiskozymetryczne

Oznaczanie aktywności

Stężenie substratów koenzymów musi być wysycające (maksymalna szybkość reakcji)

temp. 30°C i pH max

czas reakcji

1. wyznaczanie masy cząsteczkowej białka

wyliczenie masy cząsteczkowej na podstawie sekwencji aminokwasów (łatwo ustalić sekwencje kodonów w białku ale trudno sekwencje aminokwasów)

metoda sączenia molekularnego

oznaczanie masy cząsteczkowej w żelu poliakrylowym za pomocą elektroforezy

elektroforeza w żelu poliakrylowym (PAGE) w obecności SDS i 2 - merkaptoetanolu

R_M - współczynnik ruchliwości elektroforetycznej

marker - błękit boromofenolowy

2. …