ANALIZA GENETYCZNA
ANALIZA GENETYCZNA
W MEDYCYNIE
W MEDYCYNIE
SĄDOWEJ
SĄDOWEJ
ANALIZA GENETYCZNA
ANALIZA GENETYCZNA
W MEDYCYNIE
W MEDYCYNIE
SĄDOWEJ
SĄDOWEJ
Badania klasyczne - wykrywalność
AB0
około 1 roku
Gm (1)
około 1 roku
PGM1
2-3 miesiące
ESD
2-10 tygodni
Badania DNA - wykrywalność
NIEOGRANICZONA
WYKRYWALNOŚĆ
• Krew
• Nasienie
• Ślina
• Mocz
• Włosy
• Zęby
• Kość
• Tkanka
komórka 2n
komórka 2n
1 x 10
1 x 10
-10
-10
g
g
plemnik
plemnik
100 pg DNA
100 pg DNA
PCR
PCR
włos
włos
Badania klasyczne -
polimorfizm
AB0
0, A, B, AB
Gm (1)
Gm(1), Gm(-1)
PGM1
1-1, 1-2, 2-2
np.
4
allele =
4
homozygoty +
6
heterozygot =
10
genotypów
Badania DNA - polimorfizm
Locus genomowego DNA – średnio
7
alleli
=
28
genotypów
Multiplex PCR
15 loci
28
15
= 5 097 655 355 238 390 956 032
(5 x 10
21
)
GENOMOWE DNA
Region VNTR
Region VNTR
chromosom
Jądro
komórkowe
Dwuniciowa
struktura DNA
nukleotydy
Variable number of tandem repeat (VNTR)
9 powtórzeń
5 powtórzeń
AATG
AATG
AATG
lokus
lokus
allel 5,9
allel 5,9
genotyp 5-9
genotyp 5-9
HETEROZYGOTA = allele różnią się od siebie
Variable number of tandem repeat (VNTR)
7 powtórzeń
AATG
AATG
AATG
7 powtórzeń
lokus
lokus
allel 7,7
allel 7,7
genotyp 7-7
genotyp 7-7
HOMOZYGOTA = allele jednakowej długości
CSF1PO
D5S818
D21S11
TH01
TPOX
D13S317
D7S820
D16S539
D18S51
D8S179
D3S1358
FGA
VWA
AMEL
AMEL
13 CODIS loci - Combined DNA Index
System
Izolacja
DNA
Izolacja
DNA
ANALIZA GENETYCZNA
Amplifikacja DNA
Amplifikacja DNA
Analiza jakościowa
i ilościowa
Analiza jakościowa
i ilościowa
Detekcja alleli DNA
Detekcja alleli DNA
Ocena wartości
dowodowej badania
Ocena wartości
dowodowej badania
GENETYKA MEDYCZNO - SĄDOWA
• Badania pokrewieństwa - ustalanie
ojcostwa
• Ustalanie tożsamości zwłok
• Identyfikacja osób w katastrofach
masowych
• Identyfikacja sprawców przestępstw –
śladów biologicznych - bazy profili DNA
• Identyfikacja osób zaginionych
GENETYKA MEDYCZNO - SĄDOWA
•
identyfikacja osobnicza
• badanie pokrewieństwa
WARTOŚĆ DOWODOWA ANALIZY
badanie spornego ojcostwa
ANALZA VNTR W OJCOSTWIE
ANALZA VNTR W OJCOSTWIE
1 2 3
1 2 3
1-domniemany ojciec 2- dziecko 3-matka dziecka
ANALZA OJCOSTWA - STR
ANALZA OJCOSTWA - STR
Brak wyłączenia
Wyłączenie
lub
Mutacja
OCENA WARTOŚCI DOWODOWEJ
OCENA WARTOŚCI DOWODOWEJ
BADANIA Z ZAKRESU
BADANIA Z ZAKRESU
GENETYKI SĄDOWEJ
GENETYKI SĄDOWEJ
Izolacja
DNA
Izolacja
DNA
ANALIZA GENETYCZNA
Amplifikacja DNA
Amplifikacja DNA
Analiza jakościowa
i ilościowa
Analiza jakościowa
i ilościowa
Detekcja alleli DNA
Detekcja alleli DNA
Ocena wartości
dowodowej badania
Ocena wartości
dowodowej badania
GENETYKA MEDYCZNO - SĄDOWA
•
identyfikacja osobnicza
• badanie pokrewieństwa
WARTOŚĆ DOWODOWA ANALIZY
badanie spornego ojcostwa
ZASADY WYŁĄCZANIA OJCOSTWA
ZASADY WYŁĄCZANIA OJCOSTWA
U dziecka pojawia się nowa cecha,
U dziecka pojawia się nowa cecha,
nieobecna u pozwanego o ojcostwo
nieobecna u pozwanego o ojcostwo
mężczyzny ani u matki
mężczyzny ani u matki
Dziecko nie dziedziczy żadnej
Dziecko nie dziedziczy żadnej
cechy po pozwanym o ojcostwo
cechy po pozwanym o ojcostwo
mężczyźnie
mężczyźnie
i
lub
OPINIOWANIE W ANALIZIE
OPINIOWANIE W ANALIZIE
OJCOSTWA
OJCOSTWA
POTWIERDZENIE
POTWIERDZENIE
ZPRAWDOPODOBIEŃSTWEM
ZPRAWDOPODOBIEŃSTWEM
99.999% (PI=100 000)
99.999% (PI=100 000)
EKSPERTYZA DNA
EKSPERTYZA DNA
WYŁĄCZENIE
WYŁĄCZENIE
•DNA Comission of the International Society of Forensic Genetics
•Komisja Hemogenetyki Polskiego Towarzystwa Medycyny Sadowej i Kryminologii
WARTOŚĆ DOWODOWA EKSPERTYZY
OJCOSTWA
Szansa ojcostwa
- PI
Prawdopodobieństwo ojcostwa
Ocenia,
Ocenia,
ile razy bardziej prawdopodobne
ile razy bardziej prawdopodobne
jest
jest
ojcostwo badanego
ojcostwo badanego
pozwanego
pozwanego
w porównaniu do
w porównaniu do
ojcostwa losowo
ojcostwa losowo
wybranego mężczyzny
wybranego mężczyzny
dla konkretnego
dla konkretnego
wyniku ekspertyzy
wyniku ekspertyzy
Szansa ojcostwa
- PI
Prawdopodobieństwo ojcostwa - P
P =
———
PI
PI
+1
WARTOŚĆ DOWODOWA EKSPERTYZY
OJCOSTWA
Lokus
Przykładowo:
D12S11
matka:
11 - 11
mężczyzna:
15 - 15
dziecko:
11 - 15
Wówczas:
PI = 1/częstość(15)
np. jeżeli częstość(15)=0.2, to
PI = 1/0.2
= 5
WARTOŚĆ DOWODOWA EKSPERTYZY
OJCOSTWA
WARTOŚĆ DOWODOWA EKSPERTYZY
OJCOSTWA
PI = 5
oznacza, że hipoteza, iż badany
mężczyzna jest ojcem dziecka jest
5 razy
bardziej
prawdopodobna
, niż hipoteza, że
ojcem jest inny, losowo wybrany, mężczyzna
z populacji.
np. jeżeli częstość(Q)=0.2, to
PI = 1/0.2 = 5
WARTOŚĆ DOWODOWA EKSPERTYZY
OJCOSTWA
PI = 5
Prawdopodobieństwo ojcostwa
P =
——— = 0.83 = 83%
5
5
+1
WARTOŚĆ DOWODOWA EKSPERTYZY
OJCOSTWA
Łączna szansa ojcostwa – PI c
Zasada iloczynu – „PRODUCT RULE”
PI c
=
PI
1
lokus
x
PI
2 lokus
x
PI
3 lokus
x .......
OPINIOWANIE W ANALIZIE
OPINIOWANIE W ANALIZIE
OJCOSTWA
OJCOSTWA
POTWIERDZENIE
POTWIERDZENIE
ZPRAWDOPODOBIEŃSTWEM
ZPRAWDOPODOBIEŃSTWEM
99.999% (PI=100 000)
99.999% (PI=100 000)
EKSPERTYZA DNA
EKSPERTYZA DNA
WYŁĄCZENIE
WYŁĄCZENIE
•DNA Comission of the International Society of Forensic Genetics
•Komisja Hemogenetyki Polskiego Towarzystwa Medycyny Sadowej i Kryminologii
Jeżeli obliczenia PI dla pojedynczego układu dadzą
PI = 5
,
to ile układów należy zbadać,
aby otrzymać minimalną łączną szansa
ojcostwa
PI c = 100 000
?
WARTOŚĆ DOWODOWA EKSPERTYZY
OJCOSTWA
8 układów
99.999%
Szansa
ojcostwa
Prawdopodo-
bieństwo
ojcostwa
10
100
1000
10 000
100 000
1 000 000
90 %
99 %
99.9 %
99.99 %
99.999 %
99.9999 %
WARTOŚĆ DOWODOWA EKSPERTYZY
OJCOSTWA
Wartość wymagana w opinii potwierdzającej ojcostwo
Wartość wymagana w opinii potwierdzającej ojcostwo
WARTOŚĆ DOWODOWA ANALIZY
identyfikacja osobnicza
Analiza porównawcza
uzyskanego profilu DNA
Analiza statystyczna -
CZĘSTOŚCI POPULACYJNE
Analiza statystyczna -
CZĘSTOŚCI POPULACYJNE
BADANIA IDENTYFIKACYJNE
Niezgodność
Zgodność
OPINIA
P r a w d o p o d o b i e ń s t
w o przypadkowej zgodności
OPINIA
P r a w d o p o d o b i e ń s t
w o przypadkowej zgodności
GENETYKA POPULACYJNA – prawo
GENETYKA POPULACYJNA – prawo
Hardy’ego i Weinberga
Hardy’ego i Weinberga
STRUKTURA GENETYCZNA POPULACJI
•
odpowiednio liczna
•
kojarzenie losowe
•
brak doboru naturalnego
•
brak selekcji, mutacji i migracji
STAN DYNAMICZNEJ RÓWNOWAGI
Częstość występowania różnych
Częstość występowania różnych
genotypów
genotypów
w populacji jest stała
w populacji jest stała
i zależna jedynie od
i zależna jedynie od
częstości występowania
częstości występowania
alleli
alleli
w
w
populacji
populacji
OBLICZENIA CZĘSTOŚCI PROFILU
OBLICZENIA CZĘSTOŚCI PROFILU
AA = a
2
CZĘSTOŚCI GENOTYPÓW
BB = b
2
AB =
2ab
HWE w populacji
Jeżeli allel „a” w lokus A ma częstość a
a allel „b” w lokus B ma częstość
b
ILOCZYN CZĘSTOŚCI GENOTYPÓW
=
CZĘSTOŚĆ PROFILU
CZĘSTOŚĆ PROFILU
1
1
= 1 GENOTYP NA ....
= 1 GENOTYP NA ....
OSÓB
OSÓB
CZĘSTOŚĆ GENOTYPU
CZĘSTOŚĆ GENOTYPU
PRAWDOPODOBIEŃSTWO PRZYPADKOWEJ
ZGODNOŚCI
Przykładowo:
TH01 lokus
Genotyp osoby -
6-9
Częstość allela
6
= 0.13
Częstość allela
9
= 0.15
WARTOŚĆ DOWODOWA ANALIZY DNA
Wówczas:
częstość genotypu
6-9
=
2
x częstość allela (
6
) x częstość allela (
9
) =
2 x 0.13 x 0.15 =
0.039
Badany genotyp wystąpi w populacji
z częstością
0.039
Prawdopodobieństwo
przypadkowej zgodności =
1/0.039
=
25.664
, to znaczy,
że pojawi się w
1
przypadku na
25
osób
WARTOŚĆ DOWODOWA W IDENTYFIKACJI
WARTOŚĆ DOWODOWA EKSPERTYZY DNA
CZĘSTOŚ
ć
PROFILU – PF
CZĘSTOŚCI GENOTYPÓW - GF
PF =
GF
1 lokus
x
GF
2
lokus
x
GF
3 lokus
x
.......
1
1
= 1 PROFIL NA ....
= 1 PROFIL NA ....
OSÓB
OSÓB
CZĘSTOŚĆ PROFILU
CZĘSTOŚĆ PROFILU
PRAWDOPODOBIEŃSTWO PRZYPADKOWEJ ZGODNOŚCI
OBLICZENIA CZĘSTOŚCI PROFILU
OBLICZENIA CZĘSTOŚCI PROFILU
AA = a
2
CZĘSTOŚCI GENOTYPÓW
BB = b
2
AB =
2ab
ILOCZYN CZĘSTOŚCI GENOTYPÓW
=
CZĘSTOŚĆ PROFILU
CZĘSTOŚĆ PROFILU
1
1
=
=
1 PROFIL NA
1 PROFIL NA
2169
2169
OSÓB
OSÓB
0.000461
0.000461
PRAWDOPODOBIEŃSTWO ZGODNOŚCI PROFILU DNA
1
1
=
=
1 PROFIL NA
1 PROFIL NA
8 333 333 333
8 333 333 333
OSÓB
OSÓB
0.00000000000012
0.00000000000012
PRAWDOPODOBIEŃSTWO ZGODNOŚCI PROFILU DNA
PRAWDOPODOBIEŃSTWO ZGODNOŚCI PROFILU
DNA