170.Metody otrzymywania dwuwarstw lipidowych i
pomiar ich grubo
ś
ci
R = I
R
/Io = 4*(n-no/n+no)^2 * sin(2*pi*n*sigma/lambda) ,
gdzie:
n – wspolczynnik zalamania swiatla dla materialu blony
no – współczynnik zalamania swiatla dla fazy wodnej
sigma – grubosc blony
lambda – długo
ść
fali uzytego swiatla
R – współczynnik odbicia swiatla padaj
ą
cego prostopadle
do powierzchni blony
Przykład A – mamy zanurzon
ą
w elektrolicie igł
ę
podł
ą
czon
ą
do strzykawki – w strzykawce znaduje si
ę
pewien roztwór, na ko
ń
cu igły obecny jest lipid w
rozpuszczalniku organicznym. Strzykawk
ą
wprowadzamy
roztwór do tej kropli, tworzy si
ę
p
ę
cherzyk, w
ś
rodku
p
ę
cherzyka i na zewn
ą
trz b
ę
dzie elektrolit, natomiast po
osi
ą
gni
ę
ciu pewnej
ś
rednicy p
ę
cherzyk stanie si
ę
dwuwarstw
ą
lipidow
ą
.
Przykład B – obecna jest przegroda zanurzona w roztworze
z lipidem. W przegrodzie obecne jest
okienko. Przenosz
ą
c przegrod
ę
w dół i w gór
ę
mo
ż
emy
doprowadzi
ć
do tego,
ż
e
ś
lizgaj
ą
ce si
ę
lipidy po obu
stronach przegrody spotykaj
ą
si
ę
w tym okienku i pomi
ę
dzy
roztworami tworzy si
ę
dwuwarstwa lipidowa.
Przykład C-cz
ęść
przegrody jest stabilna, przymocowana
do dna naczynia, górna jest ruchoma; na kraw
ę
dzi
przegrody dolnej nanosimy lipid, rozpuszczony w rozp.
organicznym. Po poł
ą
czeniu tych przegród a pó
ź
niej ich
oddalaniu rozci
ą
gamy lipid, przez co w pewnym momencie
powstaje automatycznie dwuwarstwa lipidowa.
By zidentyfikowa
ć
obecno
ść
błony bimolekularnej, mo
ż
emy
przepu
ś
ci
ć
przez ni
ą
ś
wiatło. Promienie odbite interferuj
ą
ze sob
ą
. W wyniku tej interferencji powstaj
ą
obszary
zaciemnienia na błonie – w ten sposób mo
ż
emy
zidentyfikowa
ć
pod mikroskopem,
ż
e to dwuwarstwa
lipidowa.
Grubo
ść
warstwy mo
ż
na okre
ś
li
ć
przez pomiary
spektrofotometryczne – stosujemy
ś
wiatło o
okre
ś
lonej długo
ś
ci i nat
ęż
eniu, które jest puszczane pod
pewnym k
ą
tem. Mo
ż
emy okre
ś
li
ć
współczynnik odbicia
ś
wiatła padaj
ą
cego na powierzchni
ę
