Materiały do ćwiczeń   

Ochrona Środowiska  

 

„CYTOMETR PRZEPŁYWOWY” 

2 

Rozproszenie na wprost FSC 

•

mierzone wzdłuż osi padającego światła lasera 

•

określa  wielkość komórki 

Rozproszenie boczne SSC 

  

•

mierzona pod kątem  90° w stosunku do wiązki laserowej 

•

światło laserowe odbite i rozproszone 

•

określa gęstość  i liczbę ziarnistości  

Detektor rozproszenia pod k

ątem 90 stopni 

Detektor rozproszenia na 
wprost 

  Laser 

Właściwości  FSC i SSC 

SSC

 

FSC 

B 

Tc 

Th 

Treg 

T17 

J A K   R O Z P O Z N A Ć   L I M F O C Y T Y ?  

CD4+ 

CD3+ 

FITC 

PE 

CD4+ 
CD3+ 

CD3+ 

CD3-4- 

CD4+
CD3+ 

FL-1 (CD4) 

FL

-2 (CD

3)

 

CD3+CD4+  to limfocyty Th 
CD3+  to w większości limfocyty Tc 
CD3-CD4- limfocyty B 
 

np. 

Cou

nt

 

0 

 200 

 400 

 600 

 800 

1000 

G

0 

/ G

1 

S 

G

2 

/ M 

zawartość DNA 

2N 

4N 

G

2 

M 

G

0 

G

1 

S 

CYKL KOMÓRKOWY  

Wykres dwuwymiarowy

  

- 

kropkowy, gęstości (każda kropka reprezentuje pojedynczą komórkę)  

-  

analizuje intensywność fluorescencji dwóch parametrów 

 

Metody oznaczania apoptozy i nekrozy: 
 

Aneksyna-FITC (fluorosceina) + jodek propidyny 
 
Aneksyna - FITC – łączy się z fosfatydyloseryną obecną na zewnątrz 
błony komórek apoptotycznych - apoptoza  
 
Jodek propidyny (PI) nie przenika przez nie uszkodzoną błonę komórek 
żywych i wczesno apoptotycznych - barwi na  
czerwono komórek nekrotycznych oraz późno apoptotycznych 
 
 
 
 
  
 
 
 
 
 

http://www.chem.pg.gda.pl/Katedry/Leki_Biochemia/dydaktyka/kultury_tkankowe/morfologia_komorki_apoptotycznej.pdf 

 
 
 

http://www.ujk.edu.pl/ibiol/ZRI/hodowla_tkankowa_wojcik_05.pdf 

nekroza 

Późna apoptoza 

apoptoza