plik

BŁONY KOMÓRKOWE

Błony występują we wszystkich znanych układach biologicznych

zdolnych  do  samodzielnego  życia.  Oddzielają  one  komórkę  od
środowiska, a w komórkach  Eukariota dzielą również wnętrze komórki
na  mniejsze  obszary  o  zróżnicowanych  funkcjach  (budują  struktury
błoniaste:  endoplazmatyczne  retikulum,  aparat  Golgiego,  pojedyncza
błona  otacza  wakuolę,  lizosomy,  peroksysomy  a  podwójna  jądro
komórkowe, mitochondria i plastydy). Błony różnią się składem białek i
fosfolipidów oraz nieznacznie właściwościami.

Błony biologiczne uczestniczą w:

· biernym lub czynnym, selektywnym transporcie jonów i substancji

niejonowych,

· wydzielaniu produktów komórki do środowiska (egzocytoza) oraz

pobieraniu makrocząsteczek do komórki (endocytoza),

· reakcjach na sygnały pochodzące ze środowiska (transdukcja

sygnałów) poprzez receptory błonowe,

· przenoszeniu sygnałów do innych okolic komórki lub

przekazywaniu ich do innych komórek,

· oddziaływaniu między komórką i podłożem oraz między

komórkami.

Ich rolą jest też:

· oddzielenie wnętrza komórki od środowiska,
· oddzielanie w komórkach kompartymentów (przedziałów) o różnej

koncentracji różnych substancji (enzymów, jonów, substratów),

· pośredniczenie w transporcie biernym i czynnym,
· wytwarzanie potencjału elektrochemicznego - różnej koncentracji

jonów,

· miejsce przebiegu procesów (np. łańcuch transportu elektronów w

mitochondriach i chloroplastach)

Teorie budowy błon

1. Model lipidowy - W roku 1895 Overton opierając się na fakcie,

że substancje rozpuszczalne w tłuszczach wnikały do komórki bardziej
efektywnie niż nierozpuszczalne - wydedukował, że lipidy muszą
stanowić ważny składnik błony plazmatycznej.

2. Model dwuwarstwy lipidowej (1925) - Gortel i Grendel

ekstrahując  acetonem  lipidy  z  błon  erytrocytów  ludzkich  i  obliczając
powierzchnię  błonki  utworzonej  przez  ten  ekstrakt,  stwierdzili,  że  jest
ona  dwukrotnie  większa  od  powierzchni  wyjściowych  krwinek.
Sformułowali  więc  hipotezę,  że  błona  komórkowa  składa  się  z  dwóch
warstw  lipidowych,  sugerując  uwodnienie  obu  ich  stron  tzn.  polarne
główki  cząsteczek  lipidów  muszą  być  skierowane  na  zewnątrz,  a
niepolarne  łańcuchy  węglowodorowe  ku  sobie,  do  wnętrza  podwójnej
warstwy lipidowej.

3. Model trójwarstwowej błony (1935) - Dowson i Danielli

korzystając  z  obserwacji  Cole,  że  białka  dodane  do  emulsji  olejowo-
wodnej  w  znacznym  stopniu  obniżają  napięcie  powierzchniowe
pomiędzy  wodą  i  kroplami  oleju  (napięcie  takie  jak  w  naturalnych
błonach  komórkowych)  wysnuli  hipotezę,  że  błony  komórkowe
zbudowane są symetrycznie z podwójnej warstwy lipidowej pokrytej po
obu stronach warstwą białek.

4. Model płynnej mozaiki (1972) - Singer i Nicolson opublikowali

teorię modelu płynnej mozaiki w której białka nie tworzą warstwy na
powierzchni lipidów, lecz pływają w dwuwarstwie lipidowej zanurzone
w różnym stopniu. Błona taka jest asymetryczna, płynna i dynamiczna.

Składniki błon biologicznych

Wszystkie błony w komórce zbudowane są z lipidów i białek, oraz

mają wspólny plan budowy ogólnej.

Głównymi składnikami są lipidy i białka. Wzajemny stosunek

tych składników może być różny w różnych błonach, a ich ułożenie też
bywa zmienne.

Lipidy w błonach należą do trzech klas: fosfolipidów, glikolipidów

i lipidów obojętnych (sterole). Podstawową strukturą błony jest

dwuwarstwa  lipidowa  utworzona  z  fosfolipidów.  Błona  taka  stanowi
ośrodek,  w  którym  lipidy  i  białka  mogą  przemieszczać  się  po
powierzchni błony a także w poprzek błony.

Fosfolipidy zawierają dwie cząsteczki kwasów tłuszczowych

połączone z dwoma spośród trzech atomów węgla glicerolu. Trzeci

węgiel w glicerolu połączony jest z ujemnie naładowaną hydrofilową

grupą fosforanową do której z kolei jest przyłączony mały związek

hydrofilowy, taki jak cholina. Każda cząsteczka fosfolipidu zawiera więc

hydrofobowy „ogon", złożony z dwóch łańcuchów kwasu tłuszczowego,

oraz hydrofilową „głowę", gdzie znajduje się fosforan. Cząsteczki takie

jak fosfolipidy, z regionami zarówno hydrofobowymi jak i hydrofilowymi,

są nazywane cząsteczkami amfipatycznymi.

Zdolność fosfolipidów do tworzenia błon jest związana z ich

amfipatycznym charakterem. Fosfolipidy rozprzestrzeniają się na

powierzchni

wody,

tworząc

pojedynczą

warstwę

cząsteczek

fosfolipidowych, z hydrofobowymi „ogonami" skierowanymi ku górze, i

hydrofilowymi „głowami" kontaktującymi się z wodą. Dwie takie

jednocząsteczkowe warstwy mogą łączyć się na zasadzie „ogon z ogonem",

tworząc dwuwarstwę fosfolipidową. Taka orientacja jest najbardziej korzystna

pod względem energetycznym, gdyż pozwala na swobodny kontakt

hydrofilowych głów z wodą, podczas gdy hydrofobowe łańcuchy kwasów

tłuszczowych unikają kontaktu z wodą, gromadząc się w środku układu.

Dodatkowo cząsteczki fosfolipidów mają w przybliżeniu jednakową

szerokość, co również sprzyja układaniu się ich w podwójne warstwy

cylindrycznych struktur.

Cząsteczka fosfolipidu w błonie nie jest sztywna. Oprócz ruchów

obrotowych całej cząsteczki wokół swojej osi występuje rozchodzenie się
i zginanie łańcuchów kwasów tłuszczowych. Mniej ruchliwa jest okolica
polarna cząsteczki, natomiast schowane w głębi warstwy hydrofobowej
końce  łańcuchów  węglowodorowych  wykonują  szybkie  ruchy.
Ruchliwość  łańcucha  węglowodorowego  jest  tym  większa  im  jest  on
krótszy  i  ma  liczniejsze  wiązania  nienasycone.  Fosfolipidy  łatwo
przemieszczają  się  w  obrębie  jednej  warstwy  lipidowej  błony  (dyfuzja
boczna)  -  zachodzi  co  około  10

-6

sekundy. Natomiast wymiana

cząsteczek lipidów między jedną i drugą warstwą (tzw. ruchy flip-flop)
może być bardzo wolna i zachodzić raz na kilkaset godzin.

W komórkach bakterii i drożdży, które muszą adaptować się do różnych
temperatur,  zarówno  długość  jak  i  stopień  nienasycenia  kwasów
tłuszczowych są stale dopasowywane, tak aby utrzymać względnie stały
poziom  płynności  błony:  w  wyższych    temperaturach  komórka
wytwarza  lipidy  o  łańcuchach  dłuższych  i  zawierających  mniej  wiązań
podwójnych, co sprzyja zachowaniu stabilności i płynności błony.

Płynność  błon  umożliwia  fuzję  błon  ze  sobą  i  mieszanie  się  ich
składników,  co  przy  podziale  komórki  zapewnia  równomierne
rozdzielenie budujących błonę cząsteczek pomiędzy komórki potomne.

Glikolipidy - są to cząsteczki lipidów połączone z łańcuchami

polisacharydowymi.  Zlokalizowane  są  w  zewnętrznej  warstwie  błony.
Domeny  polarne  glikolipidów  wystają  ponad  powierzchnię  błony
komórkowej,  prezentując  swoje  grupy  polarne  do  środowiska.
Jakkolwiek rola glikolipidów nie jest do końca poznana, to przypisuje się
im rozmaite funkcje: 1) utrzymują asymetryczność błony komórkowej, 2)
oddzielają komórki od środowiska i stabilizują błonę komórkową, 3) są
receptorami  dla  niektórych  hormonów  peptydowych  i  toksyn
bakteryjnych,  4)  dzięki  specyficznej  kombinacji  topograficznej  reszt
cukrowych  w  błonach  erytrocytów  określają  grupy  krwi  (ABO).
Glikolipidy są na tyle ważnymi składnikami błon, że w przypadku wad
genetycznych  związanych  z  ich  metabolizmem  występują  duże
zaburzenia rozwojowe, kończące się przedwczesną śmiercią noworodka.
Warstwa  glikolipidów  pokrywa  większość  komórek  zwierzęcych
tworząc tzw. glikokaliks. Glikolipidy uzyskuja swoje grupy cukrowe w
aparacie Golgiego.

Sterole - zbudowane są ze sztywnego poczwórnego pierścienia

węglowego  z  bocznymi  podstawnikami.  W  komórkach  zwierzęcych
głównym  sterolem  (steroidem)  jest  cholesterol,  zaś  u  roślin  występują
fitosterole: sitosterol, kamposterol i stigmosterol. W błonie lokalizują się
pomiędzy łańcuchami węglowodorowymi fosfolipidów. Cholesterol jest
lipidem  o  słabych  właściwośćiach  amfipatycznych.  Jego  cząsteczka
składa się z części hydrofobowej – steroidowej  i łańcucha alifatycznego
dołączonego  do  węgla  17  w  pierścieniu  D.  Domena  hydrofilowa
reprezentowana  jest  przez  grupę  (OH

), związaną z 3. węglem w

pierścieniu  A.  Cholesterol  jest  umiejscowiony  w  błonie  komórkowej,
podobnie  jak  glikolipidy,  w  jej  zewnętrznej  warstwie.  W  niej  wiąże  się
swoją  grupą  hydroksylową  z  1.  węglem  łańcucha  alifatycznego  kwasu
tłuszczowego  fosfolipidu.  Cholesterol  jest  podstawowym  czynnikiem
regulującym  przepuszczalność  błon  komórkowych.  Położenie  grupy
hydrofobowej  pomiędzy  łańcuchami  alifatycznymi  fosfolipidów
zapobiega  przejściu  fazowemu  dużych  obszarów  błony  (  zapobiega
zbytniemu  zbliżaniu  się  łańcuchów  i  uniemożliwia  powstawanie
pomiędzy  nimi  oddziaływań  van  der  Waalsa,  co  prowadziło  by  do  ich
unieruchomienia  i  przejście  w  stan  stały),  utrzymuje  wewnętrzną,

hydrofobową  część  dwuwarstwy  lipidowej    w  stanie  płynnym.
Natomiast  grupy  polarne  cholesterolu  uszczelniają  oraz  usztywniają  i
stabilizują  zewnętrzne  krawędzie  dwuwarstwy  lipidowej,  zapobiegając
niekontrolowanej  migracji  małych  cząstek  rozpuszczalnych  w  wodzie
pomiędzy cząsteczkami fosfolipidów.

Białka błonowe umownie dzieli się na dwie grupy:

1.       Białka  które  dają  się  łatwo  usunąć  z  błony  wodą,  roztworami  soli
lub czynników chelatujących nie niszcząc dwuwarstwy lipidowej - są to
białka  powierzchniowe  (peryferyjne)  błony.  Są  one  luźno  związane  z
powierzchniami błony i często połączone z łańcuchami sacharydowymi
(glikoproteiny)  oraz  kwasami  tłuszczowymi  czy  długołańcuchowymi
alkoholami,  poprzez  które  polipeptydy  te  zakotwiczają  się  w  obrębie
błony. Białka powierzchniowe są cząsteczkami hydrofilnymi i najczęściej
występują  w  rejonach,  w  których  sterczą  z  błon  fragmenty  białek
integralnych

są

nimi

powiązane

oddziaływaniami

niekowalencyjnymi. Mogą również wiązać się z polarnymi fragmentami
fosfolipidów. Część białek może znajdować się całkowicie poza rejonem
błony, a jedynie wiązać się z nią za pomocą kowalencyjnego wiązania z
cząsteczką lipidową błony.
2.     Te które można wyizolować z błony do roztworu wodnego jedynie
w  postaci  kompleksów  z  detergentem  (solubilizacja  detergentem  -
przeprowadzenie  do  roztworu  wodnego  kompleksów  detergentu  i
składników błony) niszczącym uporządkowanie dwuwarstwy lipidowej
- są to białka integralne  na trwałe wbudowane w dwuwarstwę

Białka integralne mogą być zbudowane z jednej lub kilku podjednostek.
Fragmenty  cząsteczek  białkowych  mogą  wyłaniać  się  na  jednej  lub  na
obu  powierzchniach  błony,  bądź  są  prawie  całkowicie  schowane  w
części  hydrofobowej  dwuwarstwy  lipidowej.  Białka  integralne  mają  w
łańcuchu polipeptydowym przynajmniej jedną sekwencję składającą się
z  co  najmniej  22  aminokwasów  hydrofobowych,  które  pozwalają  na
zakotwiczenie się w błonie. W niektórych białkach reszty aminokwasów
hydrofobowych  tworzą  kilka  skupień,  co  sprawia,  że  łańcuch
polipeptydowy  kilkakrotnie  przemierza  dwuwarstwę  lipidową.  Koniec
karboksylowy [C] łańcuchów polipeptydowych czasem jest skierowany
do  cytoplazmy,  a  koniec  aminowy  [N]  na  powierzchnię  zewnętrzną
błony,  może  też  być  przeciwnie.  Białka  mogą  również  kotwiczyć  się  w

błonie  poprzez  kowalencyjnie  związane  z  nimi  łańcuchy  kwasów
tłuszczowych  lub  cząsteczkę  glikofosfolipidu.  Białka  błonowe
rozmieszczone  są  w  błonie  asymetrycznie.  Ich  ułożenie  nie  jest
przypadkowe  ale  wynika  ze  specyficznych  oddziaływań    łańcucha
polipeptydowego  z  dwuwarstwą  lipidową.  Wszystkie  te  cechy  białek
integralnych  przyczyniają  się  do  asymetrii  błony.  Większość  białek
integralnych błon biologicznych jest glikoproteinami

Funkcje białek błonowych

Wyróżnia się kilka klas funkcjonalnych białek błonowych:

1. Białka transportujące – uczestniczą w transporcie przez błony

małych  cząsteczek,  tworzą  kanały  i  pompy  prowadząc  transport
kontrolowany  (np.  pompa  sodowa,  aktywnie  wypompowuje  z
komórki jony sodu i wprowadza do niej jony potasu).

2. Białka wiążące – są elementami wyspecjalizowanych struktur

odpowiedzialnych za utrzymywanie łączności pomiędzy komórkami
lub

cytoszkieletem

(np.

integryny

wiążące

elementy

wewnątrzkomórkowe filamenty aktyny z białkami substancji
zewnątrzkomórkowej).

3. Białka receptorowe – pośredniczą w przekazywaniu informacji ze

środowiska zewnętrznego do komórki, związanie cząsteczki
sygnałowej indukuje zmiany w aktywności komórkowej (np. receptor
płytkopochodnego

czynnika

wzrostu,

który

wytwarza

wewnątrzkomórkowe sygnały powodujące wzrost i podział komórki).

4. Białka enzymatyczne – enzymy, których miejsca katalityczne

znajdują się po jednej ze stron błony bądź w jej wnętrzu (np. cyklaza
adenylanowa,  w  odpowiedzi  na  sygnały  zewnątrzkomórkowe
katalizuje  wytwarzanie  wewnątrzkomórkowego  cyklicznego  AMP,
będącego wewnątrzkomórkowym przekaźnikiem)

Uważa  się,  że  białka  integralne  pełniące  funkcje  transportowe,  których
łańcuch polipeptydowy wielokrotnie przemierza dwuwarstwę lipidową
- tworzy przez błonę kanały. Modele kanałów błonowych przyjmują, że
22-aminokwasowe  hydrofobowe  odcinki  łańcucha  polipeptydowego
tworzą  struktury  -helisy,  a  kilka  takich  -  helis  obok  siebie  stanowi
ścianę  kanału.  Oprócz  tych  zewnętrznych  -helis  mocujących  kanał  w
dwuwarstwie  lipidowej,  wewnątrz  kanału  mogą  biec  dodatkowe,

wewnętrzne

odcinki

łańcucha,

zbudowane

hydrofilnych

aminokwasów. Pełnią one właściwe funkcje transportowe np. białko
kanałów wapniowych.

Właściwości błon

Półpłynność: dwuwarstwa lipidowa błony biologicznej jest w

stanie  półpłynnym  lub  inaczej  płynno-krystalicznym.  Ze  względu  na
wysoki  stopień  uporządkowania  ma  ona  właściwości  krystaliczne
(fosfolipidy  ułożone  w  szeregi,  biegunem  polarnym  na  zewnątrz,
apolarnym do środka). Z drugiej zaś strony podwójna warstwa lipidowa
wykazuje  właściwości  płynne,  bowiem  pomimo  tego  uporządkowania
łańcuchy  węglowodorowe  pozostają  w  ciągłym  ruchu,  co  oznacza,  że
cząsteczki  fosfolipidów  mają  swobodę  rotacji  i  mogą  dyfundować  w
obrębie  pojedynczej  warstwy  błony,  w  której  występują.  Nadaje  to
podwójnej warstwie fosfolipidowej charakter cieczy krystalicznej, który
bywa  też  określany  jako  półpłynny.    Niektóre  błony  biologiczne  w
temperaturze optymalnej dla wzrostu komórki zawierają jednak pewne
lipidy  w  formie  krystalicznej.  Krystaliczna  struktura  jest  stanem,  w
którym  cząsteczki  lipidów  są  względem  siebie  uporządkowane,  co
powoduje ich wzajemne powiązanie a tym samym unieruchomienie .

Półpłynny charakter dwuwarstwy lipidowej w błonie komórek ma

ważne  znaczenie  biologiczne  dla  organizmów  żywych.  Zachowanie
odpowiedniej  płynności  błon  umożliwia  dyfuzję  białek  błonowych  w
płaszczyźnie  obu  warstw  fosfolipidów  i  ich  wzajemne  oddziaływanie
(np.  podczas  procesów  transdukcji  sygnałów),  wzajemne  zlewanie  się
błon  (np.  w  czasie  egzo-  i  endocytozy)  i  mieszanie  się  jej  składników
(zachodzące

podczas

podziałów

komórkowych).

Organizmy

poikilotermiczne  (zmienno  cieplne,  żyjące  w  środowisku  o  zmiennej
temperaturze)  takie  jak  bakterie  i  drożdże  dostosowują  skład  lipidowy
błon  do  temperatury  otoczenia  w  jakim  żyją.  Temperatura  przejścia
fazowego ich błon staje się wyższa wówczas, gdy organizm dostosuje się
do  wzrostu  w  podwyższonej  temperaturze,  a  niższa,  gdy  rośnie  w
hodowli  o  obniżonej  temperaturze.  To  dostosowanie  ma  istotne
znaczenie  dla  funkcji  błony  związanej  z  oddziaływaniem  różnych
cząsteczek  białkowych  i  lipidowych  wymagających  jej  półpłynnego
stanu.

Dynamiczność: jest wyrażona w ruchach budujących błonę

lipidów i białek. Cząsteczki fosfolipidów w błonie nie są sztywne. Mniej
ruchliwe  są  ich  okolice  polarne,  natomiast  zanurzone  w  głębi  warstwy
hydrofobowej  końce  łańcuchów  węglowodorowych  wykonują  szybkie
ruchy,  tym  szybsze  im  te  łańcuchy  są  krótsze  i  zawierają  liczniejsze
wiązania podwójne. Białka błony mogą natomiast być w jej płaszczyźnie
przemieszczane  dyfuzyjnie,  wykonywać  ruchy  obrotowe  w  osi
prostopadłej  do  powierzchni  błony  oraz  wynurzać  się  z  dwuwarstwy
lipidowej lub w niej zanurzać.

Ruchliwość składników błon powoduje zamykanie wszelkich wyrw i

ubytków. Błony w żywych komórkach nigdy nie tworzą wolnych

krawędzi. Dzięki temu wnętrze komórki i poszczególnych jej

przedziałów jest zawsze otoczone selektywnie przepuszczającą barierą.

Ponieważ błona jest dwuwymiarowym płynem, wiele jej białek, podobnie

jak i lipidów, może swobodnie poruszać się w obrębie płaszczyzny dwu-

warstwy lipidowej. Można to w sposób łatwy i oczywisty wykazać,

doprowadzając do fuzji komórki myszy z komórką ludzką, tworząc

podwójnej wielkości komórkę hybrydową, a następnie śledząc

rozmieszczenie białek błony komórkowej zarówno myszy, jak i

człowieka. Aczkolwiek na początku białka te pozostaną na powierzchni

swych odpowiednich połówek nowo powstałej komórki hybrydowej, to

już po niecałej godzinie dwa zestawy tych białek zostaną równomiernie

wymieszane na całej powierzchni komórki.

Jednakże obraz morza lipidów, w którym wszystkie białka pływają

swobodnie, jest zbyt uproszczony. Komórki mają swoje sposoby

ograniczenia lokalizacji poszczególnych białek błony komórkowej do

pewnych pól dwuwarstwy, co prowadzi do powstania na powierzchni

komórki wyspecjalizowanych funkcjonalnie obszarów, czyli domen

błonowych.

Białka mogą być złączone z trwałymi strukturami na zewnątrz komór-

ki, na przykład z cząsteczkami substancji międzykomórkowej. Białka

błonowe mogą być także zakotwiczone do względnie nieruchomych

struktur wewnątrz komórki, zwłaszcza do rozwiniętej pod powierzchnią

błony komórkowej części cytoszkieletu, czyli kory komórki. W końcu,

komórki

mogą

wytwarzać

bariery

ograniczające

obecność

poszczególnych składników błony do jednej domeny błonowej. Na

przykład w komórkach nabłonka wyścielającego jelito ważne jest, aby

białka transportujące, działające przy pobieraniu substancji odżywczych

z jelita, występowały tylko w szczytowej powierzchni komórek

(powierzchni zwróconej do światła jelita) oraz aby obecność innych

białek, wyprowadzających rozpuszczone substancje z komórki na-

błonkowej do tkanek i krwiobiegu, była ograniczona do powierzchni

podstawnej i bocznej (rys. 11-37). To asymetryczne rozmieszczenie białek

błonowych jest zachowywane dzięki barierze utworzonej wzdłuż

strefy, w której komórka jest zespolona z przyległymi komórkami

nabłonkowymi przez tak zwane, połączenia zamykające. W miejscu tym

wyspecjalizowane białka łączące formują wokół komórki ciągły pas,

gdzie kontaktuje się ona ze swoimi sąsiadami, wytwarzając ścisłe

zespolenie pomiędzy przylegającymi do siebie błonami komórkowymi.

Białka błonowe nie mogą w drodze dyfuzji przekroczyć tego połączenia.

Asymetryczność: polega na różnicach w budowie obu powierzchni

błony, skierowanych na zewnątrz  i ku wnętrzu komórki lub organelli.
Dwie warstwy dwuwarstwy często zawierają różny skład fosfolipidów i
glikolipidów  a  białka  są  wtopione  w  dwuwarstwę  ze  specyficzną
orientacją przestrzenną, konieczną dla ich funkcji. W błonie komórkowej
(plazmolemie) wyróżnia się dwie warstwy:

· warstwę lipidową zewnętrzną E (ang. exoplasmic) od strony

środowiska,

· warstwę lipidową cytoplazmatyczną P. (ang. protoplasmic) od

strony protoplazmy

Pomiędzy warstwami istnieją uchwytne różnice. Na przykład w

błonie  erytrocytu  człowieka  warstwa  E  zbudowana  jest  głównie  z
fosfolipidów  cholinowych  (fosfatydylocholin  =  lecytyn  i  sfingomielin),
natomiast  warstwa  P  zbudowana  jest  z  fosfolipidów  aminowych  tzw.
kefalin:  fosfatydyloseryny  i  fosfatydyloetanoloaminy.  Fosfolipidy
warstwy  P  mają  łańcuchy  węglowodorowe  zawierające  więcej
nienasyconych  wiązań  ,  a  fosfatydyloseryny  ponadto  noszą  jeden
ładunek  dodatni  i  dwa  ujemne,  mają  więc  przewagę  ładunków
ujemnych  (asymetria  jonowa).  Asymetria  dwuwarstwy  lipidowej  błony
komórkowej  jest  utrzymywana  głównie  przez  obecność  glikolipidów  i
glikosacharydów,  które  wchodzą  w  skład  zewnętrznej  (E)  warstwy
błony,  a  ich  reszty  cukrowe  są  eksponowane  na  zewnątrz  komórki.
Przykładem  glikolipidów  mogą  być  cząsteczki  noszące  własności
grupowe ABO erytrocytów człowieka.

Półprzepuszczalność (selektywność): przez błonę mogą swobodnie

przenikać tylko nieliczne związki np. H

O, CO

, glicerol; natomiast

większość  substancji,  aby  mogła  przeniknąć  przez  błonę  wymaga
obecności w błonie odpowiednich układów transportujących, którymi są
odpowiednie  białka  błonowe.  Przepuszczalność  błony  dla  danej
substancji  zależy  od  rozmiaru  i  ładunku  jej  cząsteczki.  Na  przykład
cząsteczki  wody  z  dużą  szybkością  przedostają  się  przez  szczelinę  w
podwójnej  warstwie  lipidowej,  powstałą  na  skutek  chwilowego
odchylenia  się  łańcucha  kwasu  tłuszczowego.  Bez  trudu  przez
dwuwarstwę  przenikają  gazy,  np.  tlen,  CO

i N

, małe cząsteczki

polarne,  np.  glicerol,  i  niektóre  większe  cząsteczki  apolarne
(hydrofobowe),  np.  węglowodory.  Cząsteczki  większe,  np.  glukoza  i
jony  różnej  wielkości  nie  przedostają  się  z  powodu  zbyt  dużych

rozmiarów  lub  na  skutek  odpychania  przez  ujemnie  naładowaną
powierzchnię  błony.  Przepuszczalność  dla  tych  związków  wiąże  się  z
występowaniem  w  błonie  specyficznych  białek  transportujących.
Wszystkie  błony  plazmatyczne  są  selektywnie  przepuszczalne  dla
różnych  rodzajów  cząsteczek  a  wynika  to  z  występowania  w
poszczególnych typach błon różnych zestawów białek transportujących.
W  odpowiedzi  na  zmianę  warunków  środowiska  lub  na  aktualne
zapotrzebowanie  komórki  błona  może  czasami  stawać  się  barierą  dla
danej substancji, w innych natomiast okolicznościach może je aktywnie
transportować.  Kierując  ruchem  cząsteczek,  komórka  jest  w  stanie
zapewnić  stałość  składu  jonowego  i  cząsteczkowego  swego
wewnętrznego środowiska.

Zdolność do fuzji: ważną cechą podwójnych warstw lipidowych

jest  unikanie  tworzenia  układów  z  wolnymi  końcami,  czego  wyrazem
jest spontaniczne zamykanie się błon w struktury pęcherzykowate, oraz
zdolność  w  określonych  warunkach  do  łączenia  się  z  innymi,
podobnymi strukturami błonowymi. Fuzja (łączenie się, zlewanie) błon
jest  powszechnie  występującym  procesem  i  ma  istotne  znaczenie  dla
funkcjonowania  komórki,  np.  podczas  endocytozy,  wydzielania  i
krążenia  składników  błon.  Zachodzi  też  w  wyspecjalizowanych
komórkach,  np.  podczas  egzocytozy  (wydzielania)  enzymów,
neurohormonów,  podczas  łączenia  się  komórki  jajowej  z  plemnikiem,
łączenia się mioblastów. Fuzja zachodzi też w procesach patologicznych,
np. w odpowiedzi zapalnej podczas tworzenia się komórek olbrzymich,
podczas wnikania do komórki wirusów z otoczką.

Pochodzenie lipidów i białek błonowych

Fosfolipidy syntetyzowane są z CDP-glicerydów i L-seryny.

Powstałe  fosfatydyloseryny  po  dekarboksylacji  przekształcają  się  w
fosfatydyloetanoloaminy,  a  te  z  kolei  podlegają  metylacji  do
fosfatydylocholin.  Fosfolipidy  mogą  być  też  pobierane  ze  środowiska
otaczającego.  Półokres  trwania  fosfolipidów  błon  in  vivo  może  być
stosunkowo długi (kilka tygodni -erytrocyt). Tam gdzie błony podlegają
szybkiej wymianie, fosfolipidy maja szybszy obrót.

Pochodzenie glikolipidów błony komórkowej może być różne. Są

one syntetyzowane w błonach śródplazmatycznych (ER) przez
dołączanie cukrów. Mogą też być pobierane z zewnątrz.

Większość

białek

integralnych

błon

biologicznych

jest

glikoproteinami  i  jest  syntetyzowana  na  rybosomach    związanych  z
błonami  siateczki  śródplazamatycznej  ziarnistej.  Początkowy  odcinek
końca  N  łańcucha  polipeptydowego  syntetyzowany  na  rybosomie
zbudowany z około 20 reszt aminokwasów ma charakter hydrofobowy
(jest  to  odcinek  sygnałowy)  i  dlatego  może  wnikać  do  dwuwarstwy
lipidowej błony. Tam zostaje on otoczony przez białka tworzące kanał w
dwuwarstwie  lipidowej,  przez  który  mogą  przesuwać  się  dalsze,
hydrofilne  części  łańcucha  pilipeptydowego.  Następnie  syntetyzowany
jest  drugi  odcinek  sygnałowy  polipeptydu  złożony  z  reszt
hydrofobowych  aminokwasów.  Podczas  wnikania  do  błony  przesuwa
on  białko  w  płaszczyźnie  poza  błonowy  kanał  białkowy.  Ten
hydrofobowy  odcinek  polipeptydu  zakotwicza  go  w  apolarnej
dwuwarstwie  lipidowej.  Hydrofilny  koniec  C  odcinka  polipeptydu  jest
syntetyzowany  najpóźniej,  a  jego  odłączenie  od  rybosomu  kończy
syntezę łańcucha.

Ten opis wbudowywania białek w błonę odpowiada hipotezie odcinków
sygnałowych.

Druga hipoteza wbudowywania białek integralnych błony opiera

się na stwierdzeniu, że wspólną cechą integralnych białek bonowych jest
ich nierozpuszczalność w roztworach wodnych. Ta cecha białek
integralnych w większym stopniu zależy od ich konformacji, niż składu
aminokwasowego.

Sekwencje

około

reszt

aminokwasów

hydrofobowych  obecne  w  wielu  białkach  błonowych  równie  często
znajdują  się  w  białkach  rozpuszczalnych.  Białka  przeznaczone  do
wbudowania  w  błonę  w  kontakcie  z  nią  przyjmują  konformację
przestrzenną,  która  powoduje  ich  przemieszczenie  się  z  fazy  wodnej
środowiska  cytoplazmatycznego  do  fazy  hydrofobowej  dwuwarstwy
lipidowej. Przykładem takich białek mogą być oksydaza cytochromowa,
dehydrogenaza  3-fosforanu  glicerolu,  cytochrom  b

, transferaza

galaktozylowa. Taki sposób wbudowywania białek do błony określa się
terminem fałdowania się białek zależnym od błony.

Glikokaliks

Powierzchnia komórek prokariotycznych i eukariotycznych

pokryta  jest  różnej  grubości  otoczką  zbudowaną  z  cukrów  o  różnym
stopniu  polimeryzacji.  Błona  komórkowa  bakterii  jest  otoczona  grubą
ścianą komórkową i otoczką śluzową zbudowaną z wielocukrów. Ściany
komórek  roślinnych  zbudowane  są  z  wielocukru  celulozy,  który  jest
zasadniczym  elementem  szkieletowym  tych  komórek,  określającym  ich
kształt  i  przeciwstawiającym  się  dużemu  ciśnieniu  osmotycznemu
wnętrza  komórki.  Warstwa  cukrowców  pokrywająca  powierzchnię
komórek  zwierzęcych  nosi  nazwę  glikokaliks.  Wszystkie  cukrowce
wchodzące  w  skład  glikoprotein,  proteoglikanów  i  glikolipidów
występują  tylko  na  powierzchni  zewnętrznej  błony  (na  powierzchni
komórki)  tworząc  cukrowcowy  „płaszcz”.  Jest  on  ważnym  elementem
ochrony  powierzchni  komórki  przed  uszkodzeniem  chemicznym  i
mechanicznym.  Ponieważ  oligosacharydy  i  polisacharydy  wchłaniają
wodę,  powodują  śliskość  powierzchni  komórki.  Pozwala  to  komórkom
ruchliwym,  takim  jak  krwinki  białe,  przeciskać  się  przez  wąskie
przestrzenie i zapobiega przylepianiu się krwinek do siebie lub do ścian
naczyń  krwionośnych.  Pokrywa  węglowodanowa  różnych  typów
komórek  różni  się  istotnie  zarówno  składem  reszt  cukrowych  jak  i
grubością.  Składa  się  ona  głównie  z  cukrów  prostych,  które  występują
zazwyczaj  jako  boczne  łańcuchy  związane  kowalencyjnie  z  białkami
błonowymi i lipidami. Ponadto obecne są w niej proteoglikany, związki
białkowo-węglowodanowe  syntetyzowane  w  komórce,  wydzielane  na
zewnątrz  i  adsorbowane  do  powierzchni  błony  komórkowej.
Mukopolisacharydowa otoczka komórki jest bardzo wrażliwa na każdą
fizjologiczną  zmianę  komórki.  Przypuszcza  się,  że  spełnia  ona  kilka
funkcji: 1) kotwiczenie białek transbłonowych w dwuwarstwie lipidowej
zapobiegające  ich  wypadnięciu  do  cytoplazmy,  2)  utrzymywanie
prawidłowego sfałdowania łańcucha polipeptydowego przez dołączone
reszty  cukrowe,  3)  pełnią  funkcję  sygnałów  kierujących  białka
transbłonowe  do  miejsca  przeznaczenia  w  błonie,  4)  charakterystyczny
dla  każdej  komórki  skład  i  konfiguracja  reszt  cukrowych  są
odpowiedzialne  za  wzajemne  rozpoznawanie  się  komórek  w  procesie
rozwoju organizmu i w czasie całego życia.

Kora komórki

Błona

otaczająca

komórkę

(podobnie

jak

błony

wewnątrzkomórkowe) jest bardzo cienka i delikatna, dlatego też

wzmocniona jest od strony wnętrza komórki „rusztowaniem” białek,

tzw. szkieletowych, podczepionych do błony poprzez specyficzne białka

transbłonowe. Białka szkieletowe kotwiczą się do niektórych białek

transbłonowych, np. glikoforyny lub białka trzeciego szczytu

elektroforetycznego, i są również powiązane wzajemnie, utrzymując

kształt komórki i zapewniając błonie elastyczność i wytrzymałość.

Rusztowanie to, zbudowane z sieci włóknistych białek zwane jest korą

komórki albo membranoszkieletem. Głównym składnikiem kory jest

białko spektryna. Występuje ono zawsze jako dimer dwóch wzajemnie

helikalnie splecionych monomerów i . Dimery spektryny wiążą się ze

sobą tworząc filamenty o długości ok. 100nm. Białko to buduje tuż pod

plazmolemą sieć stanowiącą podporę dla błony komórkowej i

utrzymującą kształt komórki. Sieć spektrynowa połączona jest z błoną

przez białko łącznikowe ankirynę (łączy ją z białkem integralnym,

białkiem trzeciego szczytu elektroforetycznego) oraz z cytoszkieletem

komórki, głównie filamentami aktynowymi. Obok spektryny i ankiryny,

kora komórki zawiera gęstą sieć filamentów aktynowych, które biegną

do cytoplazmy, gdzie zostają poprzecznie powiązane w trójwymiarową

sieć. Ta aktynowa sieć kory decyduje o kształcie i właściwościach

mechanicznych błony komórkowej i powierzchni komórki. Przetaso-

wania aktyny w obrębie kory stanowią molekularną podstawę zmian

kształtu komórki i jej ruchów.

Substancja międzykomórkowa

Przestrzeń między komórkami w tkankach i narządach

zwierzęcych wypełniona jest substancją międzykomórkową. Poprzez
oddziaływanie na swoiste receptory błon, białka substancji
międzykomórkowej mogą wpływać na morfologię, aktywność
metaboliczną, wzrost i różnicowanie komórek. Jest ona zbudowana z
włókien i substancji podstawowej. Wśród włókien substancji
międzykomórkowej dominują włókna kolagenowe i elastynowe.
Substancja podstawowa zawiera rozpuszczone prekursory białek
tworzących włókna, proteoglikany, glikoproteiny i inne cząsteczki
produkowane przez komórki. Należą do nich niektóre glikoproteiny
występujące w otoczeniu komórek, wpływające na ich wzajemne
oddziaływania oraz oddziaływania ze składnikami osocza. Substancja
międzykomórkowa jest ściśle powiązana z błoną komórkową za
pośrednictwem białek łącznikowych, takich jak np. fibronektyna czy
laminina. Białka te uczestniczą w oddziaływaniach komórek z substancją
międzykomórkową. Fibronektyna jest białkiem syntetyzowanym przez
wiele komórek, w tym fibroblasty, komórki nabłonkowe, komórki

śródbłonka. Białko to występuje w osoczu krwi i na powierzchni
komórek. Wraz z proteoglikanami pełni ważne funkcję pomostu
łączącego powierzchnię komórki z otaczającymi ją składnikami
substancji międzykomórkowej. Jednym końcem cząsteczka fibronektyny
wiąże się z włóknami kolagenowymi zaś drugim końcem z białkiem
transbłonowym – integryną, która z kolei jest powiązana z
cytoszkieletem komórki (filamentami aktynowymi). Innym poznanym
dobrze białkiem międzykomórkowym wpływającym na funkcje
komórek jest laminina. Jest główną niekolagenową glikoproteiną błon
podstawnych, które spajają komórki nabłonka z tkanką łączną. Białko to
warunkuje oddziaływanie między komórkami a błoną podstawną w
procesach adhezji, migracji, proliferacji i różnicowania komórek.

Transport przez błony biologiczne

TRANSPORT

PRZEZ BŁONĘ

PĘCHERZYKOWY

(z fragmentami błon)

bez

udziału

nośników

z udziałem nośników

egzocytoza

endocytoza:

dyfuzja
prosta

dyfuzja
złożona

dyfuzja

ułatwiona

transport

aktywny

pinocytoza

fagocytoza

·    pierwotny
·    wtórny
·

translokacja
grupowa

endocytoza
receptorowa

Transport bez udziału nośników:

Dyfuzja  prosta  -  wypadkowe  przemieszczanie  się  cząsteczek  z
obszarów o wyższym stężeniu do obszarów o niższym stężeniu, tak
że  ostatecznie  rozkład  cząstek  staje  się  równomierny  (dyfuzja  jest
zatem ruchem cząsteczek zgodnym ze spadkiem gradientu stężenia).
Szybkość  dyfuzji  zależy  od  wielkości  i  kształtu  cząsteczek,  ich
ładunku elektryczne go i temperatury otoczenia.
Dyfuzja  złożona  –  przenikanie  substancji  zachodzi  nie  tylko  pod
wpływem gradient stężenia, ale i innych bodźców, jak np. gradientu
potencjału elektrochemicznego czy gradientu ciśnienia
Osmoza  -  przemieszczanie  się  (dyfundowanie)  wody  z  obszarów  o
wyższym jej stężeniu do obszarów o stężeniu niższym.

Transport  z  udziałem  nośników  -  transport  przez  błony  z
uczestnictwem    w  przenoszeniu  różnych,  zlokalizowanych  w  błonie
białek.  W  ten  rodzaj  transportu  mogą  być  zaangażowane  dwa
mechanizmy:  dyfuzji  ułatwionej  (wspomaganej)  oraz  aktywnego
transportu.

W dyfuzji ułatwionej ruch cząsteczek odbywa się tylko w kierunku
zgodnym ze spadkiem gradientu stężenia (od wyższego do niższego)
-  błona  jest  przepuszczalna  dla  przemieszczanej  substancji,  lecz
obecność  w  błonie  specyficznego  nośnika,  wiążącego  czasowo
transportowaną  cząstkę  przyspiesza  jej  przemieszczanie  się  przez
błonę.  Białko  przenośnikowe  nie  ulega  w  tym  procesie  żadnym
zmianom; po odłączeniu jednej cząsteczki może natychmiast wiązać
się  z  drugą.  Przykładem  takiego  nośnika  jest  białko  transportujące
glukozę przez błonę komórkową erytrocytów.
Transport aktywny - transport cząsteczek wbrew gradientowi stężeń,
odbywający  się  kosztem  energii  metabolicznej.  Energia  do  tego
transportu pochodzi najczęściej z ATP, np. pompa sodowo-potasowa
-  zlokalizowana  w  błonach  plazmatycznych  grupa  specyficznych

białek,  które  wykorzystują  energię  pochodzącą  z  rozkładu  ATP  do
wymiany  jonów  sodowych  z  wnętrza  komórki  na  jony  potasowe
wnikające  z  zewnątrz.  W  tym  wypadku  wytwarzany  gradient
stężenia dotyczy cząstek obdarzonych ładunkiem, zatem w poprzek
błony  tworzy  się  nie  tylko  gradient  stężenia,  lecz  i  także  gradient
potencjału  elektrycznego.  Można  wyróżnić  trzy  różne  mechanizmy
transportu aktywnego:
translokacja  grupowa  –  gdy  energia  do  transportu  danej  cząsteczki
równa  jest  energii  potrzebnej  do  wytworzenia  nowych  wiązań
kowalencyjnych w transportowanej cząsteczce
transport  aktywny  pierwotny  –  gdy  energia  do  transportu  danej
cząsteczki  równa  jest  energii  potrzebnej  do  wytworzenia  nowych
wiązań kowalencyjnych w nośniku
transport  aktywny  wtórny  –  gdzie  aktywnie  transportowana
pierwsza  substancja  (np.  Na

) tworzy gradient potencjału

elektrochemicznego, który warunkuje transport innej substancji, np.
cukru, aminokwasu, zgodnie z tym gradientem.

Transport przez błonę można podzielić inaczej na bierny, czyli bez
nakładu energii ze strony komórki ( osmoza, dyfuzja prosta, złożona i
dyfuzja ułatwiona) oraz na transport aktywny, wymagający dostarczenia
energii metabolicznej

Przepuszczalność błony komórkowej dla danej substancji zależy

od  rozmiaru  i  ładunku  jej  cząsteczek.  Błona  jest  przepuszczalna,  gdy
cząsteczki  swobodnie  przez  nią  przenikają,  i  odwrotnie  -  jest
nieprzepuszczalna,  gdy  cząsteczki  nie  są  w  stanie  się  przez  nią
przedostać.  Błona  selektywnie  przepuszczalna  (półprzepuszczalna)
przepuszcza  tylko  niektóre  rodzaje  cząsteczek,  podczas  gdy  inne
zatrzymuje.

Niektóre cząsteczki przenikają przez podwójną warstwę lipidową dość
łatwo (szczeliną powstałą na skutek odchylenia się łańcucha kwasu
tłuszczowego) np. cząsteczki wody, tlen, dwutlenek węgla, azot, małe
cząsteczki polarne (np.glicerol) i niektóre większe cząsteczki niepolarne
(np. węglowodory). Cząsteczki większe, np. glukoza i jony różnej
wielkości nie przedostają się przez podwójną warstwę lipidową z
powodu zbyt dużych rozmiarów lub na skutek odpychania przez
naładowaną powierzchniową warstwę błony.

Półprzepuszczalność błony wiąże się z występowaniem w błonach

specyficznych białek transportujących zwanych nośnikami (dotyczy to

wszystkich błon plazmatycznych - otaczających i budujących różne

struktury). Błony są selektywnie przepuszczalne dla różnych rodzajów

cząsteczek. Zestaw białek transportujących zawarty w błonie

komórkowej czy w błonie organelli wewnątrzkomórkowych ściśle

określa, jakie substancje mogą wejść do komórki lub organelli oraz z nich

wyjść. Aby nadać impuls i zapewnić poprawny, złożony ruch drobnych

cząsteczek, zarówno wchodzących do komórki, jak i z niej wychodzących

oraz przemieszczanych pomiędzy cytozolem a różnymi organellami

komórki, każda błona w komórce zawiera charakterystyczny dla siebie

zestaw przenośników. Tak więc w błonie komórkowej znajdują się

przenośniki importujące substancje odżywcze, takie jak cukry,

aminokwasy i nukleotydy; w wewnętrznej błonie mitochondrialnej

znajdują się przenośniki do importu pirogronianu (w komórkach

roślinnych także: jabłczanu i szczawiooctanu) i ADP oraz eksportu ATP

itd. W odpowiedzi na zmianę warunków środowiska lub na aktualne

zapotrzebowanie komórki błona komórkowa może stawać się barierą nie

do przebycia dla cząstek danej substancji, w innych natomiast

okolicznościach może je aktywnie transportować.

Nośniki są białkami błonowymi niezbędnymi do przenoszenia

poprzez błony jonów oraz prawie wszystkich małych cząsteczek
organicznych

wyjątkiem

cząsteczek

rozpuszczalnych

rozpuszczalnikach

organicznych

oraz

małych

cząsteczek

nienaładowanych, które mogą przechodzić przez błonę w drodze dyfuzji
prostej. Każdy nośnik jest wysoce selektywny i często transportuje tylko
jeden  typ  cząsteczek.  Wyróżnia  się  dwa  rodzaje  nośników:    ruchome
(przenośniki,  permeazy)  i  nieruchome  czyli  kanały.    Przenośniki  są
białkami  integralnymi,  które  wiążą  rozpuszczoną  substancję  po  jednej
stronie błony i przenoszą ją na drugą stronę poprzez zmianę konformacji
przenośnika.  Tą  drogą  mogą  być  transportowane  zarówno  małe
cząsteczki organiczne, jak i nieorganiczne jony. Natomiast kanały  tworzą
w błonie małe hydrofilowe pory, przez które substancje mogą przechodzić
w drodze dyfuzji. Większość kanałów białkowych przepuszcza tylko jony
nieorganiczne i  dlatego określa się  je  jako  kanały jonowe. Komórki mogą
wprawdzie  przenosić  selektywnie  przez  swe  błony  także
makrocząsteczki,  takie  jak  białka,  ale  wymaga  to  znacznie  bardziej
skomplikowanego mechanizmu.

Łańcuchy

polipeptydowe

przebadanych

szczegółowo

białek

prowadzących transport przez błonę — zarówno przenośników, jak i

kanałów — wielokrotnie przechodzą przez dwuwarstwę lipidową.

Uważa się, że przechodząc wielokrotnie tam i z powrotem przez

dwuwarstwę, łańcuch polipeptydowy tworzy wyścielone białkiem ciągłe

przejście, pozwalające wybranym małym cząsteczkom hydrofilowym na

przechodzenie poprzez błonę bez wejścia w bezpośredni kontakt z

hydrofobowym wnętrzem dwuwarstwy lipidowej.

Zasadniczą różnicą między przenośnikiem a kanałem jest sposób, w jaki
rozróżniają one rozpuszczone cząsteczki, transportując tylko pewne  z
nich,  a  inne  nie.  Kanały  prowadzą  to  rozróżnienie  na  zasadzie  ich
wielkości  i  ładunku  elektrycznego:  gdy  kanał  jest  otwarty,  cząsteczki
dostatecznie małe i niosące odpowiedni ładunek mogą się prześlizgnąć
jak przez wąskie, otwarte drzwi zapadkowe. Przenośnik działa bardziej
jak jednokierunkowe drzwi obrotowe: pozwala wejść tylko tej cząsteczce,
która  pasuje  do  miejsca  wiążącego  na  białku  przenośnika  i  przenosi  te
cząsteczki poprzez błonę tylko pojedynczo, za każdym razem zmieniając
swą konformację. Przenośnik specyficznie wiąże przenoszoną cząsteczkę
w ten sam sposób, w jaki enzym wiąże swój substrat i to właśnie wymóg
specyficznego  wiązania  nadaje  transportowi  selektywność.  Aby
całkowicie  zrozumieć  sposób,  w  jaki  przenośnik  przeprowadza  czą-
steczkę poprzez błonę, musielibyśmy znać szczegóły jego trójwymiarowej
struktury, ale taka informacja istnieje na razie tylko w stosunku do nie-
licznych białek czynnych w transporcie przez błony. Jednym z nich jest
bakteriorodopsyna,    która  działa  jak  aktywowana  światłem  pompa
protonowa

zasadzie

najprostszą

drogą

umożliwiającą

małym,

rozpuszczalnym w wodzie cząsteczkom przejście z jednej strony błony

na drugą jest stworzenie hydrofilowego kanału. Funkcję tę pełnią w

błonach komórkowych białka kanałowe, tworzące wodne pory

transbłonowe, umożliwiające bierny ruch małych, rozpuszczalnych w

wodzie cząsteczek, zarówno między cytozolem i otoczeniem komórki, jak

i między cytozolem i wnętrzem organelli.

Tylko nieliczne białka kanałowe tworzą względnie duże pory; przykła-

dem są białka, które tworzą poleczenia komunikacyjne pomiędzy dwoma

przylegającymi komórkami oraz poryny tworzące kanały w zewnętrznej

błonie mitochondriów i pewnych bakterii. Jednak takie duże, działające

bez ograniczeń kanały powodowałyby katastrofalne przecieki, gdyby

bezpośrednio

łączyły

cytozol

komórki

przestrzenią

zewnątrzkomórkową. Dlatego też większość białek kanałowych w błonie

komórkowej komórek zwierząt i roślin jest całkowicie odmienna i ma

pory wąskie, o dużej selektywności. Prawie wszystkie te białka są

kanałami jonowymi, prowadzącymi wyłącznie transport jonów

nieorganicznych, głównie Na

, K

, Cl

, Ca

Dwie ważne właściwości odróżniają kanały jonowe od prostych porów

wodnych. Po pierwsze wykazują one selektywność jonową pozwalającą na

przejście tylko niektórych jonów nieorganicznych. Selektywność jonowa

zależy od średnicy i kształtu kanału jonowego oraz od rozmieszczenia

w wyściółce kanału naładowanych reszt aminokwasowych. Kanał jest

w pewnych miejscach dostatecznie wąski, aby zmusić jony do kontaktu

ze ścianą kanału, przez co przechodzić mogą tylko te jony, które mają

odpowiednią wielkość i ładunek. Na przykład wąskie kanały nie

przepuszczą dużych jonów, a kanały wyścielone ładunkami ujemnymi

uniemożliwią wejście jonów ujemnych ze względu na elektrostatyczne

odpychanie ładunków jednoimiennych. Na tej zasadzie powstały kanały

selektywne dla jednego tylko typu jonu, np. Na

lub Cl

. Każdy jon w

roztworze wodnym jest otoczony cienkim płaszczem cząsteczek wody;

uważa się, że dopiero zdjęcie większości towarzyszących cząsteczek wody

umożliwia przejście jonów jednego po drugim przez najwęższą część

kanału. Ten etap transportu jonu ogranicza maksymalną szybkość

przewodzenia jonów przez kanał. Tak więc w miarę wzrostu stężenia

jonów ich przepływ przez kanał początkowo wzrasta proporcjonalnie do

stężenia, ale następnie ulegnie wysyceniu przy maksymalnej szybkości.

Drugą ważną cechą odróżniającą kanały jonowe od prostych porów

wodnych jest to, że kanały jonowe nie są ustawiczne otwarte. Transport

jonów nie miałby dla komórki żadnej wartości, gdyby nie było sposobu

kontrolowania ich przepływu i gdyby wiele tysięcy kanałów jonowych

w błonie komórkowej było przez cały czas otwarte. Jak omówimy to póź-

niej, większość kanałów jonowych jest bramkowana; mogą one przełączać

się ze stanu otwartego w zamknięty przez zmianę konformacji, a przejście

takie jest regulowane warunkami panującymi w środku i na zewnątrz

komórki.

Kanały jonowe mają znaczną przewagę nad przenośnikami pod wzglę-

dem ich maksymalnej szybkości transportu. Przez jeden kanał może

w ciągu każdej sekundy przejść ponad milion jonów, co jest szybkością

1000 razy większą niż największa znana szybkość transportu

dokonywanego przez jakikolwiek przenośnik. Z drugiej strony, kanały

nie mogą sprzęgnąć przepływu jonów z żadnym źródłem energii, co

umożliwiłoby im prowadzenie transportu aktywnego. Tak więc funkcją

większości kanałów jonowych jest uczynienie błony przejściowo

przepuszczalną dla wybranych jonów nieorganicznych, głównie Na

, K

i Cl

, pozwalając — w czasie otwarcia bramek kanałów — na szybkie

dyfuzyjne przejście tych jonów poprzez błonę zgodnie z ich gradientami

elektrochemicznymi.

W wyniku aktywnego transportu prowadzonego przez pompy i inne

białka transportujące, większość stężeń jonowych po obu stronach błony

jest daleko odsunięta od równowagi. Dlatego też po otwarciu kanału jony

szybko przez niego przepływają. Takie szybkie wpływanie jonów

wytwarza puls ładunku elektrycznego albo doprowadzonego do komórki

(gdy jony wpływają), albo wyprowadzonego z komórki (gdy jony

wypływają). Przepływ jonów zmienia napięcie istniejące w poprzek błony

—potencjał błonowy — co zmienia siły elektrochemiczne stanowiące napęd

do przemieszczania wszystkich innych jonów poprzez błonę. Zarazem,

zmusza to inne kanały jonowe, specyficznie wrażliwe na zmiany

potencjału błonowego, do otwarcia się lub zamknięcia w ciągu

milisekund. Wynikająca stąd eksplozja aktywności elektrycznej może

szybko przemieszczać się z jednego obszaru błony komórkowej do

drugiego, przewodząc sygnały elektryczne. Ten typ sygnalizacji

elektrycznej nie jest ograniczony do zwierząt, ale występuje też u pier-

wotniaków i roślin; np. mięsożerna roślina, rosiczka, używa sygnalizacji

elektrycznej do wyczuwania obecności i złapania owadów.

Potencjał błonowy stanowi podstawę każdej aktywności elektrycznej

w komórce, zarówno roślin, zwierząt, jak i pierwotniaków.

Główną metodą stosowaną do badania ruchu jonów i zachowania się

kanałów jonowych w żywych komórkach są pomiary elektryczne.

Techniki zapisu elektrycznego zostały tak wspaniale udoskonalone, że

można obecnie wykrywać i mierzyć prąd elektryczny płynący przez

pojedynczy kanał. Procedura znana jako zapis metodą patch-clamp

pozwoliła odtworzyć zdumiewający obraz pracy indywidualnych

kanałów jonowych.

W metodzie tej bardzo cienka rureczka szklana jest używana jako

mikroelektroda do wytworzenia elektrycznego kontaktu z powierzchnią

komórki. Mikroelektrodę uzyskuje się przez rozgrzewanie rurki szklanej i

jej rozciągnięcie, co pozwala otrzymać niezwykle delikatną końcówkę o

średnicy rzędu kilku mikrometrów. Rurkę napełnia się wodnym

roztworem przewodzącym prąd, a końcówką naciska się powierzchnię

komórki. Przez delikatne zassanie wytwarza się szczelne złącze

elektryczne pomiędzy błoną komórkową a ujściem mikroelektrody. Jeśli

chcemy odsłonić cytozolową stronę błony, łatkę błony przychwyconą

mikro-elektrodą delikatnie oddzielamy od komórki. W drugi, otwarty

koniec mikroelektrody wprowadza się cienki metalowy przewód. Prąd

wchodzący do mikroelektrody przez kanały jonowe w małej łatce błony

zakrywającej końcówkę elektrody przechodzi poprzez przewód do

aparatów pomiarowych, a stąd do łaźni z płynem, w której jest

umieszczona komórka lub oderwana z niej łatka. Pomiary metodą

patch-clamp umożliwiają uzyskanie zapisu działania kanałów jonowych

we wszystkich typach komórek — nie tylko w dużych komórkach nerwo-

wych, znanych ze swej aktywności elektrycznej, ale również w komórkach

takich jak drożdże, zbyt małych, aby zachodzące w nich zjawiska elek-

tryczne wykryć jakąkolwiek inną metodą.

Zmieniając stężenie jonów środowiska po którejkolwiek stronie łatki

błony można sprawdzić, jaki jon będzie przechodził przez kanał. Przy od-

powiednim obwodzie elektronicznym można ustalić napięcie istniejące

w poprzek łatki błony, czyli potencjał błonowy, i utrzymywać go na sta-

łym, dowolnie wybranym poziomie. W ten sposób można sprawdzić, jak

zmiany potencjału błonowego wpływają na otwieranie się i zamykanie

kanałów w błonach.

Gdy obszar błony zamkniętej końcówką elektrody jest dostatecznie

mały, można natrafić na sytuację, w której będzie obecny tylko pojedyn-

czy kanał jonowy. Nowoczesna aparatura elektryczna jest dostatecznie

czuła, aby wykryć przepływ jonów poprzez pojedynczy kanał wyrażony

niezwykle małym prądem (rzędu 10~

A). Zachowanie się takich prądów

jest zazwyczaj zaskakujące; nawet przy utrzymaniu stałych warunków

prądy nagle pojawiają się i znikają, tak jakby ktoś przypadkowo bawił się

wyłącznikiem. Takie zachowanie sugeruje, że kanał ma ruchome części i

przełącza się tam i z powrotem od jednej do drugiej konformacji.

Ponieważ takie zachowanie pojawia się nawet przy doświadczalnym

utrzymaniu stałości warunków, wskazuje, że prawdopodobnie białko

kanału jest wybijane z jednej konformacji w drugą termicznymi ruchami

cząsteczek w jego otoczeniu. Jest to jeden z nielicznych przypadków, w

których można śledzić zmiany konformacyjne pojedynczej cząsteczki

białka. Wyłaniający się obraz drgającej maszyny poddanej stałym

poszturchiwaniom mógłby być z pewnością zastosowany do innych

białek mających ruchome części.

Jeśli kanały w przypadkowy sposób przechodzą z konformacji otwartej

do zamkniętej nawet wtedy, gdy warunki po każdej stronie błony są

stałe, zastanawiające jest, w jaki sposób ich stan może być regulowany

warunkami panującymi na zewnątrz komórki i w jej wnętrzu?

Odpowiedź jest taka, że przy zmianie odpowiednich warunków

przypadkowość zachowania zostaje zachowana, ale znacznie zmienia się

prawdopodobieństwo. Jeśli na przykład zmienione warunki wykazują

tendencję do otwierania kanału, to kanał będzie występował w

konformacji otwartej znacznie częściej, aczkolwiek nie pozostanie otwarty

w sposób ciągły. Gdy kanał jonowy jest otwarty, to jest otwarty

całkowicie, a kiedy jest zamknięty, to też całkowicie.

Odkryto dotąd ponad sto typów kanałów jonowych i ciągle znajduje się

nowe. Różnią się one między sobą głównie pod względem 1) selektywności

jonów — a więc typem jonów, których przepływ umożliwiają i 2) bramkowa-

nia — a więc warunków wpływających na ich otwieranie i zamykanie.

W przypadku kanału bramkowanego napięciem prawdopodobień-

stwo otwarcia jest kontrolowane przez potencjał błonowy. W przypadku

kanału bramkowanego ligandem, np. receptora acetylocholiny stan

otwarcia jest kontrolowany związaniem określonej cząsteczki (liganda)

z białkiem kanału. Otwarcie kanału aktywowanego przez stres jest

kontrolowane siłą mechaniczną przyłożoną do kanału. Rzęsate komórki

słuchowe w uchu są ważnym przykładem komórek, których działanie

zależy od tego typu kanału. Drgania akustyczne otwierają kanały aktywo-

wane przez stres powodując wpłynięcie jonów do komórek rzęsatych;

powoduje to powstanie sygnału elektrycznego, który jest przenoszony

z komórek włosowych do nerwu słuchowego przewodzącego sygnał do

mózgu .

Kanały bramkowane napięciem odgrywają główną rolę w przewodze-

niu sygnałów elektrycznych przez komórki nerwowe. Są one również

obecne w wielu innych komórkach, takich jak komórki mięśniowe i jajo-

we, pierwotniaki, a nawet komórki roślin, gdzie umożliwiają

przenoszenie sygnałów elektrycznych z jednej części rośliny do drugiej,

na przykład podczas reakcji zamykania liści u mimozy. Kanały jonowe

bramkowane

napięciem

mają

wyspecjalizowane

naładowane

elektrycznie domeny białkowe nazywane czujnikami napięcia, które są

niezwykle wrażliwe na zmiany potencjału błonowego: zmiany

przekraczające określoną wartość progową wywierają na te domeny

dostateczną siłę elektryczną, aby spowodować przełączenie się kanału z

konformacji zamkniętej w otwartą lub odwrotnie.

Stężenie jonów wewnątrz komórki jest bardzo różne od ich stężenia na

zewnątrz

Transport jonów poprzez błony komórkowe ma w biologii

zasadnicze znaczenie. Komórki utrzymują wewnętrzny skład jonowy

bardzo odmienny od tego, jaki istnieje w płynie otaczającym je, przy

czym różnice te są kluczowe dla przeżycia i funkcjonowania komórek. W

otoczeniu komórki substancjami rozpuszczonymi występującymi w

największych ilościach są jony Na

, K

, Ca

, Cl

i H

(protony), a ich

przechodzenie przez błonę komórkową stanowi istotną część wielu

procesów komórkowych. Na przykład komórki zwierzęce pompują Na

na zewnątrz, aby utrzymać małe stężenie Na

w cytoplazmie.

Pompowanie to pomaga w utrzymaniu równowagi ciśnień

osmotycznych po obu stronach błony: jeśli ono zawiedzie, woda wpływa

w drodze osmozy do komórki powodując jej pęcznienie i pęknięcie.

Przemieszczanie jonów poprzez błony komórki pełni też zasadniczą

rolę w działaniu komórki nerwowej.

jest najliczniejszym dodatnio naładowanym jonem (kationem)

obecnym na zewnątrz komórki, natomiast K

jest jonem najliczniej

występującym w jej wnętrzu. Jeśli komórka ma nie być rozerwana przez

siły elektryczne, ilość ładunków dodatnich wewnątrz komórki musi być

zrównoważona przez prawie równą ilość ładunków ujemnych, przy

czym to samo dotyczy ładunków w płynie otaczającym komórkę. Mały

nadmiar dodatnich lub ujemnych ładunków, zagęszczonych w

sąsiedztwie błony komórkowej jest dopuszczalny i pełni ważne funkcje

elektryczne.

Duże stężenie Na

na zewnątrz komórki jest zrównoważone głównie

przez zewnątrzkomórkowe jony Cl

. Duże stężenie K

wewnątrz komórki

jest zrównoważone przez cały zestaw ujemnie naładowanych jonów

(anionów) wewnątrzkomórkowych. Istotnie, większość związków

wewnątrzkomórkowych ma ładunek ujemny: poza Cl

, komórki zawierają

jony nieorganiczne, takie jak kwaśne węglany (HCO

), fosforany (PO

), metabolity organiczne — zawierające ujemnie naładowane grupy

fosforanowe i karboksylowe (COO

) — oraz makrocząsteczki, takie jak

białka i kwasy nukleinowe, również zawierające liczne grupy fosfora-

nowe i karboksylowe. Organiczne cząsteczki naładowane ujemnie są cza-

sem nazywane „utrwalonymi anionami" („fixed anions"), ponieważ nie

mogą uciec z komórki przekraczając błonę komórkową.

Cząsteczki i jony przechodzą poprzez błonę w drodze transportu biernego

lub aktywnego

Przy rozważaniu transportu ważnym pytaniem jest powód, dla

którego zachodzi on w danym, a nie w innym kierunku. Jeśli tylko istnieje

odpowiednia droga, przechodzenie cząsteczek z rejonów o ich dużym

stężeniu do rejonów o małym stężeniu jest korzystne energetycznie, a

więc przebiega spontanicznie. Taki ruch określamy jako bierny, ponieważ

nie wymaga żadnej innej siły napędowej. Jeśli na przykład rozpuszczona

substancja występuje poza komórką w stężeniu większym niż w komórce

i gdy w błonie komórkowej jest obecny odpowiedni kanał lub

przenośnik, substancja ta będzie spontanicznie przechodzić przez błonę

do komórki w drodze transportu biernego (nazywanego też dyfuzją

ułatwioną), bez wydatku energii ze strony transportującego białka.

Jednakże, aby przesunąć cząsteczkę lub jon wbrew gradientowi stężeń,

transportujące białko musi wykonać pracę. Musi ono pokonać różnicę

stężeń przez sprzężenie przenoszenia danych cząsteczek lub jonów z

innymi procesami, które dostarczą energii. Prowadzone tą drogą

przemieszczanie poprzez błonę określa się jako transport aktywny; jest

on dokonywany tylko przez specjalne typy przenośników, które mogą

do procesu transportu zaprząc określone źródła energii.

Napędem transportu biernego mogą być zarówno siły elektryczne, jak

i gradienty stężeń

Prostym przykładem przenośnika pośredniczącego w transporcie

biernym jest przenośnik glukozy obecny w błonie komórkowej komórek

wątroby ssaków, a także wielu innych typów komórek. Buduje go

łańcuch białkowy o 12 helisach transbłonowych. Uważa się, że białko to

może przyjmować przynajmniej dwie konformacje, miedzy którymi

oscyluje odwracalnie i przypadkowo. W jednej konformacji przenośnik

eksponuje miejsca wiążące glukozę na zewnątrz komórki, a w drugiej

eksponuje je do wnętrza komórki.

Gdy na zewnątrz komórki wątroby jest dużo glukozy (np. po posiłku),

jej cząsteczki wiążą się do wystawionych na zewnątrz miejsc wiążących;

gdy białko zmienia swą konformację, wprowadza te cząsteczki do

wnętrza i uwalania je do cytozolu, gdzie stężenie glukozy jest małe.

Odwrotnie, gdy poziom cukru we krwi jest niski (gdy jest się głodnym),

hormon glukagon stymuluje komórkę wątroby do wytwarzania dużej

ilości glukozy w drodze rozkładu glikogenu. W konsekwencji stężenie

glukozy w komórce staje się większe niż na zewnątrz, a glukoza wiąże się

do tych miejsc na przenośniku, które są eksponowane do wnętrza

komórki; gdy białko zmieni swą konformację na przeciwną, glukoza

zostaje wyprowadzona z komórki. Przepływ glukozy może następować

w którymkolwiek kierunku, ale zgodnie z gradientem stężenia glukozy

istniejącym poprzez błonę — do środka, jeśli więcej glukozy jest na

zewnątrz komórki i na zewnątrz, jeśli sytuacja jest odwrotna. To właśnie

tego typu białka transportujące, które umożliwiają przepływ substancji,

ale nie biorą udziału w określeniu jego kierunku, prowadzą transport

bierny. Chociaż bierny, transport ten jest jednak bardzo selektywny.

Miejsca wiążące na przenośniku glukozy wiążą tylko D-glukozę, lecz nie,

na przykład, jej zwierciadlane odbicie - L-glukozę, której komórki nie

mogą używać do glikolizy. O kierunku biernego transportu glukozy,

która jest cząsteczką nie naładowaną, decyduje po prostu gradient jej

stężenia. W przypadku cząsteczek naładowanych elektrycznie, zarówno

małych jonów organicznych, jak i nieorganicznych, w grę wchodzi

dodatkowa siła. W poprzek większości błon komórkowych występuje

różnica potencjałów, określana jako potencjał transblonowy wynikający z

różnej koncentracji ładunków elektrycznych po dwóch stronach błony.

Działa on z określoną siłą na każdą cząsteczkę, która niesie ładunek

elektryczny. Cytoplazmatyczna powierzchnia błony komórkowej ma

zazwyczaj potencjał ujemny ( więcej ładunków ujemnych) względem

otoczenia komórki, a to powoduje tendencję do wprowadzania dodatnio

naładowanych jonów lub cząsteczek do komórki, a wyprowadzania z niej

jonów lub cząsteczek naładowanych ujemnie. Równocześnie jednak czą-

steczki te będą miały tendencję do przemieszczania się w dół ich gradien-

tu stężenia. Taki gradient jest też formą magazynowania energii,

podobnie jak zgromadzona przed zaporą woda, która może zostać

wykorzystana do napędzania innego układu transportującego.

Wypadkowa siła kierująca poprzez błonę jony lub naładowane

cząsteczki składa się więc z dwóch sił składowych, z których jedna wynika

z gradientu stężenia, a druga z napięcia istniejącego poprzez błonę. Tę

wypadkową siłę określa się jako gradient elektrochemiczny dla danej

przenoszonej jednostki. Ten właśnie gradient determinuje kierunek

biernego transportu przez błonę. Dla pewnych jonów napięcie i gradient

stężenia działają w tym samym kierunku, tworząc względnie stromy

gradient elektrochemiczny. Tak jest na przykład w przypadku Na

, który

jest naładowany dodatnio i którego stężenie jest większe na zewnątrz ko-

mórki niż w jej wnętrzu. Dlatego też, gdy tylko Na

ma takie możliwości,

będzie dążył do wejścia do komórki. Gdy napięcie i gradienty stężeń

mają efekt przeciwstawny, wypadkowy gradient elektrochemiczny może

być mały. Przykładem jest tu K

, jon naładowany dodatnio, którego

stężenie wewnątrz komórki jest znacznie większe niż na zewnątrz.

Właśnie z powodu przeciwstawnych efektów K

ma mały gradient

elektrochemiczny poprzez błonę, mimo jego dużego gradientu stężenia i

dlatego wypadkowe przemieszczanie K

przez błonę jest niewielkie.

Transport aktywny przemieszcza jony i cząsteczki wbrew ich

gradientom elektrochemicznym

Komórki nie mogą polegać jedynie na transporcie biernym. Do

zachowania wewnątrzkomórkowego składu jonowego komórek i do

wprowadzania cząsteczek, których stężenie na zewnątrz jest mniejsze niż

w komórce, niezbędny jest aktywny transport cząsteczek i jonów wbrew

ich gradientowi elektrochemicznemu. Istnieją trzy główne drogi, którymi

komórki prowadzą transport aktywny: 1) przenośniki sprzężone sprzęgają

transport przez błonę jednej cząsteczki, zachodzący wbrew

gradientowi, z transportem innej, zgodnym z gradientem; 2) pompy

napędzane przez ATP sprzęgają transport wbrew gradientowi z hydrolizą

ATP; 3) pompy napędzane światłem, znajdowane głównie w komórkach

bakteryjnych

(bakteriorodopsyna),

sprzęgają

transport

wbrew

gradientowi z wprowadzeniem energii ze światła.

Ponieważ substancja, która ma się przemieszczać zgodnie z

gradientem, musi być uprzednio przetransportowana wbrew

gradientowi, niezbędne jest powiązanie różnych form aktywnego

transportu. Tak więc, w błonie komórkowej komórek zwierząt pompy

napędzane przez ATP wyprowadzają z komórki Na

wbrew jego

gradientowi elektrochemicznemu, a następnie Na

wpływa do komórek z

powrotem już zgodnie z tym gradientem. Ponieważ Na

wpływa do

cytozolu poprzez przenośniki sprzężone z Na

, jego napływ stanowi

napęd do aktywnego przemieszczenia wielu innych substancji do

komórki wbrew ich gradientom elektrochemicznym. Gdyby pompa Na

przestała działać, gradient Na

prędko by się wyrównał, a transport

poprzez przenośniki sprzężone z Na

uległby zatrzymaniu. Dlatego też

napędzana przez ATP pompa Na

odgrywa centralną rolę w transporcie

poprzez błony w komórkach zwierząt. W komórkach roślin, grzybów i

wielu bakterii podobną rolę odgrywają napędzane przez ATP pompy,

które wytwarzają protonowy gradient elektrochemiczny przez wy-

pompowywanie H

z komórki.

W procesie egzocytozy komórka pozbywa się produktów

odpadowych  lub  też  wytworzonych  przez  siebie  specyficznych
wydzielin w wyniku zlania się pęcherzyka z wydzieliną (lub wydaliną) z
błoną  komórkową.  Egzocytoza  polega  zatem  na  wbudowaniu  błony
tworzącej pęcherzyk wydzielniczy w błonę komórkową. Jest to również
podstawowy mechanizm powiększania się błon.

W procesie endocytozy komórka pochłania materiał pochodzący z

zewnątrz.  W  wyniku  fagocytozy  komórka  pochłania  cząstki  pożywienia
lub  bakterie.  Proces  ten  polega  na  otoczeniu  pochłanianych  cząsteczek
przez mikrofałdy błony komórkowej i utworzeniu wokół nich wakuoli.
Gdy cząstki są już całkowicie otoczone, dochodzi do fuzji  z lizosomami,
w których następuje rozkład pochłoniętego materiału.

Inną formą endocytozy jest pinocytoza, w wyniku której komórka

pobiera  z  zewnątrz  materiał  w  postaci  rozpuszczonej.  Małe  kropelki
płynu  zostają  uwięzione  w  mikrofałdach  błony  komórkowej,  z  której
odrywają  się  po  stronie  cytoplazmy  drobne  pęcherzyki.  Płynna
zawartość  pęcherzyków  przenika  powoli  do  cytoplazmy,  podczas  gdy
pęcherzyki powoli zmniejszają się stopniowo, aż w końcu znikają .

W endocytozie receptorowej specyficzne białka lub cząstki łączą

się  z  receptorami  białkowymi  zlokalizowanymi  w  błonie  komórkowej.
Kompleksy  cząstek  z  receptorami  przesuwają  się  wzdłuż  płaszczyzny
błony  do  zagłębień  opłaszczonych  (po  stronie  cytoplazmatycznej)
grzybkowatymi  strukturami.  W  wyniku  fuzji  (zlania  się)  zagłębienia  te
przekształcają się w opłaszczone pęcherzyki. Struktury opłaszczające są
białkami  (klatrynami),  które  formują  wokół  pęcherzyka  sieć.  W  kilka
sekund po oderwaniu się pęcherzyka od błony do cytoplazmy białkowa
sieć  oddysocjowuje.  Uwolnione  z  sieci  pęcherzyki zlewają  się z  innymi
podobnymi pęcherzykami, tworząc endosom - czyli większy pęcherzyk w
którym  transportowane  cząstki  nie  są  już  związane  z  receptorami
błonowymi.  Endosom  rozpada  się    z  kolei  na  pęcherzyki  dwóch
rodzajów:  jedne,  zawierające  receptory  ,  powracają  do  błony,  drugie  -
zawierające  wchłonięte  cząstki,  zlewają  się  z  lizosomem,  gdzie  zostają
przetworzone,  co umożliwia  ich wykorzystanie  przez  komórkę.  W  taki
sposób wchłaniany jest cholesterol do komórek zwierzęcych.