Sudan czarny wybarwia lipidy.

Procedura barwienia sudanem czarnym:

1. Sudan czarny B 10-15 min w temp. Pokojowej,

2. Przepłukać 50% etanolem,

3. Płukać wodą destyowaną

Materiału nie należy zatapiać ponieważ ulegnie odbarwieniu.

Przygotowanie barwnika: 0.2 – 0.3 g Sudanu Czarnego B należy zalać 100 ml 70% etanolu i orzewać przez ok 15 min. Następnie kilka razy delikatnie wstrząsnąć i powoli chłodzić w cieplarce a następnie w temp. Pokojowej. Przed użyciem należy przefiltrować.

Metodą schiff’a wybarwia się węglowodany.

Procedura barwienia:

1. Skrawki materiału płukać w 70% etanolu

2. Następnie na 5-10 min umieścić w 2% kwasie nadjodowym

3. Przepłukać w 70% etanolu

4. Szkiełka umieścić w kamerze i zalać płynem redukującym – 1 min

5. Płukać w 70% etanolu

6. Barwić odczynnikiem Schiff’a min. 2h w temp 37°C

7. Płukać pod bieżącą wodą aż do uzyskania zabarwoienia

8. Przepłukać wodą destylowaną

Przygotowanie barwnika: 1g fuksyny zasadowej rozpuścić w 200ml ogrzanej do 70°C wody destylowanej. Następni oziębić do 50°C i przesączyć przez zakwaszony sączek. Dodać 20 ml 1M HCl oraz 1g kwaśnego siarczanu IV bezwodnego sodu (zamiennie 1g pirosiarczanu sodu lub pirosiarczanu potasu). Pozostawić na 24h. Po upływie czasu dodać 2g węgla aktywnego, wymieszać i przesączyć do uzyskania klarownej cieczy.

Kwas nadjodowy: 0,4g kwasu nadjodowego rozpuścić w 35 ml 95% alkoholu z 5 ml 0,5M octanu sodu i dodać 10 ml wody destylowanej.

Mieszanina redukcyjna: 1g jodku potasu i 1g tiosiarczasu sodu rozpuścić w 30 ml 95% etanolu i 20 ml wody destylowanej. Po wymieszaniu do rostworu dodać 0,5 ml 2M HCl.

Jak działa DAPI?

Jak działa oranż akrydyny?