Chromatografia cienkowarstwowa, biologia, biochemia


Chromatografia cienkowarstwowa (TLC - z ang. Thin Layer Chromatography) jest najbardziej popularną metodą szybkiego sprawdzania postępu reakcji chemicznej i czystości produktu. Może być także wykorzystywana do identyfikacji związków zarówno organicznych jak i nieorganicznych. W chromatografii cienkowarstwowej mieszanina substancji jest rozdzielana na poszczególne składniki ze względu na różnice w szybkości ich przemieszczania się na podłożu wykonanym z aktywnego adsorbenta stanowiącego fazę nieruchomą. Poszczególne składniki mieszaniny z różną siła wiążą się z polarnym adsorbentem, a następnie wymywane są z niego rozpuszczalnikiem stanowiącym fazę ruchomą. Im bardziej polarna jest badana substancja, tym silniej wiąże się z fazą stałą i tym trudniej jest wymywana przez eluent. Im bardziej polarny jest eluent, tym więcej polarnych centrów aktywnych fazy stałej jest przez niego blokowane, co zmniejsza „opory” przesuwania się eluowanych substancji. Jako fazy stałe najczęściej stosowany jest żel krzemionkowy, tlenek glinu i sproszkowana celuloza. Podłoże stanowi zazwyczaj szkło, folia aluminiowa lub poliamidowa.

Faza stacjonarna

Żel krzemionkowy

Żel krzemionkowy jest jednym z najbardziej popularnych adsorbentów stosowanych w chromatografii cienkowarstwowej. Jest on otrzymywany przez hydrolizę krzemianu sodu, jego kondensację i polimeryzację w trakcie prażenia. Jego struktura wyglada w przybliżeniu następująco:

0x01 graphic

Aktywność żelu krzemionkowego zapewniają grupy Si-OH (silanolowe) obecne na jego powierzchni. Wytwórcy kontrolują aktywność na etapie prażenia. Żel stosowany w TLC ma średnicę ziaren w zakresię 5-10 ၭm. Typy żelu krzemionkowego oznaczane są często w sposób następujący:

Żel krzemionkowy G - zawiera 13% gipsu jako czynnika wiążącego

Żel krzemionkowy H bez środka wiążącego

Żel krzemionkowy F254 z fluorescentem

Żel krzemionkowy UV254 z fluorescentem

Jako fluorescent zazwyczaj stosowany jest siarczek cynku.

Żel krzemionkowy ma odczyn lekko kwaśny i może być stosowany do rozdziału sterydów, aminokwasów, węglowodorów, tłuszczów, alkaloidów itp.

Tlenek glinu

Aktywność tlenku glinu związana jest z obecnością zarówno atomów tlenu jak i glinu. Metoda produkcji polega na kondensacji uwodnionego wodorotlenku glinu. Może on być

0x01 graphic

produkowany w trzech odmianach kwasowości powierzchni: formie kwasowej, zasadowej i obojętnej. Zasadowy tlenek glinu z w/w jest najbardziej popularny. Tlenek glinu jest używany do rozdziału sterydów, barwników, witamin i alkaloidów.



Wyszukiwarka

Podobne podstrony:
Chromatografia podzialowa, Studia, Biochemia i biologia molekularna
Biochemia ukladu nerwowego, Biologia, Biochemia
Chromatografia cienkowarstwowa planarna TLC
Utlenianie biologiczne BIOCHEMIA
Biochemia pytania kolokwia, biologia, biochemia1
PR0gr rat niestacjonarne 2009 (poprawiony)(2), biologia, biochemia, biochemia (JENOT15) (2)
Mięśnie przyczepy i czynnosć !!!, Anatomia, Biologia, Biochemia
kwn, Biologia, biochemia
Sprawozdanie Chromatografia cienkowarstwowa polarnych lipidów złożonych mózgu
Biologia biochemia, Biologia
Hematopoeza, Biologia, Biochemia
pytania z egzaminu z biochemii, Biologia, biochemia
CHROMATOGRAFIA CIENKOWARSTWOWA I KOLUMNOWA, NAUKA, WIEDZA
Glikoliza, biologia, biochemia, cykl glukozy
ANATOMIA EGZAMIN, Anatomia, Biologia, Biochemia
Ezamin z Biochemii dla wydziału WTŻ 2008, Biologia, Biochemia
Suplement z biochemii(1), biologia, biochemia
sciagaaaaa, Biologia, Biochemia
chromatografia cienkowarstwowa TLC, podstawy chemii organicznej

więcej podobnych podstron