podstawy biotechnologii

2011-10-19

modyfikowane genetycznie od 1977 wprowadzae

firmy biotechnologiczne

AgrEvo → … → bayer

American Cyanamid

AC

Calgene

DeKalb Genetics Co.

DGC

DNAP Co.

Optimum Wuality Grain

tolerancje na herbicydy i insekcytydy

masło kakaowca z rzepaku

pomidor o przedłużonej trwałości do 40 dni po zbiorze

hymozyn

ryby zamiast 3 lat gotowe do handlu w 1.5 roku

problem powtórzyć konstrukt, patenty

mutageneza też GMO

uszkodzenia na kukurydzy a odporność Bt

korzenie i łodygi zjadane przez chrząszcze

fuzarium - grzybowa choroba, ochrona przez wszczepienie genów hitynazy, mykotoksyny

rozwój biotechnologii

selekcja

krzyżowanie (9-11pokoleń)

sztuczne porażenie

heterozja

krzyżowanie oddalone mimo barier pozygotycznych

kolchicynowanie - podwojenie liczby chromosomów, więcej chlorofilu, więcej subst. zapasowych kolchicyna powoduje blokadę wrzeciona kariokinetycznego

mutageneza chemiczna lub fizyczna (548 odmian uprawnych z nasion po gamma radiacji)

mutageny:jodoacetamid

cybrydy - jądro z jednej komórki a organella z drugiej

kultury pylnikowe (głównie ziemniaki i jęczmień pszenica i kukurydza w trakcie badań)

selwy - samo zapylenie

utrudnione przez samoniezgodność

łatwo utrzymać homozygotyczne

haploidalne żyto, ogórki

zmienność somaklonalna - zjawisko po przejściu przez kultury in vitro; ze względu na metylacje

uzyskano kilkanaście odmian

transformacja jądrowa jest losowa

transformacja plastydów trudna ale precyzyjna

transformacja mitochondriów nie uzyskana

metabolomika

taumatyna

„śmieciowe” DNA

metody dostarczania DNA do komórki

1) metody pośrednie - transformacja bakteryjna

Agrobacterium tumefaciens

Agrobacterium rhizogenes

nadają się - zawiesina (kanamycyna, ryfanbicylina bo bakterie zarosły by szalke), zranione eksplantaty, infiltracja z podciśnieiem (rzodkiewnik tylko, pozwala uzyskać nasiona transgeniczne)

tumor (guzowatość) wywołane przez powyższe bakterie

plazmid ti

2) bezpośrednie metody

• protoplasty z glikolem polietylenowym (PEG) powoduje że powstaja pory w błonie komórkowej, proces odwracalny)

• elektroporacja protoplastów

• włókna węglowo-silikonowe - włókna opłaszczone DNA plazmidowym i wytrząsane w tkanką roślinną, nieużywane

• mikroinjekcja protoplastów -

• strzelba genowa - helem mikrokuleczki złota (najlepiej) opłaszczone DNA wtryskiwane na liść; wydajność mała bardzo

preferencja kodonów (różnica między eukariota a progariąta) mimo że 4 kodony dają prolinę)

sekwencje [szindergardo]

mitochondrium człowieka - 16 genów

transformacja

enzymy restrykcyjne - lepkie końce lub na tępo

konstrukt

gen markierowy -

MCS ([multiclonik sajt])

defosforylacja bo samozlepienie

elektroforacja

lub

[hitszok]

pożywka selekcyjna

izolacja DNA plazmidowego