HODOWLE

PERIODYCZNE I

CIĄGŁE

DROBNOUSTROJÓ

Jaskóła Karolina
Kiszka Eunika
Kusak Julia

ACINETOBACTER SP.

 bakteria tlenowa

 Gram ujemna

 nie wytwarza rzęsek ani
endospor.

 małe wymagania odżywcze,

 różnorodne mechanizmy
oporności
na antybiotyki

 łatwość rozprzestrzeniania się
w
środowisku wodnym

WYZNACZENIE KRZYWEJ KALIBRACYJNEJ DO

OZNACZENIA STĘŻENIA FENOLU

y=ax

+bx

Obliczenia:
x

=X

-(X)

/N  x

=1,1

y

=Y

-(Y)

/N  y

=0,623

x*y=X*Y-(X* X)/N  x*y=0,828

b= x*y/x

Współczynnik b tego równania
wynosił:
b=0,754
przyjmujemy, że a=0.
Więc równanie krzywej ma postać:

y=0,754x

KRZYWA KALIBRACYJNA STĘŻENIA

FENOLU

czas,

min

A 550 rozc.

c F,

A 550 rozc.

c F,

średni

A 600

c F,

0,144

0,062

0,80

0,158

0,075

0,97

0,151

0,89

0,164

0,054

0,70

0,182

0,041

0,53

0,173

0,62

105

0,146

0,022

0,14

0,222

0,01

0,13

0,184

0,14

150

0,235

0,017

0,02

0,275

0,05

0,06

0,255

0,04

195

0,25

0,056

0,07

0,336

0,04

0,05

0,293

0,06

240

0,322

0,053

0,07

0,361

0,08

0,10

0,342

0,09

285

0,371

0,026

0,03

0,465

0,049

0,06

0,418

0,05

330

0,457

0,033

0,04

0,579

0,082

0,11

0,518

0,07

375

0,596

0,017

0,02

0,638

0,093

0,12

0,617

0,07

420

0,599

0,624

0,047

0,06

0,6115

495

0,597

0,604

0,6005

Zależność stężenia fenolu oraz

liczby komórek drobnoustrojów od

czasu

czas,

min

A 550 rozc.

c F,

A 550 rozc.

c F,

średni

A 600

c F,

0,152 0,153

1,99

0,162

0,142

1,84

0,157

1,91

0,18

0,131

1,70

0,183

0,122

1,58

0,182

1,64

105

0,195 0,071

0,92

0,202

0,12

1,56

0,199

1,24

150

0,217 0,055

0,71

0,216

0,072

0,93

0,217

0,82

195

0,25

0,086

0,56

0,26

0,07

0,45

0,255

0,51

240

0,291 0,134

0,17

0,262

0,13

0,17

0,277

0,17

285

0,34

0,075

0,10

0,33

0,061

0,08

0,335

0,09

330

0,424

0,07

0,09

0,419

0,06

0,08

0,4215

0,08

375

0,489 0,064

0,08

0,486

0,053

0,07

0,4875

0,08

420

0,593

0,511

0,00

0,552

465

0,622

495

0,617

0,631

0,624

Zależność stężenia fenolu oraz

liczby komórek drobnoustrojów od

czasu

czas,

min

A 550 rozc.

c F,

A 550 rozc.

c F,

średni

A 600

c F,

0,151 0,202

2,62

0,138 0,215

2,79

0,145

2,71

0,127 0,188

2,44

0,171 0,183

2,38

0,149

2,41

105

0,136 0,128

1,66

0,181 0,158

2,05

0,159

1,86

150

0,168 0,135

1,75

0,195 0,125

1,62

0,182

1,69

195

0,198 0,096

1,25

0,226 0,098

1,27

0,212

1,26

240

0,218 0,134

0,87

0,26

0,084

1,09

0,239

0,98

285

0,240 0,066

0,43

0,301 0,120

0,78

0,271

0,60

330

0,283 0,264

0,34

0,347 0,209

0,54

0,315

0,44

375

0,361 0,082

0,11

0,337 0,125

0,16

0,349

0,13

420

0,403

0,428 0,096

0,12

0,416

0,12

465

0,501

495

0,536

0,512

0,524

Zależność stężenia fenolu oraz

liczby komórek mikroorganizmów

od czasu

czas,

min

A 550 rozc.

c F,

A 550 rozc.

c F,

średni

A 600

c F,

0,116

0,296

3,84

0,153

0,325

4,22

0,135

4,03

0,122

0,259

3,36

0,16

0,312

4,05

0,141

3,71

105

0,132

0,259

3,36

0,186

0,271

3,52

0,159

3,44

150

0,15

0,196

2,54

0,19

0,237

3,08

0,170

2,81

195

0,165

0,16

2,08

0,243

0,19

2,47

0,204

2,27

240

0,184

0,134

1,74

0,236

0,133

1,73

0,210

1,73

285

0,203

0,095

1,23

0,266

0,113

1,47

0,235

1,35

330

0,239

0,209

1,36

0,304

0,108

1,40

0,272

1,38

375

0,27

0,136

0,88

0,338

0,06

0,78

0,304

0,83

420

0,282

0,506

0,66

0,387

0,335

0,33

495

0,39

0,453

0,422

Zależność stężenia fenolu oraz

liczby komórek mikroorganizmów

od czasu

czas,

min

A 550 rozc.

c F,

A 550 rozc.

c F,

średnie średnie

A 600

A 600 c F, mM

0,133 0,337

4,37

0,142 0,395

5,13

0,138

4,75

0,135 0,318

4,13

0,126 0,348

4,52

0,131

4,32

105

0,198 0,308

4,00

0,139

0,29

3,76

0,169

3,88

150

0,165 0,289

3,75

0,15

0,175

2,27

0,158

3,01

195

0,164 0,213

2,76

0,189

0,2

2,60

0,177

2,68

240

0,198 0,198

2,57

0,232 0,192

2,49

0,215

2,53

285

0,21

0,194

2,52

0,222 0,184

2,39

0,216

2,45

330

0,236 0,171

2,22

0,234 0,156

2,02

0,235

2,12

375

0,281 0,161

2,09

0,307 0,128

1,66

0,294

1,88

420

0,33

0,139

1,80

0,338 0,116

1,51

0,334

1,65

495

0,392

0,393

Zależność stężenia fenolu oraz

liczby komórek Acinetobacter od

czasu

Porównanie wzrostu komórek

bakteryjnych w pożywkach o

różnej zawartości fenolu

Porównanie spadku stężenia fenolu w

hodowlach bakteryjnych o różnej

początkowej zawartości fenolu

Wnioski:



Szczep Acinetobacter sp. rozkłada fenol



Czas rozkładu tego związku zależy od jego stężenia

w środowisku – im wyższe stężenie tym dłuższy jego
rozkład



Związki fenolowe są trwałe i mogą być groźne dla

organizmów żywych.



Umiejętności bakterii do rozkładu fenolu mogą być

     wykorzystywane w procesie oczyszczania skażonych

     terenów oraz ścieków

czas [h]

rozcieńczen

CFU

CFU/1ml

Średni

CFU/1ml

log

CFU/1ml

10^-4

285

28500000

27833333,33 7,44456522

10^-5

35000000

10^-6

20000000

10^-4

302

30200000

56066666,67 7,74870474

10^-5

38000000

10^-6

100000000

10^-4

372

37200000

36066666,67 7,55710601

10^-5

41000000

10^-6

30000000

10^-5

513

513000000

517666666,7 8,7140502

10^-6

540000000

10^-7

500000000

10^-5

623

623000000

721000000 8,85793526

10^-6

740000000

10^-7

800000000

10^-5

689

689000000

863000000

8,9360108

10^-6

800000000

10^-7

110000000

10^-6

111

111000000

1370000000 9,13672057

10^-7

200000000

10^-8

100000000

CFU/1ml = rozcieńczenie*CFU*10

liczba podziałów:

n= 5,247366

częstość podziałów:

v= 1,749122 [1/h]

wiek osobniczy szczepu:

g= 0,571715 [h]

log





v 



HODOWLA

OKRESOWA

DROBNOUSTROJ

ÓW

Pomiar

sączka

sączka bakterie

bakterii

[g]

obj. [ml] m.bak.

[kg]

m.bakter

ii [kg/l]

początek

0,0796

0,0824

0,0028

0,0000028

0,00028

koniec

0,078

0,0806

0,0026

0,0000026

0,00026

Zależność stężenia fenolu od

liczby komórek Acinetobacter

od czasu

4 mM Ciągła

WNIOSKI:



Hodowla okresowa Acinetobacter rozkłada
fenol i korzysta z niego jako źródło węgla.
Dowodem na to jest spadek stężenia fenolu i
przyrost biomasy bakterii



Ewentualne fluktuacje (wzrost stężenia
fenolu) mogą wynikać z chwilowego
związania fenolu na powierzchni komórki
bakteryjnej

Periodyczna

Ciągła

Porównanie hodowli o stężeniu 4
mM periodycznej i ciągłej

Wzór:

µ = (1/x

) * [(x

– x

) / (t

– t

)]

µ - właściwa szybkość wzrostu
x

- ilość biomasy w bioreaktorze w czasie t

, kg

– ilość biomasy w bioreaktorze w czasie t

, kg

t1 – czas pierwszego pomiaru biomasy, h
t2 – czas drugiego pomiaru biomasy, h

µ = (1/x

) * [(x

– x

) / (t

– t

)]

µ = (1/ 0,0000028) * [(0,0000026-0,0000028)/

(1,5-0)]
µ = -0,04762 bakterii/h

Ilość bakterii zmalała – maszyna była ustawiona na zbyt

szybkie odprowadzanie biomasy

PRZYROST BIOMASY

OBLICZENIA

DZIĘKUJEMY
ZA UWAGĘ ;)

Document Outline