background image

PODSTAWY BIOTECHNOLOGII 
 

NAMNAŻANIE MATERIAŁU POSIEWOWEGO  

-  CHARAKTERYSTYKA ILOŚCIOWA (2h) 

 

 

 
 Oznaczanie liczby drobnoustrojów przy użyciu komory Thoma: 
 
Procedura oznaczania komórek w komorze Thoma: 

•  po ustawieniu oświetlenia w mikroskopie należy znaleźć siatkę komory, najpierw pod 

obiektywem o powiększeniu 10 x, a następnie 40 x

•  otrzymaną zawiesinę drożdży wytrząsać przez kilka minut, następnie przenieść szybko 

pipetą do komory Thoma, 

•  obliczyć średnią liczbę komórek w ok. 40 małych kwadracikach,  (w sumie należy 

policzyć ok. 700 komórek), 

•  wyliczyć liczbę komórek w 1 cm

3

 badanej zawiesiny drożdży. 

 
Liczbę komórek (N) znajdujących się w 1 cm

3

 badanej próbki wyznaczyć z następującego 

wzoru: 

N = 4 x 10

6

 x a

śr

 x r 

 

gdzie: a

ś

r

 – średnia liczba komórek znajdujących się w małym kwadracie, 

 

r – rozcieńczenie badanej próbki. 

 
 
 
ZADANIE: 
Znając liczbę komórek zawartych w 1 cm

3

 materiału zaszczepiennego oraz zakładając, że  

liczba komórek drożdży w 1 cm

3

 brzeczki fermentującej po zaszczepieniu powinna 

zawierać się w przedziale od 10

4

 do 10

6

. Wyliczyć potrzebną ilość gęstwy drożdżowej do 

zaszczepienia 160 hl brzeczki nastawnej. 

 

 

NAMNAŻANIE MATERIAŁU POSIEWOWEGO 

-

  CHARAKTERYSTYKA JAKOŚCIOWA 

 

 

1.

  Określenie żywotności i stanu odżywienia  gęstwy drożdżowej 

a)

  Pobrać kroplę przygotowanej zawiesiny i umieścić na szkiełku 

przedmiotowym. 

b)

  Dodać kroplę roztworu błękitu metylenowego i obserwować komórki drożdży 

pod mikroskopem. 

background image

c)

  Komórki martwe barwią się na niebiesko, żywe są bezbarwne. 

d)

  Podać procent martwych komórek. 

e)

  Ocenić stan odżywienia drożdży na podstawie zawartości glikogenu w 

komórkach. 

f)

  Umieścić na szkiełku przedmiotowym kroplę zawiesiny drożdży i dodać płynu 

Lugola. 

g)

  Komórki zawierające glikogen wykazują ciemnobrunatne zabarwienie, 

natomiast jasnożółte zabarwienie świadczy o jego braku. 

 
 

Obserwacje, wyniki i wnioski należy przedstawić w formie sprawozdania w zeszycie 

ćwiczeniowym. 

 
 
Literatura: 

 
1.

  Libudzisz Z., Kowal K.: Mikrobiologia techniczna (tom I i II), PŁ, Łódź, 2000. 

2.

  Praca zbiorowa pod redakcją Grabińskiej – Łoniewskiej A.: Ćwiczenia laboratoryjne z 

mikrobiologii ogólnej, Oficyna Wyd. Politechniki Warszawskiej, Warszawa 1999. 

3.

  Duszkiewicz-Reinhard  W.,  Grzybowski  R.,  Sobczak  E.:  Teoria  i  ćwiczenia  z 

mikrobiologii ogólnej i technicznej, Wydawnictwo SGGW, Warszawa 1993.