background image

MIKROBIOLOGIA

KOLOKWIUM nr 2

GRZYBY (pleśnie, drożdże)

DietetykaUP, Mikrobiologia żywności, kolokwium nr 2 – Grzyby (pleśnie, drożdże)

1

background image

Systematyka (skrócona)

Klasa:

Zygomycetes (sprzężniaki)

Rząd:

Mucorales

Rodzaj:

Mucor
Rhizopus

Klasa:

Ascomycetes (workowce)

Rodzaj:

Aspergillus
Penicillium

Klasa:

Deuteromycetes (grzyby niedoskonałe)

Rodzaj:

Geotrichum
Fusarium

Grzyby, podział:

a) pleśnie (grzyby nitkowate)
b) drożdże :

właściwe
nibydrożdże

Drożdże, charakterystyka:

;organizmy jednokomórkowe
;nie tworzą strzępek, ani grzybni
;nie wydzielają szkodliwych metabolitów
;drożdże właściwe należą do workowców, a nibydrożdże (drożdże  

niezarodnikujące – nie rozmnażają się generatywnie) do grzybów 
niedoskonałych

;kształt: okrągły, elipsoidalny, jajowaty, cylindryczny
;rozmiary: 2-7 μm szerokości, 3-10 μm długości
;warunki dla rozwoju: 25-30ºC, pH 4.0-6.0
;w warunkach tlenowych asymilują cukry z wytworzeniem dwutlenku 

DietetykaUP, Mikrobiologia żywności, kolokwium nr 2 – Grzyby (pleśnie, drożdże)

2

background image

węgla i wody

;w warunkach beztlenowych prowadzą fermentację alkoholową 

(fermentują cukry proste, dwucukry, nie wykorzystują skrobi)

;na podstawie fermentacji rafinozy wyróżnia się:

drożdże górnej fermentacji – fermentują w 1/3 rafinozę do 

fruktozy oraz melobiozy, bardziej intensywny proces

drożdże dolnej fermentacji – fermentują rafinozę całkowicie,

mniej intensywny proces

;komórka drożdży zbudowana jest ze ściany komórkowej, błony 

cytoplazmatycznej, cytoplazmy, jądra komórkowego, wakuoli,
substancji zapasowych, mitochondriów, lizosomów, rybosomów,
aparatów Golgiego

;ściana komórkowa wykazuje budowę warstwową; od zewnątrz  

zbudowana jest głównie z mannanu i białka, środkową warstwę 
stanowi glukan, natomiast wewnętrzną wraz z plazmolemmą 
(błoną cytoplazmatyczną) tworzą substancje białkowe. Funkcją 
ściany jest utrzymanie odpowiedniego kształtu komórki. Młode 
komórki drożdży opatrzone są cienką i elastyczną ścianą, która 
przyrasta i sztywnieje wraz z wiekiem komórki

;substancje zapasowe są odkładane w cytoplazmie komórek drożdży 

rozwijających się w podłożach obfitych w substancje odżywcze 
w postaci:

wolutyny - substancji o charakterze białkowym
glikogenu - rezerwowego węglowodanu, jego obecność 

świadczy o dobrym odżywieniu komórek

tłuszczu - substancji zapasowej występującej w postaci 

kropli zawieszonych w cytoplazmie lub 
wakuoli

;drożdże w przemyśle fermentacyjnym to drożdże właściwe, zarodnikujące 

(szlachetne), np. Saccharomyces cerevisiae rasy: Burdung, 

DietetykaUP, Mikrobiologia żywności, kolokwium nr 2 – Grzyby (pleśnie, drożdże)

3

background image

Riesling, Tokaj, Madera
wykorzystywane do produkcji alkoholu, wina, piwa, glicerolu,
drożdzy piekarskich

;na powierzchni produktów płynnych tworzą grube naloty (kożuchy)
;drożdże osmofilne rozwijają się na produktach o niskiej aktywności wody

powodując psucie się suszonych owoców, miodu, soków 
owocowych oraz produktów solonych

;gatunki o właściwościach lipolitycznych powodują plamy na maśle oraz

margarynie

Rozmnażanie drożdży:

;bezpłciowe – wegetatywne

pączkowanie:

występuje

 u drożdży z rodzaju: Saccharomyces (klasa 

Ascomycetes), 

Rhodotorula (klasa Deuteromycetes)

opis: rozpoczyna się uwypukleniem ściany komórkowej na 
powierzchni komórki macierzystej. W komórkach o kształcie 
podłużnym uwypuklenia powstają na końcach, natomiast w 
komórkach kulistych w dowolnym miejscu na powierzchni. W 
komórce macierzystej zachodzi mitotyczny podział jądra na dwa 
potomne. Jedno jądro wraz z częścią cytoplazmy dyfunduje do 
powstałego uwypuklenia, zwanego pączkiem. Pączek stopniowo 
powiększa się i zostaje oddzielony od komórki macierzystej ścianą 
komórkową. W ten sposób wykształca się komórka potomna, która 
może oddzielić się od komórki macierzystej stanowiąc 
samodzielny organizm lub pozostać z nią złączona tworząc tzw. 
pseudogrzybnię – pseudomycelium. Pączkowanie może być 
wielobiegunowe – pączki tworzą się na całej powierzchni komórki 
macierzystej, dwubiegunowe – na przeciwległych biegunach lub 
jednobiegunowe – na jednym końcu komórki. Komórka potomna 
jest genetycznie identyczna z macierzystą, jednak charakteryzuje ją 
mniejszy rozmiar. Pączkowanie drożdży zachodzi przy 
sprzyjających warunkach środowiskowych, dostępności 
składnikówodżywczych, optymalnej temperaturze

podział prosty (rozszczepianie):

opis: przed właściwym rozszczepieniem dochodzi do podziału 
mitotycznego jądra i cytoplazmy. Następnie powstaje poprzeczna 
przegroda oddzielająca nowo powstałą komórkę. Obydwie 
komórki potomne dziedziczą identyczny garnitur chromosomów.

zarodnikowanie:

opis: w niesprzyjających warunkach do rozwoju, drożdże mogą się 
rozmnażać przez zarodnikowanie. U większości drożdży zarodniki 
tworzą się partenogenetycznie – bezpłciowo (bez wcześniejszej 
kopulacji). W komórce zarodnikującej dochodzi do podziału jądra, 

DietetykaUP, Mikrobiologia żywności, kolokwium nr 2 – Grzyby (pleśnie, drożdże)

4

background image

które jest otaczane przez cytoplazmę i własne błony determinujące 
kształt powstających zarodników. Przeciętnie powstaje od 4 do 8 
zarodników w komórce. Kształt zarodników jest gatunkową cechą 
diagnostyczną drożdży.

;płciowe – generatywne

opis: w populacji drożdży występuje zjawisko przemiany pokoleń, 
czyli następowania po sobie pokolenia haploidalnego (o 
pojedynczym garniturze chromosomów) i pokolenia diploidalnego. 
Rozmnażanie płciowe drożdży polega na zlaniu się (kopulacji) 
haploidalnych komórek o przeciwnych znakach koniugacyjnych 
poprzez utworzone wyrostki.W powstałej komórce dochodzi do 
kariogamii czyli zlania jąder komórkowych z wytworzeniem 
zygoty (komórka diploidalna). Następnie zachodzi podział 
(mejoza, mitoza). Każdy zarodnik potomny otaczany jest plazmą i 
błoną. Utworzone w ten sposób haploidalne zarodniki (4-8 szt.) 
zamknięte są we wnętrzu komórki tworząc worek (ascus). Ten 
rodzaj rozmnażania charakterystyczny jest dla drożdży z klasy 
workowców – Ascomycetes, np. Saccharomyces cerevisiae. Zygota 
może również rozmnażać się na drodze wegetatywnej (przez 
podział lub pączkowanie).

Drożdże zarodnikujące ASCOMYCETES

;należą tu drożdże z rodzaju Saccharomyces ( drożdże właściwe )
;na podłożach stałych tworzą miękkie i maziste kolonie o barwie kremowej/białej
;na podłożach płynnych opadają i tworzą osad na dnie naczynia
;rozmnażanie wegetatywne (pączkowanie) i generatywne 

(tworzenie worków z zarodnikami)

;Saccharomyces cerevisiae  stosowane w gorzelnictwie, piekarstwie, browarnictwie

Drożdże niezarodnikujące DEUTEROMYCETES

;słabe zdolności fermentacyjne
;tworzą grube naloty na powierzchni produktów spożywczych
;różowe zabarwienie u Rhodotorula

Pleśnie:

;

Podstawową jednostką budulcową pleśni jest wielokomórkowa lub wielojądrowa strzępka 

(hypha). Zorganizowana struktura wielu strzępek nazywana jest grzybnią (mycelium). 
Grzybnia może być zbudowana z komórek zawierających wiele jąder – wówczas mówimy 
o grzybni jednokomórkowej inaczej cenocentrycznej. Natomiast gdy strzępki grzybni są 
podzielone poprzecznymi przegrodami (septami) – mówimy o grzybni wielokomórkowej. 
Wyróżnia się ponadto, grzybnię powierzchniową (powietrzną) oraz wgłębną (substratową). 
Septy sąsiadujących komórek wykazują porowatość umożliwiając cytoplazmie i organellom 
komórkowym swobodny przepływ. Kształt komórek pleśni jest zazwyczaj rurkowaty. 
Ściana komórkowa zbudowana jest z chityny, glukanu, mannanu, białek i lipidów. Pod nią 
znajduje się błona cytoplazmatyczna otaczająca cytoplazmę, w której zawieszone są 
wszystkie organelle komórkowe charakterystyczne dla komórki eukariotycznej. 
Wyróżniamy więc: jądro komórkowe z jąderkiem, mitochondria, lizosomy, rybosomy, 

DietetykaUP, Mikrobiologia żywności, kolokwium nr 2 – Grzyby (pleśnie, drożdże)

5

background image

aparaty Golgiego, wakuole u dojrzałych komórek oraz retikulum endoplazmatyczne.
;Mają dużą zdolność zarodnikowania
;Wytwarzają ogromne ilości metabolitów
;Powodują straty płodów rolnych
;Wytwarzają mykotoksyny (wtórne metabolity) o silnym działaniu toksycznym (działanie 

rakotwórcze, teratogenne, mutagenne, cytotoksyczne)

;Hodowla pleśni na podłożu zawierającym cukier (brzeczka słodowa), pH 5-6, temp. 18-22 

stopni

;Mała odporność na wyższą temp, giną powyżej 60-70 stopni
;Pleśnie należą głównie do klas: Zygomycetes, Ascomycetes, Deuteromycetes
;Produkcja enzymów proteolitycznych, amylolitycznych, celulolitycznych, kwasów 

organicznych (kw cytrynowy – Aspergillus niger, glukonowy)

;Aspergillus flavus – produkcja sosów sojowych
;Penicillium roqueforti I camemberti – produkcja serów pleśniowych
;Strzępki grzybni wgłębnej przerastają cały produkt
;Rozwojowi pleśni towarzyszy mięknięcie, powstawanie śluzów, upłynnienie produktu
;Rozwijają się w produktach suchych przechowywanych w wilgotnych warunkach
;Pleśnie z klasy Zygomycetes – powodują miękką zgniliznę owoców i warzyw oraz psucie

mięsa przechowywanego w chłodni; rozwijają się często na chlebie
np. Mucor muedo, Rhizopus nigricans

;Pleśnie z klasy Ascomycetes 

Aspergillus – czarne kolonie na chlebie, warzywach, owocach, rosną dobrze

na produktach o niskiej aktywności wody, powodując psucie 
produktów suchych, a także o wysokiej zawartości cukru lub soli

Penicilliium – niebieskie, szarozielone kolonie, powoduje miękką zgniliznę 

owoców cytrusowych, psucie mięsa, jaj, pleśnienie serów, chleba
rozwijają się na ziarnie zbożowym podczas jego magazynowania
produkują toksyczne substancje, np. aflatoksyny, ochratoksyny

;Pleśnie z klasy Deuteromycetes – psucie się przechowywanych, wilgotnych owoców,

szkodniki produktów mleczarskich (rosną na nich w postaci 
białego meszku), psucie chleba, owoców cytrusowych, mięsa
przechowywanego w chłodni
Rodzaj Fusarium – wytwarzanie mykotoksyn: zeralenon oraz
trichoteceny

Rozmnażanie pleśni:

;bezpłciowe – wegetatywne:

zarodnikowanie:

opis: rozmnażanie wegetatywne pleśni zachodzi głównie przez 
tworzenie się zarodników (spor). Ze względu na budowę i sposób 
powstawania spor wyróżnić można: endospory, konidia artrospory. 
Endospory są to zarodniki wytwarzane w zarodniach zwanych 
sporangium np. u Mucor Rhizopus. Konidia są formowane 
egzogenicznie (egzospory) na wierzchołkach strzępek 
powietrznych np. u Aspergillus Penicillium. Natomiast artrospory 
powstają w wyniku fragmentacji strzępki wegetatywnej u pleśni 
Geotrichum candidum

DietetykaUP, Mikrobiologia żywności, kolokwium nr 2 – Grzyby (pleśnie, drożdże)

6

background image

;płciowe – generatywne:

opis: rozmnażanie płciowe polega na kopulacji dwóch komórek o 
haploidalnej liczbie chromosomów z utworzeniem komórki 
diploidalnej. W procesie można wyróżnić trzy etapy: plazmogamię, 
kariogamię oraz mejozę. Plazmogamia polega na połączeniu 
dwóch protoplastów i powstaniu komórki o dwóch jądrach 
komórkowych. Kariogamia polega na połączeniu dwóch 
haploidalnych jąder w jedno jądro diploidalne (zygota). Następnie 
w wyniku podziału redukcyjnego - mejozy dochodzi do powstania 
haploidalnych komórek  potomnych – zarodników. Ze względu na 
ilość zarodników i sposób ich powstawania wyróżniamy: 
askospory (klasa Ascomycetes), zygospory (klasa Zygomycetes).

Klasa Zygomycetes – sprzężniaki

Charakterystyka klasy:

;Grzybnia jednokomórkowa (nie mają sept), wielojądrowa
;Szybki wzrost, luźna, puszysta grzybnia o barwie szaro-białej
;Klasę Zygomycetes reprezentują pleśnie
;Rozmnażanie wegetatywne:

zarodnikowanie (endospory) W wyniku rozwoju komórki 
wegetatywnej strzępki powstaje strzępek owoconośny zwany 
sporangioforem . Na szczycie sporangioforu formuje się zarodnia 
– sporangium. W zarodni powstają zarodniki zwane 
sporangiosporami. Zarodnia łączy się ze strzępką wegetatywną 
kolumellą.

;Rozmnażanie generatywne:

w wyniku zlania dwóch odcinków strzępek grzybni (gametangia) 
powstaje zygospora (forma przetrwalna), która kiełkuje tworząc 
nową grzybnię.

;Rodzaj Rhizopus - Grzybnia pleśni z rodzaju Rhizopus sp. wrasta częściowo 

pod powierzchnię za pomocą chwytników. Chwytniki wyrastają ze 
stolonów (strzępek grzybni rosnącej na powierzchni). Ze strzępek 
rozłogowych (stolonów) wyrastają wiązki sporangioforów, które 
zakończone są zarodniami z zarodnikami wewnętrznymi 
(endogennymi) – sporangiosporami
Występuje często na powierzchni produktów spożywczych np. 
owocach i chlebie. Najważniejsi przedstawiciele to gatunki: 
Rhizopus nigricans, Rhizopus microsporus, Rhizopus stolonifer.
Rhizopus nigricans – 
Często porasta produkty spożywcze np. 
owoce i chleb, początkowo tworzy grzybnię białą, a następnie 
szarą.

DietetykaUP, Mikrobiologia żywności, kolokwium nr 2 – Grzyby (pleśnie, drożdże)

7

background image

;

Rodzaj Mucor: Pleśnie tworzą pojedyncze zarodnie na szczycie 

rozgałęzionych lub nie rozgałęzionych strzępek. Tworzą wysoką 
grzybnię o wełniastej strukturze. Z grzybni ku górze wyrastają 
pojedynczo strzępki zarodnionośne (sporangiofory, część 
szczytowa nazywana jest kolumellą) zakończone zarodnią 
(sporangium) wewnątrz których znajdują się zarodniki 
sporangialne (sporangiospory). Po dojrzaniu zarodników zarodnia 
pęka, uwolnione zarodniki kiełkują I tworzą nowe strzępki.
Występują na owocach, pieczywie oraz ziarnach zbóż. 
Najważniejsi przedstawiciele to gatunki: Mucor mucedo, Mucor 
racemosus, Mucor javanicus, Mucor rouxii

Klasa Ascomycetes – Workowce 

Charakterystyka klasy:

;Wyróżnia się 2 grupy workowców: workowce drożdżoidalne (drożdże 

właściwe) oraz workowce właściwe (należą tu głównie pleśnie – 
Aspergillus i Penicilliium)

;Grzybnia wielokomórkowa (podzielona septami), strzępki silnie rozgałęzione

 na podłożach stałych rozwijają sie koncentrycznie tworząc 

DietetykaUP, Mikrobiologia żywności, kolokwium nr 2 – Grzyby (pleśnie, drożdże)

8

background image

 regularne kolornie z barwną grzybnią i białym brzegiem

;Klasę Ascomycetes reprezentują drożdże i pleśnie
;Rozmnażanie wegetatywne (pleśnie):

z grzybni wyrasta strzępka owoconośna (konidiofor) na której 
powierzchni znajdują się zarodniki zewnętrzne – konidia 
(egzospory).

;Rozmnażanie generatywne (drożdże i pleśnie) wytwarzanie zarodników 

(ascospor) w workach – zarodni (ascus)

;Rozmnażanie wegetatywne (drożdże):

pączkowanie (Saccharomyces sp.)
podział (Schizosaccharomyces sp.)

;Rodzaj Penicillium (Pędzlaki)

 wytwarzają charakterystyczne rozgałęzione konidiofory (bez 
kolumelli). Rozgałęzienia nazywane są metulami. Konidia 
powstają na szczycie butelkowatych komórek konidiotwórczych – 
fialidów. Fialidy wyrastają z metuli. Na metulach powstają fialdy 
(sterigmy), na których wyrastają konidia. U pędzlaków nie 
wyróżnia się kolumelli. 
Pleśnie Penicillium bardzo często występują na produktach 
spożywczych.   Młoda  grzybnia  jest  biała,   a  następnie  przybiera  
kolor   zarodników   charakterystycznych   dla   gatunku   (np.   żółty,  
zielony, niebieski). 
Penicillium roqueforti  i  Penicillium camemberti  – stosowane do  
produkcji   serów   z   porostem   i   przerostem   pleśni,   odpowiednio  
Roquefort i Camembert. 
Penicillium glauber – stosowany do produkcji kwasu cytrynowego. 
Penicillium notatum, Penicillium chrysogenum – do produkcji 
antybiotyków.

;Rodzaj Aspergillus (Kropidlaki)

wytwarzają konidiofory nierozgałęzione, rozszerzone i 
zaokrąglone. Konidiofory zakończone są kolumellą. Na 
powierzchni kolumelli wyrastają fialidy (komórki konidiotwórcze - 
sterigmy). 
Pleśnie Aspergillus są bardziej puszyste niż pleśnie Penicillium

DietetykaUP, Mikrobiologia żywności, kolokwium nr 2 – Grzyby (pleśnie, drożdże)

9

background image

młoda grzybnia jest biała, z czasem przybiera kolor zarodników 
(czarny, zielony, brązowy). 
Aspergillus niger – stosowany do produkcji preparatów enzymów 
amylolitycznych, proteolitycznych i pektolitycznych oraz do 
produkcji kwasu cytrynowego. 
Aspergillus glaucus – powoduje psucie dżemów i konfitur. 
Aspergillus flavus, Aspergillus ochraceus, Aspergillus oryzae, 
Aspergillus parasiticus 
rozwijając się w produktach spożywczych 
wytwarzają mikotoksyny. Wywołują one ostre zatrucia, 
uszkodzenia wątroby, nerek i układu nerwowego. 

Klasa Deuteromycetes – Fungi Imperfecti

Charakterystyka klasy:

;Grzybnia wielokomórkowa (podzielona septami), rozgałęziona
;Klasę Deuteromycetes reprezentują drożdże i pleśnie
;Rozmnażanie tylko wegetatywne 
;Rozmnażanie wegetatywne - z grzybni wyrasta strzępka owoconośna 

(konidiofor), na której powierzchni znajdują się zarodniki 
zewnętrzne – konidia (egzospory) – rodzaje Aspergillus 
Penicillium, lub poprzez fragmentację strzępki wegetatywnej 
(rodzaj Geotrichum). 

;Pleśnie tworzą zarodniki zewnętrzne (egzogenne)
;Rodzaj Geotrichum – Najważniejszym przedstawicielem jest tzw. pleśń 

mleczna Geotrichum candidum (stare nazwy Oospora lactis, 
Endomyces lactis
). Geotrichum candidum metabolizuje kwas 
mlekowy powodując odkwaszanie produktów takich jak kiszonki i 
fermentowane produkty mleczne. Pleśń mleczna syntetyzuje 
enzymy – lipazy do 1% alkoholu i rozkłada białka. Geotrichum sp
rozmnaża się przez artrospory (oidia, oospory) powstające w 
wyniku fragmentacji strzępki wegetatywnej

;Rodzaj Fusarium – grzybnia Fusarium zwykle zabarwiona jest na kolor 

czerwony, różowy. Często występuje na roślinach, głównie 
zbożach oraz pieczywie, wytwarzając mikotoksyny np. Fusarium 
graminearum, Fusarium sporotrichoides, Fusarium proliferatum, 
Fusarium lini, Fusarium avenaceum 
wytwarzają dwa rodzaje 
zarodników: wielokomorowe makrokonidia, małe – mikrokonidia z 
poprzeczną przegrodą.

DietetykaUP, Mikrobiologia żywności, kolokwium nr 2 – Grzyby (pleśnie, drożdże)

10

background image

Patogeny roślin, produkcja silnych toksyn

;Rodzaj Alternaria

wełniasta (sfilcowana) grzybnia o zabarwieniu szarozielonym, 
powodują powstawanie czarnych plam na powierzchni produktów, 
tworzą wielokomorowe, ciemne zarodniki

;Rodzaj Cladosporium

powodują powstawanie czarnych plam na powierzchni produktów, 
ciemnienie ziarna zbożowego,
gruba sfilcowana grzybnia

Metody badania grzybów:

;powiększenia 150-600x
;na preparatach przeżyciowych wykonanych w kropli spłaszczonej
;barwienie (roztworem błękity metylenowego) przeżyciowe u drożdży pozwala 

oznaczyć żywotność I wykryć substancje zapasowe; martwe 
komórki barwią się na niebiesko, a komórki żywe pozostają 
bezbarwne

;obecność glikogenu – płyn Lugola, czerwonobrunatne ziarnistości glikogenu 

na tle żółto zabarwionej protoplazmy

;obecność tłuszczu – roztwór Sudanu, krople tłuszczu przyjmują zabarwienie 

granatowe

DietetykaUP, Mikrobiologia żywności, kolokwium nr 2 – Grzyby (pleśnie, drożdże)

11