PODSTAWY BIOTECHNOLOGII  
 

HODOWLE TKANKOWE (2h)  

 

KULTURA ORGANÓW ROŚLINNYCH 

 

I. KALAFIOR 

 

1.

  Wysterylizuj miejsce swojej pracy za pomocą wacika nasączonego 70% etanolem.  

 
2.

  Odetnij maleńki kawałek z kwiatu kalafiora, mniej więcej wielkości wiśni. Pracuj nad 

czystą szalką Petriego, podziel wycięty fragment rośliny na trzy części. 

 

3.

  Umieść kawałeczki kalafiora (eksplanty =  przeszczepy) w wybielaczu na 10 minut 

delikatnie wstrząsając co jakiś czas zlewką. 
Od  tego  momentu  należy  zwrócić  uwagę  na  szybkie,  sterylne  wykonywanie 
czynności, ponieważ będzie to istotne dla zapobiegnięcia zakażenia hodowli. 

 

4.

  Wypłucz  przeszczepy  w  trzech  kolejnych  zlewkach  zawierających  sterylną  wodę 

destylowaną.  Za  każdym  razem  wyjmując  przeszczepy  pamiętaj  o  wyjałowieniu 
pęsety w płomieniu palnika i ochłodzeniu jej przed zanurzeniem w wodzie.  

 
(Prawidłowy  sposób  sterylizacji  pęsety  lub  innych  narzędzi  w  pracy  w  warunkach 
sterylnych – opalić pęsetę w płomieniu palnika, ostudzić, zanurzyć pęsetę w alkoholu, a 
następnie  przeciągnąć  ją  przez  płomień.  Pomimo  tego,  że  etanol  dezynfekuje  to 
dodatkowo  wysoka  temperatura  spowoduje  zabicie  wszystkich  zanieczyszczeń 
znajdujących  się  na  powierzchni  używanych  instrumentów.  Nigdy  jednak  nie  rozpalaj 
pęsety  czy  skalpela  do  czerwoności  i  pamiętaj  aby  alkoholu  używać  daleko  od 
włączonego palnika). 
 
5.

  Eksplanty można pozostawić w ostatniej zlewce ze sterylną wodą (zakrytą wieczkiem 

szalki Petriego) do czasu ponownego ich użycia. 

 

6.

  Weź  probówkę  z  medium  hodowlanym,  wyciągnij  korek  i  szybko  opal  wylot 

probówki w płomieniu. Wysterylizuj pęsetę w płomieniu palnika, wystudź ją, pobierz 
jedną cząstkę kalafiora z ostatniej zlewki, i szybko umieść ją w probówce z medium 
hodowlanym. Odłóż pęsetę do naczynia z alkoholem etylowym. Ponownie opal wylot 
probówki i zamknij ją korkiem. 

 

7.

  Powtórz całą procedurę zawartą w punkcie 6 dla pozostałych przeszczepów kalafiora, 

umieszczając je w  kolejnych probówkach z medium hodowlanym. 

 

8.

  Probówki  powinny  być  przechowywane  w  ciepłym  i  wilgotnym  miejscu.  Wzrost 

powinien być zauważalny już po 10 dniach.  

 

9.

  Niepowodzenie  hodowli  –  brak  wzrostu  przeszczepów,  wynika  zwykle  ze  złego 

wypłukania tkanki roślinnej w wybielaczu.  

 

 
 

 

II. LIŚĆ TOPOLI 

 

1.

  Wytnij z wewnętrznej długości ogonka liścia topoli fragment około 2-3 cm i rozdziel 

podłużnie za pomocą ostrego noża lub skalpela.  

 
2.

  Połóż  2-3  krążki  bibuły  filtracyjnej,  jako  podstawę  na  szalkach  Petriego  i  zwilż  je 

roztworem kinetyny.  

 

3.

  Umieść ogonki liści topoli, przeciętą stroną na bibule filtracyjnej. 

 

4.

  Zakryj szalkę Petriego wieczkiem i dobrze go zabezpiecz folią. Celem takiego zabiegu 

jest ograniczenie parowania roztworu kinetyny 

 

5.

  Należy  przetrzymywać  dobrze  zakrytą  szalkę  Petriego  w  ciepłym  miejscu. 

Obserwować  hodowle  w  tygodniowych  odstępach  czasowych.  Po  kilku  tygodniach 
powinno  się  zaobserwować  uformowaną  tkankę  kallusową.  Mogą  być  również 
widoczne maleńkie pączki. 

 

6.

  Jeżeli  natomiast  bibuła  jest  zbyt  sucha    należy  ją  nawodnić  za  pomocą  niewielkiej 

ilości, wkraplanej destylowanej wody.  

 

Obserwacje, wyniki i wnioski należy przedstawić w zeszycie w formie sprawozdania z 

ć

wiczeń. 

 

Literatura 

1.

  Bajaj Y.P.S. Biotechnology in Agriculture and Forestry, vol. 1-10 - ed. Springer 

Verlag, Berlin, Heidelberg, New York, London, Paris, Tokyo, 1988.  

2.

  Bednarski W., Reps A. (red.) Biotechnologia żywności. Wydawnictwo Naukowo 

Techniczne, Warszawa, 2003. 

3.

  Bednarski W. (red) Biotechnologia żywności. Wydawnictwo Art., Olsztyn, 1993. 

4.

  Legocki A.B. (red.) Transformowanie i regeneracja roślin. Instytut Chemii 

Bioorganicznej PAN, Poznań, 1990.  

5.

  Libudzisz Z., Kowal K. (red.) Mikrobiologia techniczna. Tom II, Wydawnictwo 

Politechniki Łódzkiej, Łodź, 2000. 

6.

  Malepszy S., Niemirowicz-Szczytt K., Przybecki Z..Biotechnologia w genetyce i 

hodowli roślin. PWN, Warszawa, 1989  

7.

  Malepszy S. (red.) Wprowadzenie do biotechnologii w genetyce i hodowli roślin. 

Wyd. SGGW, Warszawa 1990  

8.

  Pijanowski E., Dłużewski M., Dłużewska A., Jarczyk A. Ogólna technologia 

ż

ywności. Wydawnictwo Naukowo-Techniczne, Warszawa, 2004. 

9.

  Wareing P.F., Phillips I.D.J. Przekład zbiorowy pod redakcją Lidii D. Wasilewskiej-

Dąbrowskiej. Wzrost i różnicowanie się roślin. PWN, Warszawa, 1985. 

10.

 Zenkteler M. Hodowla komórek i tkanek roślinnych. PWN, Warszawa, 1984.