Zespół 3	Laboratorium nowoczesnych metod chromatograficznych	Data: 20.12.2011
Monika Jaros Anna Kojder Kacper Kosior Marcelina Sedlak	Oznaczanie zawartości alkoholi w produktach gorzelniczych

1. CEL I ZAKRES ĆWICZENIA

Analiza próbek alkoholi na obecność szkodliwych produktów ubocznych procesów fermentacyjnych (fuzli).

2. WYKONANIE ĆWICZENIA

- dostępne mamy roztwory wzorcowe o stężeniu każdego ze związków 50, 200 i 1000 μg/ml, próbkę whisky, samogonu

- oddestylowanie w aparacie Soxhleta 50cm³ wina

- nastawienie odpowiedniego programu grzewczego kolumny chromatografu (początkowa temperatura 50^oC przez 1 min, narost 10^o/min do 100^oC, następnie narost 20^o/min do 220^oC i w tej temp. 5 minut)

- wprowadzenie do chromatografu gazowego kolejno po 1 μL - próbki roztworów wzorcowych od największego stężenia, próbki whisky, samogonu oraz próbki oddestylowanego przez nas wina,

- obserwacja tworzenia chromatogramów,

- analiza i obliczenia.

3. WYNIKI POMIARÓW

• Roztwory wzorcowe

NAZWA	NUMER PIKU	CZAS RETENCJI	POWIERZCHNIA PIKU
		[min]	[μV 1/100 min]
n-propanol	A/1	3,41	211 788
2-pentanol	A/2	3,58	118 211
n-butanol	A/3	4,59	72 851
3-metylobutanol-1	A/4	5,00	85 816
n-pentanol	A/6	5,83	92 792
n-heksanol	A/7	6,37	92 390
Kwas octowy	A/8	7,53	99 157
SUMA

Tab. 1 Roztwór wzorcowy 50 μg/ml

NAZWA	NUMER PIKU	CZAS RETENCJI	POWIERZCHNIA PIKU
		[min]	[μV 1/100 min]
n-propanol	A/1	3,46	359 287
2-pentanol	A/2	3,64	303 068
n-butanol	A/3	4,63	362 345
3-metylobutanol-1	A/4	4,95	370 411
n-pentanol	A/5	5,68	419 562
n-heksanol	A/6	6,24	370 889
Kwas octowy	A/7	7,48	357 037
SUMA

Tab. 2 Roztwór wzorcowy 200 μg/ml

NAZWA	NUMER PIKU	CZAS RETENCJI	POWIERZCHNIA PIKU
		[min]	[μV 1/100 min]
n-propanol	A/3	3,49	2 735 589
2-pentanol	A/4	3,67	2 733 147
n-butanol	A/7	4,6	3 057 945
3-metylobutanol-1	A/8	4,94	3 173 388
n-pentanol	A/9	5,64	3 650 514
n-heksanol	A/10	6,18	3 345 478
Kwas octowy	A/13	7,40	3 342 806
SUMA

Tab. 3 Roztwór wzorcowy 1000 μg/ml

• Badane próbki

NAZWA	NUMER PIKU	CZAS RETENCJI	POWIERZCHNIA PIKU	STĘŻENIE ANALITU W PRÓBCE BADANEJ
		[min]	[μV 1/100 min]	[μg/ml]
n-propanol	A/1	3,49	232 051	54,78
2-pentanol	A/2	3,67	582 897	384,66
n-butanol	A/5	4,63	310 703	171,5
3-metylobutanol-1	A/6	5,04	341 533	184,41
n-pentanol	A/7	5,81	3 439 262	1083,78
n-heksanol	A/8	6,33	350 767	189,15
Kwas octowy	A/9	7,52	374 029	209,52
SUMA

Tab. 4 Whisky

NAZWA	NUMER PIKU	CZAS RETENCJI	POWIERZCHNIA PIKU	STĘŻENIE ANALITU W PRÓBCE BADANEJ
		[min]	[μV 1/100 min]	[μg/ml]
n-propanol	A/1	3,58	157 822	37,26
2-pentanol	A/2	3,76	1 100 358	402,60
n-butanol	A/5	4,70	109 352	75,05
3-metylobutanol-1	A/6	5,09	167 116	97,37
n-pentanol	A/7	5,82	7 111 660	1948,13
n-heksanol	A/8	6,33	125 716	68,04
Kwas octowy	A/10	7,51	465 373	260,69
SUMA

Tab. 5 Samogon

NAZWA	NUMER PIKU	CZAS RETENCJI	POWIERZCHNIA PIKU	STĘŻENIE ANALITU W PRÓBCE BADANEJ	STĘŻENIE ANALITU W PRÓBCE RZECZYWISTEJ
		[min]	[μV 1/100 min]	[μg/ml]	[μg/ml]
n-propanol	A/1	3,54	142 421	33,62	53,80
3-metylobutanol-1	A/3	5,00	20 464	11,92	19,08
n-pentanol	A/4	5,78	1 782 824	488,38	781,40
Kwas octowy	A/5	7,50	203 247	113,85	182,16
SUMA

Tab. 6 Wino

Stężenie analitu w próbce badanej obliczamy za pomocą wzoru:

C_a = (P_{a *} C_w) / P_w

C_a - stężenie analitu w badanym roztworze, [μg/ml];

C_w - stężenie danego wzorca, [μg/ml];

P_a - pole powierzchni analitu, [μV/min];

P_w - pole powierzchni danego wzorca, [μV/min];

Stężenie analitu w próbce rzeczywistej liczymy za pomocą wzoru:

C_rz = C_a / (stopień wzbogacenia _* 0,3)

stopień wzbogacenia = V_wina / V_destylatu = 50/24 = 2,08

0,3 - zawartość analitu w destylacie

4. WNIOSKI

Analiza jakościowa metodą chromatografii gazowej polega na identyfikacji pików odpowiadających poszczególnym składnikom próbki.

W tej analizie jesteśmy w stanie określić stężenie tylko 7 ostatnich substancji, których piki nie nakładają się na siebie. W naszym przypadku próbka roztworu wzorcowego 50 μg/ml została wstrzyknięta do chromatografu zbyt wolno dlatego też czasy zmierzone czasy retencji odbiegają od pozostałych roztworów wzorcowych.

Przeprowadzone ćwiczenie miało na celu zidentyfikowanie na chromatografach oznaczane związki, znajdujące się w próbce wina , whisky i samogonu. Po porównaniu parametrów retencji próbek z wzorcami, okazało się, że w próbce whisky znajdują się: n-propanol, 2-pentanol, n-butanol, 3-metylobutanol-1, n-pentanol, n-heksanol, kwas octowy, w próbce samogonu obecne są: -propanol, 2-pentanol, n-butanol, 3-metylobutanol-1, n-pentanol, n-heksanol, kwas octowy, natomiast w próbce wina: n-propanol, 3-metylobutanol-1, n-pentanol, kwas octowy.

Ze względu na mały stopień wzbogacenia wina (w wyniku zbyt długiej destylacji) wykrywalność niektórych związków jest ograniczona.

Następnie obliczamy stężenia analitów w badanych próbkach, które jest wprost proporcjonalne do pola powierzchni piku danej substancji.

---