Krzysztof Bączyński 01.04.2009r.

Grupa 8

Zespół 7

Nr 14

Ćwiczenie nr 17

Oznaczanie zawartości azotu ogólnego metodą Kofranyi

Masa naważki mleka I - 10,015 g

Masa naważki mleka II - 10,086 g

Masa naważki mleka III - 10,058 g

Średnia naważka mleka wynosi - 10,053 g

Miareczkowanie I ilość zużytego 0,1252M NaOH = 15,6 cm³

Miareczkowanie II ilość zużytego 0,1252M NaOH = 15,5 cm³

Miareczkowanie III ilość zużytego 0,1252M NaOH = 15,1 cm³

Średnia ilość zużytego do miareczkowania 0,1252M NaOH = 15,4 cm³

Cm _NaOH = 0,1252 M

M_N = 14 g/mol

V_HCl = 25 cm³

V_NaOH = 15,4 cm³

Oznaczanie zawartości azotu w mleku wykonuje się w aparacie Parnasa-Wagnera.

S - lejek z kranem; C - kolba destylacyjna; A - kolba destylacyjna (wytwornica pary); P - kolba stożkowa; D - chłodnica; B - odprowadzenie próbki do kanału po zakończeniu destylacji amoniaku.

Metoda Kofranyi ma tę zaletę, że oznaczanie białka sprowadza się tylko do ogrzewania badanego produktu z zasada sodową i destylacji amoniaku, bez uprzedniego mineralizowania próbki jak w metodzie Kjeldahla. Oznaczanie zabiera, więc mniej czasu i jest wykonywane w zestawie destylacyjnym Parnasa-Wagnera i nadaje się do masowych analiz w zautomatyzowanej aparaturze.

Oznaczanie białka tą metodą jest oparte na fakcie, że substancja białkowa ogrzewana w środowisku zasadowym w obecności np. ługu sodowego, wydziela określoną ilość azotu w postaci amoniaku, który może być oddestylowany i związany z kwasem, podobnie jak w metodzie Kjeldahla. W określonych warunkach z ilości wydzielonego amoniaku można, więc oznaczyć zawartość białka w badanym produkcie. Amoniak powstaje przeważnie z glutaminy i asparaginy, wskutek hydrolitycznego odszczepienia, pewna część pochodzi też z pełnego rozkładu niektórych aminokwasów, które ulegają rozkładowi podczas gotowania substancji w środowisku zasadowym. Reakcje te przebiegają równolegle, lecz z różną szybkością, zatem ilość wydzielonego amoniaku zależy od czasu ogrzewania.

Obliczenia:

NaOH + HCl NaCl + H₂O 1mol NaOH = 1mol HCl

0,1252 mol - 1000 cm³

X - 15,4 cm³

X = 1,928 *10^-3 mol

0,1 mol - 1000 cm³

1,928 *10^-3 mol - X

X = 19,28 cm³

n = Cm * V_HCl - Cm * V_NaOH

n = 0,1 mol * 0,025 dm³ - 0,1 mol * 0,01928 dm³ = 5,72 *10^-4 mol/dm³

1 mol - 14 g

5,72 *10^-4 mol - X

X = 8,008 *10^-3 g

8,008 *10^-3 g - 10.053 g

X - 100 g

X = 0,0796 g ==> 0,0796 %

Zawartość azotu w mojej próbce wynosi 0,0796%

Obliczoną ilość azotu przeliczyłem następnie na białko, mnożąc przez współczynnik przeliczeniowy 6,38

0,0796 % * 6,38 = 0,5082 %

Współczynnik Kofranyiego: WK = 0,18

0,5082 % - 18 %

X - 100 %

X = 2,823 %

Wnioski:

Oznaczona przeze mnie zawartość białka w mleku wynosi 2,823 %, wynik jest nieco poniżej normy, co mogło być spowodowane niedokładnym wykonaniem ćwiczenia. Zawartość białka w mleku według norm wynosi około 3,2%

---