ALICJA ggsgfgfs, JULIA gfvbbtds, MARIUSZ gfdsaI

KIERUNEK: BIOTECHNOLOGIA

GRUPA: 2B

ZESPÓŁ: 5

ĆWICZENIE NR 3

KINETYKA REAKCJI ENZYMATYCZNYCH

1. CEL ĆWICZENIA: W temperaturze pokojowej i bez katalizatora samorzutny rozkład nadtlenku wodoru zachodzi bardzo wolno. Reakcje tę katalizuje wiele substancji, w tym jony metali i enzymy. W przypadku katalizy za pomocą enzymów kinetyka rozkładu nadtlenku wodoru zależy od stosunku stężenia enzymu i stężenia substratu oraz temperatury. Celem ćwiczenia jest potwierdzenie słuszności równania Briggsa -Haldane'a oraz wyznaczenie wartości liczbowych stałych: V_max i K_M.

2. TABELE WYNIKÓW I OBLICZENIA:

TAB. 1

Czas reakcji, min	Liczba cm^3 0,02 mol/dm^3 roztworu KMnO4	Stężenie roztworu H2O2 [S], mol/dm^3
0	13,2	0,066
10	5,3	0,027
20	2,5	0,013
30	1,5	0,0075
40	0,9	0,0045
50	0,65	0,0033
60	0,6	0,003

Na podstawie wyników miareczkowania obliczamy stężenie molowe [S] nadtlenku wodoru:

5 H₂O₂ + 2 KMnO₄ + 3 H₂SO₄→ 5 H₂O₂ + 2 KMnO₄ + 3 H₂SO₄

1000 cm³ ∙ 5M H₂O₂ - 1000cm³ ∙ 2M KMnO₄

10 cm³ ∙ C_x H₂O₂ - Vcm³ ∙ 0,02M KMnO₄

0 min

10 min

20 min

30 min

40 min

50 min

60 min

Obliczanie parametrów x_i i z_i:

Lp.	xiyi [min]	zi^2[M^2]	yizi [min·M]	xizi [M]	xi^2	(xizi)^2 [M^2]
1	0,0000	0,0000	0,0000	0,0000	0,0000	0,0000
2	0,8940	0,0015	0,3900	0,0349	0,7992	0,0012
3	32,5000	0,0028	1,0600	0,0860	2,6406	0,0074
4	65,2500	0,0035	1,7700	0,1283	4,7306	0,0165
5	107,4400	0,0038	2,4800	0,1665	7,2146	0,0277
6	149,8000	0,0040	3,1500	0,1887	8,9760	0,0356
7	185,4600	0,0040	3,7800	0,1947	9,5543	0,0379
∑	541,3900	0,0196	12,6300	0,7991	33,9153	0,1263

Na podstawie powyższej tabeli, obliczanie parametrów a i b:

Obliczanie wartości stałych występujących w równaniu Briggsa-Haldene'a:

3. WNIOSKI:

Wysycanie enzymu substratem (zbliżanie się do szybkości maksymalnej) oznacza, że maleje liczba wolnych cząsteczek enzymu, gdyż rośnie ilość tych związanych w kompleksie z substratem (ES). Co można było zauważyć zmniejszającym się stężeniem nadtlenku wodoru (przy stałej temperaturze) wraz z upływem czasu.