Oznaczanie stężenia żelaza metodą kolorymetryczną

Do 6 probówek dodać kolejno: 0, 1, 2, 3, 4 i 5 ml roztworu wzorcowego żelaza o stężeniu 5µg/ml. Do ostatniej 2 ml próby badanej. Zawartość wszystkich probówek uzupełnić wodą do 5 ml i dodać 0,5 ml 10% roztworu kwasu sulfosalicylowego oraz 0,5 ml 20% amoniaku. Próby wymieszać i zmierzyć absorbancję przy λ= 420 nm.

Lp.

Wzorzec Fe

(5µg/ml)

H2O

kwas sulfosalicylowy

amoniak

absorbancja

próbki (A420)

1

0 ml

5 ml

0,5 ml

0,5 ml

kontrola

2

1 ml

4 ml

0,5 ml

0,5 ml

3

2 ml

3 ml

0,5 ml

0,5 ml

4

3 ml

2 ml

0,5 ml

0,5 ml

5

4 ml

1 ml

0,5 ml

0,5 ml

6

5 ml

0 ml

0,5 ml

0,5 ml

Próba

badana

4 ml próby badanej

1 ml

0,5 ml

0,5 ml

Część obliczeniowa:

• Obliczyć mnożnik w g/ml i µg/próbę

• Obliczyć współczynniki kalibracji w g/ ml i µg/próbę

• Wykreślić krzywą wzorcową g/ml i w µg/próbę

• Odczytać z krzywych stężenie żelaza w badanej próbie

• Obliczyć stężenie żelaza w badanej próbie ze średnich wartości współczynnika kalibracji

• Porównać wyniki obliczone na podstawie współczynniki kalibracji z wynikami odczytanymi z krzywej wzorcowej.

Vwz

ml

A wzorca

mnożnik

µg/ml

mnożnik

µg/próbę

f

µg/ml

f

µg/próbę

wartości

średnie

Vpb

ml

Apb

Cpb (µg/ml)

z mnożnika

ilość µg/próbę z

mnożnika

Cpb (µg/ml)

wyliczone z f

ilość µg /próbę wyliczone z f

Cpb (µg/ml)

z krzywej

Cpb µg/próbę z krzywej