ĆWICZENIE CH-1(Chromatografia cieczowa)

Oznaczanie fenoli w mieszaninie: (fenol, 2-amino -4,6-dinitrofenol,

p - nitrofenol, m -nitrofenol, o-nitrofenol, 1-naftol)

1. Cel i zakres ćwiczenia

Celem ćwiczenia jest ilościowe oznaczenie składników mieszaniny. Metoda opiera się na fakcie, że wielkość powierzchni piku jest proporcjonalna do stężenia odpowiedniego składnika w mieszaninie.

2. Aparatura i odczynniki:

1. chromatograf cieczowy Hewlett Packard Model 1050 z detektorem absorpcji UV

2. mikrostrzykawka

3. roztwory wzorcowe fenoli w alkoholu metylowym

4. roztwór (zadanie) zawierające fenole o nieznanym składzie

5. kolbki miarowe, pipety, metanol, woda.

3. Wykonanie ćwiczenia

Należało sporządzić roztwór do analizy. W tym celu odmierzono pipetą 0,5 cm³ badanej mieszaniny fenoli i dopełniono w kolbce miarowej o pojemności 10 cm³ do kreski roztworem składającym się z 60% metanolu i 40% wody. Następnie wykonano chromatogram mieszaniny wstrzykując 20 μl roztworu do chromatografu. Z chromatogramu odczytano na podstawie czasu retencji nazwy poszczególnych składników mieszanin, a na podstawie liczby impulsów każdej substancji odczytano z wykresu (lub z równania) stężenia poszczególnych składników mieszaniny.

4. Wyniki pomiarów:

Faza ruchoma: 60% MeOH / 40% H₂O

Przepływ 1cm³/min ( p ∼ 228 bar )

Nr chromatogramu	Czas retencji Tr [min]	Związek	Pole powierzchni piku *10^3	C [μg/cm^3]
2	1,847	fenol	113	2,855
	2,392	o-nitrofenol	266	1,418
	3,342	1-naftol	273	1,457

Obliczam stężenia z równań:

Fenol:

O - nitrofenol:

1-naftol:

5. Analiza wyników:

• Średnia arytmetyczna zbiorowości próbnej:

fenol:

o-nitrofenol:

1-naftol:

• Odchylenie standardowe pojedynczego wyniku

fenol:

m-nitrofenol:

1-naftol:

• Odchylenie standardowe średniej arytmetycznej

fenol:

m-nitrofenol:

1-naftol:

• Przedział ufności:

95% dla k = 2 t_studenta = 4,303

[ ]

fenol:

m-nitrofenol:

1-naftol:

• Stężenia:

fenol:

m-nitrofenol:

1-naftol:

6. Wnioski

Różnice w odczytach różnych próbek tych samych roztworów wynikały prawdopodobnie z niedokładnego odmierzenia mieszaniny fenoli do kolbek, oraz z niedokładnego dopełnienia kolb miarowych do kreski roztworem metanolu. Na końcowy wynik miało wpływ również stosunkowo niskie stężenie poszczególnych składników, oraz czystość kolb użytych do analizy.

Wzory strukturalne:

FENOL

OH

M-NITROFENOL

OH

NO₂

1-NAFTOL

OH