PRZEMYSŁ GORZELINICZY

Ćwiczenie 10

Temat:

Fermentacja alkoholowa. Porównanie efektywności różnych szczepów drożdży

Zagadnienia teoretyczne:

• komórka eukariotyczna i jej elementy składowe

• charakterystyka drożdży Saccharomyces cerevisiae

• przebieg fermentacji alkoholowej (z uwzględnieniem enzymów pierwszego i ostatniego etapu procesu.

Część praktyczna:

Materiały:

• sok winogronowy

• sacharoza

• różne szczepy drożdży

• fosforan amonu

• kolby z rurkami fermentacyjnymi

• parafina

• szkiełka podstawowe i nakrywkowe

• błękit metylenowy

• płyn Lugola

• waga laboratoryjna

Procedura:

Obserwacja mikroskopowa komórek drożdży:

Badanie żywotności drożdży:

• Na szkiełko podstawowe nanieść kroplę zawiesiny drożdży, a następnie dodać kroplę roztworu błękitu metylenowego. Przykryć szkiełkiem nakrywkowym i obserwować pod mikroskopem. Komórki martwe barwią się na niebiesko, natomiast żywe pozostają niezabarwione - widoczne są ich kontury.

Badanie obecności glikogenu w komórkach drożdży:

• Na szkiełko podstawowe nanieść kroplę zawiesiny drożdży, a następnie dodać kroplę płynu Lugola. Przykryć szkiełkiem nakrywkowym i obserwować pod mikroskopem. Komórki zawierające glikogen barwią się na kolor ciemnobrunatny, natomiast pozostałe na jasnożółty.

Założenie hodowli fermentacyjnej:

• Do kolby o pojemności 250 lub 500 cm³ wprowadzić 150 cm³ soku winogronowego, do drugiej 20% roztwór sacharozy (roztwór należy przygotowywać samemu), 5cm³ hodowli drożdży Saccharomyces cerevisiae, lub 0,5g liofilizatu drożdży, oraz 0,2g fosforanu amonu.

• Kolbę zamknąć korkiem z waty z rurką fermentacyjną i zaparafinować. Rurkę wypełnić wodą, następnie sprawdzić szczelność układu.

• Kolbę zważyć i zapisać masę.

• Podpisany układ (grupa, sekcja, data nastawienia układu) odstawić w miejsce wskazane przez prowadzącego na dwa tygodnie (temp. 20-30°C).

LITERATURA ŹRÓDŁOWA:

1. CHMIEL A.: „Biotechnologia - podstawy mikrobiologiczne i biochemiczne” - Wydawnictwo Naukowe PWN, Warszawa, 1998

2. RÓŻALSKI A.: „Ćwiczenia z mikrobiologii ogólnej” - Wydawnictwo Uniwersytetu Łódzkiego, Łódź, 1996

3. SCHLEGEL G. H.: „Mikrobiologia ogólna” - Wydawnictwo Naukowe PWN, Warszawa 2003

4. Źródła internetowe