Krętki- Spirochateaes
Rząd: Spirochaetales
rodzina: Spirochaetaceae
rodzaj: Borrelia,
Treponema-Treponema pallium- krętek blady (syfilis/kiła)
Borrelia burgdorferi- borelioza (sensu lato-> gat. Nieokreślony, sensu stricto- gat. określony)
B. recurrentis- gorączka powrotna u ludzi
B. anserina- ptaki
B. theileri- bydło
Rodzina: Brachyspiraceae
Rodzaj: Brachyspira
Gatunek: B. hyodysentiviae
Rodzina: Leptospiraceae
Rodzaj: Leptospira
2 podstawowe gatunki: L. biflexa, L. interrogans
Podział według genogatunków -> genogatunki (!) :
L interrogans geng. (subsp.) interrogans
L interrogans geng. (subsp.) borgpetersenii
L interrogans geng. (subsp.) weillii
L interrogans geng. (subsp.) inadai
L interrogans geng. (subsp.) kirscheri
Jest to podział według homologii DNA, razem jest ponad 20 genogatunków.
Podział serologiczny-( według różnic w budowie antygenowej nawet tego samego gatunku izolowanego od różnych zwierząt -> serotypy, jest ich ponad 200, są zebrane w serogrupy):
Np. Pomona, Canicola, Icterohaemorrhagiae, Tarassovi, Hardjo
Morf.
-bud spiralna
-środek kom wypełnia cylinder cytoplaz, na zew jest peptydoglikan, potem błona zew, a pomiędzy nimi w środku periplazma, w periplazmie jest wić (włókienko osiowe), na biegunie są dyski przyczepu, włókna przymoc są z jednej strony lub z obu, oplatają cylinder ale nie wychodzą poza obręb błony zewn.
Tabela z porównaniem …
Włókna osiowe-> kilkanaście nanometrów, zbudowane z kory i osłonki zewnętrznej
Zewn.-> błona z białek, lipidów, lipoproteid, LPSu
Białej jest 10 do 100 x mniej niż u E.coli, lipidów więcej
Leptospiry hodowla
Podłoża wzbogac, przy 1wszej izolacji 37 stopni C, przy kolejnych 30, saprofityczne od 15 st.C, płynne, nie tworzy zmętnienia ani osadu, tylko opalizuje
- pH 7,2- 7,6, środ. Alkaliczne lepiej tolerują
- Rosną wolno (1-2 tyg.)
rosną na płynnych lub półpłynnych np.: Korthofa, Stuarta, Fletchera. Podłoża te zaw węglowodany ,fosforany, chlorki, hemoglobinę, albuminę bydlęcą i surowice bydlęcą, tweed-obniża napięcie pow.
Biochemia:
Aktywność słaba
- nie rozkłada cukrów
- wytwarza katalazę, oksydazę, lipazę, hemolizynę
Czynniki wir
1) hemolizyny (sfingomielinaza najbardziej aktywna-> uszkadza naczynia)
2) enzymy cytotoksyczne, bardzo często apoptoza kom
Patogeneza:
Przez nieuszkodzone bł. Śluzowe i otarcia na skórze dostają się do krwiobiegu, atakują kom. wątroby, wzrasta poziom transaminaz (enzymy wątrobowe). Mogą atak nerki. Po 7-10 dniach pojawiają się przeciwciała- mogą neutralizować krążący zarazek, ale zarazki doch do takich miejsc (kanaliki nerkowe, oko, mózg, macica), gdzie dostęp przeciwciał jest utrudniony i tam czekać na lepsze warunki do ataku. Bydło najczęściej jest atakowane przez serowary hardio, pomona - wywołują zmiany chorobowe prowadzące do ronień, zap gruczołu mlekowego, zap nerek. Świnie przez serowary pomona i tarassovi..Psy canicola powoduje dwie postacie choroby uremiczną i żółtaczkową. U koni powodują zapalenie gałki ocznej, atakują tęczówk
Diagnostyka:
Krew w okresie bakteriemii, płyn mózg-rdzeniowy, w przypadku poronień zawartość żołądka płodu, nerki płodu, skrawki łożyska i macicy; mocz, surowicę do badań serologicznych. Materiał musi być jak najszybciej dostarczony do lab., płyny wirujemy. Komórki w moczu natychmiast ulegają dezintegracji, wiec po pobraniu możemy do niego dodać 10% formaliny- wprawdzie to zabije bakterie, ale jeszcze przez parę dni zachowają kształt. Narządy homogenizujemy i sporządzamy 10% zawiesinę. Nerki tniemy kriostatem na cienkie płaty i metodą przeciwciał fluorescencyjnych szukamy przeciwciał.
Badanie bezpośrednie:
Oglądanie w ciemnym polu
Hodowla w war. Tlen (1wsze pasaże w 37 st. C) 37-30 st. C , 3-7 tyg, w każdym tyg pobier kroplę i spraw w ciem polu na obecność bakterii
Badania serologiczne:
Odczyn aglutynacji mikroskopowej (chyba) -> MAT. Przygotowujemy kolejne rozcieńczenia surowicy. Kroplę każdego dajemy na szkiełko + kropla hodowli, 2 godziny inkubujemy w komorze wilgotnej i oglądamy każde rozcieńczenie pod mikroskopem. Bakterie zlepiają się jednym biegunem tworząc pomarańczową kulę,
Miano 50% aglutynowanych-> miano graniczne
200 i powyżej-> dodatnie
Brachyspira:
Barwi się barwieniem prostym
Czynniki wir
1) hemolizyny kodowane przez 3 geny
2) LPS
3) białka uszkadzające komórkę
Atak pp świń, gł okrężnicę bakterie zasiedlają krypty śluzówki, penetrują do enterocytów oraz kom kubkowych, mogą atakować śluzówkę jelita grubego-> silna biegunka z domieszka krwi, śluzu, włóknika. Fusobacterium, Bacteroides, Campylobacter _> ich współpraca jest niezbędna dla Brachyspiry (zasiedlają normalnie pp zdrowych zwierząt)
Diagnoza:
Kał, wymazy z odbytu, treść okrężnicy; materiał zawieszamy w płynie fizjol. W stosunku 1:10 i wirujemy, supernatant przesączamy (najpierw przez pory 1 mikrometr a potem coraz mniejsze i kończymy na 0,45 mikrom.).
W bezpośrednim badaniu możemy rozmazy zabarwic fuksyną fenolową lub błękitem wiktorii. Jeżeli są barwione- to oglądamy w mikroskopie optycznym, jeżeli nie, to w ciemnym polu.
Hodowla:
Na agarze tryptozowo- sojowym z wyciągiem sercowo- mózgowym z krwią lub surowicą bydlęcą, L- cysteiną (powoduje spadek potencjału oksydoredukcyjnego), antybiotyki np. wankomycyna do hamowania wzrostu innych bakterii
Inkubacja w beztlenowych warunkach w 90% wodoru i 10 % CO2, w temp. 42 st. C, do tygodnia czasu. Rosną w postaci śluzowatego nalotu z silną strefą hemolizy beta.
Serologia
Przeciwciała wykrywamy testem MAT, PCR
Mycoplasma |
Ureaplasma |
Kolonie 500-600 mikrometrów
Brak hydrolizy mocznika
Zasadowe pH 7,5-8
Redukują błękit metylenowy w podłożu
Fermentują argininę
Siarczan manganu w pożywce- kolonie się nie barwią
Wzrost powyżej 7 dni (do 3 tygodni)
Podłoże Edwarda (?)
|
< 100 mikrometrów
Hydrolizuje go i jest potrzebny do wzrostu
Kwaśne 6,5
-
-
Siarczan manganu w pożywce- kolonie wybarwiają się na brunatno (mangan odkłada się na powierzchni
Wzrost poniżej 7 dni
Podłoże Hayflicka (Edwards + mocznik + czerwień fenolowa) |
cecha |
Leptosp |
Brachy |
Borrelia |
il spirali |
Liczne |
6-14, ampl 1 mikr |
4-8 ampl 3 mikr |
Dł-um |
kilka-20 |
Kilka-20 |
kilka-20 |
Grubość um |
0,1-0,2 |
0,5 |
0,5 |
wł. Osiowe |
2. |
6 do 10 |
15 do 20 |
Dyski przycz. |
3,5 |
1 |
2 |
bieguny |
haczyk zakrz |
Ostro zak |
zwężone |
Hodowla |
tlenowe |
beztlenowe |
mikroaerofilne |
ciem pol |
+ |
+ |
+ |
Barw Giemzy |
- |
średnio |
+ |
Wekor |
- |
- |
kleszcze |
Fuksyna karbolowa |
- |
+ |
+ |
ruch |
Ruch postępowy, obrotowy, wokół osi i falujący |
||