pytania na inż. genetyczna, Biotechnologia PWR, Semestr 7, Inżynieria Genetyczna - Wykład, Inżynieria Genetyczna - Notatki


TWÓJ BIOTECHNOLOG https://www.facebook.com/twoj.biotechnolog

1.Ktore z podanych niżej związków mogą być wykorzystane do znakowania fragmentu DNA przy wykorzystaniu kinazy polinukleotydowej: 
A) dATP, znakowany 32P w pozycji γ (gama) 
B) ATP , znakowany w pozycji α (alfa) 
C) dGTP , znakowany w pozycji α lub γ (alfa lub gama- obojętnie) 
D) [γ(gama)-32P]-ATP 
E) [α(alfa)-32P]-dATP 

2. Pożywka M9 : 
a)Zawiera składniki tylko nieorganiczne 
b)Zawiera składniki tylko organiczne 
c)Ściśle zdefiniowana 
d)Po dodaniu glukozy otrzymamy pożywkę LB 
e)Zawiera ampicylinę 

3. W celu otrzymania preparatu DNA plazmidowego z kom. bakteryjnej dodano NaOH w takiej ilości, iż wartość pH wynosila ok. 12,35. Które z opisow sa prawdziwe: 
A) w tych warunkach caly ds. DNA jaki znajdował się w komórce uległ dysocjacji do pojedynczej nici 
B)w tych warunkach dysocjacji do pojedynczych nici uległy fragmenty DNA które sa w formie superzwiniętej 
C) w tych warunkach wszystkie koliste czasteczki uległy dysocjacji 
D) po zakwaszeniu do pH ok. 7,0 tak przygotowany denaturowany DNA plazmidowy może być latwo oddzielony od DNA 
E) po zakwaszeniu do pH ok. 7,0 tak przygotowany zdenaturowany DNA chromosomu bakteryjnego może być latwo oddzielany od plazmidowego 

4.Przy pomocy nukleazy S1 mozna znakowac koniec 5' trankskryptu. Przy pomocy tego samego enzymu mozna zmapowac tez 3' koniec po wprowadzeniu odpowiednmich zmian do naszych działan. Ktore z ponizszych czynnosci ma miejsce TYLKO podczas mapowania 3' konca : 
A) znakowanie DNA przy wykorzystaniu gama -32P -ATP 
B) znakowanie DNA przy wykorzystaniu alfa -32P -dATP 
C) denaturacja DNA i elektroforeza 
D) reakcja przy udziale rekombinowanego enzymu uzywanego przez retrowirusy do syntezy 
DNA na bazie RNA 
E) reakcja przy udziale polimerazy DNA I 

5. Pewien student zamierzał otrzymac bibliotekę z mutacjami kasetowymi w obrebie centrum aktywnego enzymu XYZ. No i madrala zrobił jakoś tak: 
gen XYZ dał do wektora pUC18, wstawił go tak, że nie zaburzał ramki odczytu LacZ', czyli gdy dało sie do odpowiedniej komórki (takiej, w której daje sie prowadzić selekcję biało-niebieską) powstaje aktywna B-galaktozydaza. wyciął kasetę, którą chciał zmienić, oddzielił przez elektroforezę od reszty wektora, wziął wektor bez kasety i kinazą polinukleotydową usunął reszty fosforanowe z 5' końców - żeby nie doszło do samoligacji wektora, po czym dodał syntetyczne oligonukleotydy. Mniej wiecej to brzmialo cos jak to chociaz oczywiście nic pewnego 0x01 graphic
 . Jak dla mnie to ten student powinien dostac nobla i 4.0 u Andrzeja z marszu ! 

A) rekombinanty beda niebieskie 
B) rekombinanty nie beda niebieskie 
C) te co sie same zligowaly (nierembionanty) nie beda niebieskie 
D) te co sie same zligowaly stanowia jedynie 1,2 % w porownaniu do eksperymentu 
kontrolnego gdzie nie było defosforylacji 
E) w komorkach nie bedzie aktywnosci enzymu XYZ 

6.Mamy gen w pojedynczej kopii. Chcac go wykryc uzyto sondy o odpowiednio do niego (tego genu) komplementarnej sekwencji. Byla to metoda fluorescecyjna FISH a eksperyment przeprowadzono na chromosomach w trakcie profazy. Co zaobserwowano: 

A) 2 sygnaly fluorescencyjne blisko siebie 
B) 2 sygnaly fluorescencyjne 
C) 2 pary sygnalow fluor. 
D) 4 sygnaly blisko siebie 
E) 4 pary sygnałów 

7.Cztery klony BAC fragmentow ludzkiego genomowego DNA (A, B, C, D) zbadano na obecnosc sekwencji STS (5 sekwencji oznaczonych 1-5). Ich obecnosc w poszczegolnych genach przedstawia tabelka poniżej, przy czym + oznacza obecnosc STS w danym klonie: 

Powyzsze wyniki wskazuja na to iz klony te skladaja sie na nastepujaca sekwencje: 

A) A-B-C-D 
B) D-C-B-A 
C) A-B-D-E; klon C nie "pasuje" do pozostalych 
D) D-A-C-B 
E) D-A-B-C 


8. Po przeprowadzeniu sekwencjonowania DNA wedlug metody dideoksy Sangera (korzysta sie z analogow 2',3'-dideoksy trifosforanow nukleotydów) otrzymano przedstawiony nizej autoradiogram : 

Która sekwencja będzie odpowiadała sekwencji nici matrycowej (czyli badanej): 
A) 3'TACGT5' 
B) 5'TGCAT3' 
C) 3'ACGTT5' 
D) 5'ATGCA3'E) 5'TTGCA3' 
F) zadna z powyzszych sekwecnji nie jest prawidlowa 

9. Kazdy rodzic ma dwa allele genu X. Moze on miec postac dziką - dominujaca(A) -zdrową albo zmutowaną - recesywną(a)- wywołuje chorobe ( anemie sierpowatą). W przypadku zmutowanej wersji gen nie jest przecinany przez enzym restrykcyjny np. EcoRI bo nie ma miejsca rozpoznawanego przez ten enzym i otrzymujemy jeden tylko fragment o dł. 1,3 kb. Jesli tniemy gen dziki to otrzymujemy 2 fragmenty : 1,1kb i 0,2 kb. Jakie fragmenty bedziemy widziec u rodzicow ktorych PRZYSZLE DZIECKO MA 25% PRAWDOPODOBIENSTWO NA ZACHOROWANIE NA TĄ CHOROBE 

Prawidlowe: czyli dziecko musi byc homozygota recesywna 'aa'. zeby tak sie stalo to rodzice sa heterozygotami A/a. 

A) mozna zaobserwowac obecnosc fragmentow 1.1 kb i 0.2 kb u obojga rodzicow 
B) mozna zaobserwowac obecnosc fragmentow 1.3 kb i 0.2 kb u obojga rodzicow 
C) mozna zaobserwowac obecnosc fragmentow 1.3kb u jednego z rodzicow i 1,1kb oraz 0.2 
kb u drugiego z rodzicow 
D) ...tez zle nie chce mi sie pisac (cos w stylu C) 
E) u obojga rodzicow wszystkie trzy fragmenty :1,3kb .. 1,1kb... 0.2kb 

10. Plazmid X ma gen markerowy AmpR czyli na ampicyline opornosc. Bierzemy jakiś inny plazmid co ma geny oporności na ampicylinę, chloramfenikol, erytromycynę, itp, itd. Tniemy go i kolekcję otrzymanych fragmentów wklonowujemy w nasz plazmid X, ten przenosimy do komórek i szukamy rekombinantów które dostały gen ooprności na chloramfenikol - jakich podłóż możemy użyć: 

A) z ampicyliną 
B) z chloramfenikolem i ampicyliną 
C) z chloramcenikolem 
d) erytromycyna i ampicylina 
E) erytro i chloramfenikol 

11. Wyobraź sobie ze dysponujesz klonem (tzn. sekwencją) jakiegos genu, który, mozesz przypuszczac na podstawie analiz genetycznych, jest zlokalizowany w odleglosci nie wiekszej niz 200kb od genu odpowiedzialnego za powstawanie jakies choroby. 
Sposrod podanych ponizej czynności prosze wybrac TYLKO NIEKTORE skladajace sie w odpowiedniej sekwencji na eksperyment (technike) ktory pozwoli na odczytanie sekwencji w tym obszarze 200kb. 

A) czesciowe trawienie DNA enzymem BamHI w celu otrzymania zachodzących na siebie 
(względem sekwencji) fragmentow o dl ok. 20 kb 
B) całkowite (wyczerpujące) trawienie DNA enzymem EcoRI 
C) izolacja ludzkiego genomowego DNA 
D) izolacja genomowego DNA z E.coli 
E) Northern-blotting sondą otrzymana przy wykorzystaniu genu A 
F) powtarzanie czynności opisanych w poprzednich dwóch etapach do momentu otrzymania 
odpowiedniej ilości klonow 
G) otrzymanie biblioteki w fagu lambda 
H) przeszukiwanie biblioteki przy pomocy sondy przygotowanej w oparciu o sekwencje genu 
A w etapie pierwszym, potem izolacja klonu hybrydowanego z sonda 
I) subklonowanie fragmentu z konca nowoizolowanego klonu w celu otrzymania nowej 
sondy do ponownego przeszukiwania biblioteki i identyfikacji nowego klonu 
hybrydyzowanego z sond 

Proszę wybrać, który z poniższych zapisów, nastepujacych po sobie czynnosci skladających sie na scharakteryzowany powyżej eksperyment, jest prawidłowy : 

A) A-B-C-D-E-G 
B) C-A-G-H-I-F 
C) C-H-I-F-A 
D) A-C-G-H-I-F 
E) żadna 

12. Podane nizej enzymy restrykcyjne trawia DNA w specyficznych miejscach (jak ponizej) : 

BamHI NheI Xbal EcoRI 
5'-GGATCC-3' 5'-GCTAGC-3' 5'-TCTAGA-3' 5'-GAATTC-3' 
3'-CCTAGG-5' 3'-CGATCG-5' 3'-AGATCT-5' 3'-CTTAAG-3' 

)ϑWszystkie one hydrolizuja wiazanie fosfodiestrowe pomiedzy pierwszym a drugim nukleotydem (liczac od 5' konca każdej linii - czyli lepkie konce robią),przy czym produkty ....(tu niestety brak tresci ale to raczej malo istotne 
Sposrod podanych ponizej zdan prosze wybrac prawdziwe: 

A) EcoRI i BamHI to izoschizmoery 
B) fragmenty poddane restrykcji przez NheI i Xbal mogą byc smialo ze soba zligowane 
C)....np.NheI i Xbal są izoschizomerami (jakos w tym stylu było) 
)ϑD)....np fragmenty poddane restrykcji przez EcoRi i BamHI mogą byc smialo ze soba zlgowane (to samo co C 
E) NheI i Xbal są kaudomerami 

*13(zadanie miało różne warości). Mamy opisany eksperyment restrykcji jakiegos faga. Najpierw 16ul / lub 15 ul DNA w probowce. Do tego dodajemy kolejno: 
1. 2ul buforu 
2. 2 ul roztworu z enzymem 
Pytanie: Skoro optymalne stężenie NaCl dla enzymu to 50mM / lub 100 mM to jakie bylo wyjsciowe stezenie tej soli dodawanym buforze (po obliczeniach rozcieńczenie buforu wyszlo R=10) 

A) 200mM 
B) 10mM 
C) 50mM 
D) 500mM 
E) trudno powiedziec bo za malo informacji 

14. . W trakcie elektroforezy w żelu agarozowym, w nieobecności bromku etydyny: 

A) czasteczka dsDNA porusza sie w kierunku elektrody ujemnej 
B) czasteczkki dsDNA sa obdarzone ladunkiem dodatnim 
C) liniowe czasteczki dsDNA poruszaja sie tym szybciej im sa krotsze 
D) superzwiniete czasteczki dsDNA poruszaja sie wolniej niz odpowiednie im 
zlinearyzowaneE) fragmenty dsDNA o dlugosci 1006bp i 1007bp moga byc rozdzielone w celu 
preparatywnym 

15. Dwie probki kompetentnych komorek E.coli poddano transformacji wektorem zawierajacym gen AmpR (opornosc na ampicyline). I potem mamy dwie różne sytuacje: 
1. dodano do nich niewielka ilosc pozywki plynnej i po ok. 2 min umieszczono na pozywce zawierajaca ampicyline. 
2. dodano ta sama ilosci pozywki plynnej i po 30 min inkubacji umieszczono na pozywce z ampicylina. 
Jakie zanotowano obserwacje: 

A) szalka pierwsza 300 kolonii i szalka druga 300 kolonii 
B) szalka pierwsza 300 kolonii i szalka druga 30 kolonii 
C) szalka pierwsza 30 kolonii i szalka druga 400 kolonii 
D) szalka pierwsza 0 kolonii i szalka druga 300 kolonii 
E) szalka pierwsza 300 kolonii i szalka druga 0 kolonii 

16. Fragmenty (ramiona - w sumie 30kb) WEKTORA ZASTĘPCZEGO poddawano ligacji z fragmentami DNA majacymi prawidlowe konce lepkie odpowiednie do ramion wektora. Jaki maksymalny rozmiar mogl mieć wsczepiany w ten wektor odcinek: 

A)8kb 
B)40kb 
C)100kb 
D)20kb 
E)22kb 

17. Doświadczenie ktorego celem jest nokaut genu mysiego XYZ. Komórki macierzyste, do których wprowadzany jest gen rekombinowany: 

A) zawierają 1 allel zmutowany i 1 typ dzikiego genu XYZ 
B) zawierają oba allele typu dzikiego 
C) poddawane są selekcji, ktorej celem jest wybrac te w ktorych zaszla rekombinacja 
niehomologiczna 
D) sa oporne na dzialanie neomycyny 
E) zawieraja gen Tk 

18. Kulisty DNA poddano linearyzacji enzymem dajacym konce lepkie. Nastepnie potraktowano go nukleza S1 i po zahamowaniu aktywnosci tejze nukleazy uzyto terminalej transferazy przy obecnosci dNTP. Najprawdopodobniej końce powstalego fragmentu DNA beda mialy charakter taki jak te pokazane w punkcie : 

A) 5'AGCAATGGC3' 
3'AGCTTCGT5' 

B) 5'AGCAATGG3' 
3'ACC5' 

C) 5'AGCAATGG3' 
3'TCGTTACC5' 

D) 5'ACTAGCAA3' 
3'TCGTTACC5' 

E)zadne z powyzszych - nie wiadomo jaka poczatkowa sekwencja byla 

19. Pewien haploidalny szczep grzybaa Neurospora jest transgeniczny pod wzgledem genu lucyferazy. Gen ten nie wystepuje w szczepie dzikim. Szczep transgeniczny zostal skrzyzowany ze szczepem dzikim a powstale askospory poddano analizie PCR wykorzystujac startery specyficzne dla genu lucyferazy. Zakladajac, ze PCR przeprowadzono w sposob optymalny mozna przypuszczac ze udzial askospor dla ktorych zidentyfikowano specyficzny produkt wynosil : 

A) 0% 
B) 25% 
C) 50% 
D) 75% 
E)100% 

20. Rysunek wektora( Shuttle Vector) - co jest charakterystyczne tylko dla drożczy 
a)ori 
b)ampR 
c)ura3 
d)ars 
e)polilinker 
21. Jaka może być maksymalna długość insrtu , ktory można wklonować do kosmidu ? 
a) 8kb 
b)40kb 
c)150kb 
d)23kb 
e)20kb 
22. Jakiś rysunek 6-ciu prążków po trawieniu EcoRV i elektroforezie w żelu agarozowym w obecności bromku etydyny : 
a) krótszy fragmenty wędrują wolniej 
b) dłuższe fragmenty wędrują szybciej 
c) fragment DNA miał w smie 58,502 kb 
d) bromek etydyny przyłącza się kowalencyjnie do cząsteczek DNA / on interkaluje 
e) jest 5 miejsc restrykcyjnych , które mogą być trawione przez EcoRV 
23.Jaka technika może być użyta do inaktywacji genu bez uszkodzenia jego sekwencji ? 
a) nokaut genu / uszkadza 
b) nokaut genu z systemem rekombinacji Cre-Lox /uszkadza 
c)interferencja RNa 
d)nadeksperesja produktu allelu dominującego negatywnego 
e)nadekspresja produktu allelu recesywnego negatywnego 

24.Co jest wykorzystywane w kluczowym etapie w technice RACE? 
a) oligo (T)- nie ( poprawne : oligo dT) 
b)odwrotna transkryptaza 
c) DTP 
d) fragment Klenowa polimerazy DNA I 
e) sekwencja komplementarna do odcinka startera 

25.Cechy charakterystyczne dla ligazy 
a) syntezuje DNA na matrycy RNA 
b) potrzebuje ATP lub NAD+ 
c) z taką sama efektywnością łączy końce lepkie jak i tępe 
d)tworzy wiązanie pomiędzy gr 5'OH a 3'fosforanową 
e) żadna z powyższych 

26.Jakie czynniki są w mieszaninie reakcyjnej w metodzie dideoksy Sangera? 
a) d NTP 
b)2'3' - dideoksyanologi wszystkich 4 nukleotydów 
c) 2'3' - dideoksyanologi jednogo z 4 nukleotydów 
d) tri fosforany nukleozydów 
e) 2'5' dideoksy anologi 

27.Enzymy restrykcyjne CIaI rozpoznaje sekwencje AT-CGAT i trawi wiązanie fosfodiestrowe pomiędzy resztami T i C . Enzymy restrykcyjne TaqI rozpoznaje sekwencje T-CGA : 
a) fragmenty powstałe po trawieniu enzymami są w części komplementarne 
b) fragmenty powstałe po trawieniu enzymami są w całości komplementarnec) CIaI i TaqI są izoschizomerami 
d) dowolne fragmenty powstałe po trawieniu CIaI i TaqI mogą być ligowane i następnie trawione CIaI 
e)dowolne fragmenty powstałe po trawieniu CIaI i TaqI mogą być ligowane i następnie trawione przez TaqI 

28.Wektor plazmidowy poddano linearyzacji enzymem EcoRI został uzyty do ligacji z DNA powstałym w wyniku hybrydyzacji dwóch syntetycznych oligonukleotydów. Syntatyczny ds.DNA został tak zaprojektowany iż posiada końce identyczne z końcami wektora(EcoRI).Mieszaninę poligacyjną poddano transformacji komórki bakteryjne i wylano je na podłoże zawierające odpowiedni dla wekrota antybiotyk. Które z podanych poniżej twierdzeń są nieprawdziwe? 
a)pośród powstałych klonów można było zaobserwować klony zawierajace wektor 
pozbawiony insertu 
b)pośród powstałych klonów można było zaobserwować klony zawierajace rekombinowany wektor z wbudowanym jednym fragmentem 
c)pośród powstałych klonów można było zaobserwowac wektor zawierajacy wiecej niż jeden fragment 
d)ligacji jednego fragmentu i czasteczki wektora towarzyszy powstanie 4ch wiazań fosfodiestrowych 
e)ligacji jednego fragmentu i czasteczki wektora towarzyszy powstanie 2ch wiazań fosfodiestrowych 

29.Przy pomocy techniki primer extension mozna mapowac 5' koniec transkryptu.W tym celu mozna tez posłużyc sie techniką wykorzystującą nukleazę SI.Która z podanych poniżej informacji jest nieprawdziwa dla pierwszej z wymienionej technik ? 
a) denaturacja DNA i elektroforeza 
b) hybrydyzacja 
c) wariant tej techniki może być uzyty do mapowania 3' końca 
d) użycie rekombinowanego enzymu odwrotnej transkryptazy 

30.Do czego używa się techniki PCR? 
a)do RFLP 
b)do konstruowania sondy w celu poszukiwania biblioteki cDNA 
c)do powielania fragmentu RNA , gdy znamy sekwencje okalające 
d)do powielania sekwencji genu( np. prokariotycznego ) 
e) wszystkie odpowiedzi są prawdziwe 

31.Co jest nieprawdziwe dla faga lambda? 
a) do wektora jego pochodnej można wklonować inserty o długości 53 kb 
b) po jego replikacji w komórce gospodarza powoduje lizę komóreki 
c)pochodne faga lambda mogą służyć do knowania cDNA i DNA genomowego 
d) większość pochodnych faga lambda zawiera geny konieczne dla integracji i wycięcia DNA faga lambda z chromosomu komórki bakteryjnej 
e) pochodne faga lamda mają inserty , które umożliwiają mu wbudowanie się do komórki 
32.Rysunek wektora pGEM i wskazać cechy prawdziwe : 
a) jest kosmidem 
b) ma gen markerowy do ekspresji genu w organizmie drożdżowym 
c) może być użyty do otrzymywania ssDNAd) może być użyty do badania aktywności promotorów eukariotycznych w komórkach prokariotycznych 
e) do otrzymania dsRNA 
33. Po PCR otrzymuje się fragment zawierający AAA na 3'końcu. Jak należy skonstruować prawidłowy wektor dla tego fragmentu ? 
a) terminalna transferaza 
b) d TTP 
c)polimeraza Taq 
d)polimeraza Vent 
e) dideoksy TTP 

34. Czym możemy znakować 5' koniec produktu otrzymanego po PCR? 
a) [α32P ]d ATP 
b) [γ32P ] ATP 
c)d GTP znakowany w pozycji α 
d) [γ32P ]d ATP 
e) a) [α32P ] ATP 

35. Po trawieniu nukleazą S1 i enzymem BaI31 otrzymujemy jakiś fragment. Wskazać jaka musi być sekwencja - sekwencja jako taka nie jest istotna, trzeba wiedzieć,tylko że fragment wyjściowy przed trawieniem nukleazą S1 posiada lepkie końce, natomiast po trawieniu nukleazą S1 otrzymamu produkt z końcami tępymi. Natomiast użycie enzymu BaI31 nie zmieni charakteru tego produktu , bo enzym ten zdolny jest do odtrawienia koncowych nukleotydów na obu końcach w dwuniciowym DNA 
Odp: fragment z końcami tępymi 

36.Które z poniższych enzymów będą dawały produkty , które można poddawać bez dodatkowych zabiegów radioaktywnemu znakowaniu przy pomocy α32P-dATP o fragmencie Klenowa? W nawiasach podano sekwencje ,dla uproszczenia tylko jednej nici , rozpoznawane przez enzymy , gwiazdka oznacza położenia trawionego miejsca 
a) EcoRi ( GA*ATTC) 
b) SmaI ( CCC*GGG)/ tępe 
c) PstI ( CTGCA*G)/nawias 3' 
d)HpaII ( C*CGG) 
e)Bg1II( A*GATCT) 

37.Wektor ( ampR, ori, CAT): 
a) jest kosmidem 
b) można prowadzic transkrypcje in vitro za pomocą enzymów fagowych 
c) ma gen markerowy ( amp R) 
d) można pozyskiwać jego większe ilośći hodujące w bakterii ( ori) 
e) pozwala na badanie aktywności promotorów prokariotycznych w komórkach eukariot38. Charaktyrystyka wektora pBluescript II KS ( +/-) 
a) może być użyty do transkrypcji in vitro przy użyciu polimeraz fagowych 
b) zawiera gen markerowy 
c) jest fagemidemd)może być używany do wklonowania inertów ss DNA 
e) może być użyty do badania promotorów prokariotycznych w komórkach eukariotycznych 

39. Jednym z etapów doświadczenia , którego celem jest nokaut genu jest selekcja komórek macierzystych , które są : 
a) odporne na G418 i odporne na gancyklowir 
b) odporne na G418 i wrażliwe na gancyklowir 
c) wrażliwe na G418 i odporne na gancyklowir 
d) homozygotyczne względem genu poddawanego nokautowi 
e) heterozygotyczne względem genu poddawanego nokautowi 

40. Załóżmy , ze w plazmidzie , który jest kolistą cząsteczką , na którą składa się 3200 pz występują sekwencja rozpoznawane prze EcoRI położone w odległości : 400, 700, 1400 i 2600 pz od arbitralne położonego punktu zerowego . Po całkowitym trawieniu wymienionym enzymem - powstaną produkty :
a) 400, 800, 1000 ( x2) 
b)400,1200,1600 
c) 300,700,2200 
d)700,400,1400,2600 
e) 300,700,1000,1200 

41. Szczególnie użytecznymi cechami wektora używanego do klonowania są : 
a) duża ilość kopii i wystepowanie w nim genu markerowego ( nadającego ceche odporności na działanie antybiotyku)b) wirulentność i lizygeniczność 
c) zdolność do integracji w chromosomie komórki gospodarza w następnie indukcja cyklu litycznego 
d) zdolność do autonomicznej replikacji i posiadanie sekwencji wielokrotnego klonowaniae) posiadanie promotora T7 i genu markerowego ( pozwalającego na otrzymanie pojedynczej nici DNA wklonowanego fragmentu) 

42.Wektor będący pochodną faga lambda poddano trawieniu enzymem EcoRI a następnie powstałe produkty rozdzielono elektroforetycznie. Otrzymane w ten sposób ramiona wektora poddano ligacji z fragmentami DNA o końcach EcoRI i długości ok. 20 kb. Po ligacji upakowno fagi in vitro i infekowano nimi bakterie. Analizie poddano DNA wszystkich powstałych łycinek i zidentyfikowano takie , które zawierały : 
a) DNA wektory , które uległy replikacji 
b) DNA rekombinowanego wektora zawierającego fragmenty DNA o długośći ok. 20 kbc)DNA rekombinowanego wektora zawierającego fragmenty o długośći 40 kb 
d) DNA całego genomu faga ʎ 
e) nie zaobserwowano żadnych łysinek , gdyż fragmenty były za długie 

43. W analizie Southern fragment sekwencji genu aktyny z drożdży został użyty jako sonda do analizy fragmentów powstałych w wyniku trawienia EcoRI DNA genomowego z D.stramonium. NA auroradiogramie zaobserwowano jako jedno radioaktywne pasmo odpowiadające fragmentowi Dna o długości 4kb. Oznacza to ze 
a) gen aktyny D. stramonium ma dł 4kb 
b) gen aktyny D. stramonium jest takiej samej wielkości jak gen drożdży 
c) gen aktyny D. stramonium jest najprawdopodobniej obecny w preparacie poddanym do analizy 
d)gen aktyny D. stramonium jest obecny w 4 kopiach w genomie 
e) gen aktyny D. stramonium posiada identyczna sekwencje jak gen drożdży 

44. Z pośród podanych temperatur wybrać która z największych powodzeniam da wydajne otrzymanie produktów PCR przeprowadzając dla startera 5' GGTAATCGGTTAGGCTCC3' 
a)56 C 
b) 72 C 
c) 59 C 
d) 55 C 
e) żadna 

45.Który z podanych wektorów jest najmniej przydatny do sekwencjowania genomu ssaczego ? 
a) YAC 
b)BAC 
c)wektor bedący pochodną faga 1 
d) wektor plazmidowy 

miejsc restrykcyjnych EcoRI.ile fragmentów DNA powstanie po całkowitym jej strawieniu?46.Kolista cząsteczka Dna posiada n 
a) n-1 
b) n 
c) n+1 
d) 2n-1 
e) zależy od liczby powtórzeń 

47.Wektor plazmidowy zawiera gen markerowy odpowiadający za odporność na erytromycynę (EryR) i gen markerowy odpowiedzialny za oporność na ampicylinę.Gen AmpR został przecięty enzymem restrykcyjnym a powstały w ten sposób plazmid połączono z fragmentem 1000pz o końcach komplementarnych do wektora.Które z poniższych fenotypów maja komórki transformowane: 
a) niewrażliwe na ampicylinę & niewrażliwe na erytromycynę 
b) niewrażliwe na ampicylinę & wrażliwe na erytromycynę 
c) wrażliwe na ampicylinę & wrażliwe na erytromycynę 
d) wrażliwe na ampicylinę & niewrażliwe na erytromycynę 
e) nie wiadomo 
48. Klon może być użyty jako substrat do radioaktywnego znakowania fragmentu DNA przy wykorzystaniu fragmentu Klenowa polimerazy I DNA: 
a)dATP znakowany P32 w pozycji gamma 
b)ATP znakowany w pozycji alfa 
c) dGTP znakowany w pozycji alfa 
d)[g-P32] -ATP 
e)[a-P32]-dATP 

49. Nukleaza SI 
a) może być użyta do lokalizacji sekwencji intronowych 
b) może degradować DNA i RNA i powstają produkty posiadające sekwencje P-5' 
c) DNA:DNA, RNA:RNA i DNA:RNA są odporne na działanie tego enzymu 
b) jest egzonukleazą 
e)używana do odtrawiania fragmentów kw.nukleinowych ,które maja forme pojedynczej nici50. Spośród podanych poniżej proszę wybrać zawierające najwłaściwsze uzułepłneinia dla następującego trawienie „dd NTP , używany do sekwencjonowania DNA metodą sangera charakteryzuje się ty, że nie posiada on … przy wyęglach …i…” 
a) OH 2'3'b) metyl 2'3' 
c) karboksyl 5'3' 
d) OH 2'5' 
e) żaden z powyższych 

51. Zakładajac ze polimeraza Tagi nie traci aktywności ani nie ulega rozkładowi substraty PCR można powiedzieć ze docelowa sekwncja DNA jest powielana po n-cyklach: 
a) n2 razy 
b) 2n razy 
c) n razy 
d) n2n razy 
e) 2n-2 razy 



Wyszukiwarka