Wykonanie: Mazurkiewicz Marek; Adrian Orzechowski
Enzymologia - zajęcia 1 2011-12-06
Temat: Otrzymywanie inwertazy (β-fruktofuranozydaza) z drożdży i badanie jej właściwości kinetycznych
cel: poznanie właściwości inwertazy
zasada metody: W celu wyekstrahowania inwertazy związanej ze ścianą komórkową roztarto drożdże z piaskiem. Enzym oczyszczono poprzez wirowanie. Aktywność enzymu ustalono na podstawie oznaczenia ilości cukrów prostych powstałych z rozkładu sacharozy i rafinozy. Użyto w tym celu odczynnika Somogyi (otrzymano Cu2O w ilości odpowiadającej ilości cukrów) i odczynnika Nelsona (który daje błękit molibdenowy w obecności Cu2O). Absorbancja została zmierzona przy 520 nm
obserwacje:
absorbancja wynosiła:
aktywność była obliczona ze wzoru:
10ml*25ml*50ml*n (sacharozy lub rafinozy) / 2,5g*1ml*1ml*1ml*5min
masa molowa glukozy =180g/mol