mgr Joanna Kądzielska WNOZ –PIELĘGNIARSTWO

23.02.2009

ĆWICZENIE 2

RODZAJE MIKROSKOPÓW

METODY BARWIENIA DROBNOUSTROJÓW

ROLA PREPARATU BEZPOŚREDNIEGO

1. Budowa komórki bakteryjnej 2. Podstawowe kształty i układy komórek bakteryjnych 3. Rodzaje mikroskopów i ich zastosowanie 4. Metody barwienia bakterii 5. Bakterie Gram-dodatnie i Gram-ujemne Do wykonania :

1. Mikroskopowanie oraz wykonanie rysunków z gotowych preparatów:

− pałeczek Gram-ujemnych ( E. coli)

− ziarniaków Gram-dodatnich (gronkowce)

− ziarniaków Gram-dodatnich (paciorkowce)

− laseczek ( C. perfringens)

− drożdżaków ( Candida albicans) 2. Samodzielne przygotowanie i zabarwienie preparatu mikroskopowego z hodowli

bakterii

mgr Joanna Kądzielska ROLA PREPARATU BEZPOŚREDNIEGO W

DIAGNOSTYCE MIKROBIOLOGICZNEJ

I.

Preparat bezpośredni wykonujemy z następujących materiałów:

RODZAJ

MATERIAŁ BADANY

BARWIENIE

ZAKAŻE

W PREPARACIE

NIA

BEZPOŚREDNIM

Duże znaczenie w przypadku

zmian skórnych zamkniętych.

W zaka

Skóra i

żeniach o etiologii

GRAM

tkanka

mieszanej ukierunkowuje

podskórna badanie i ułatwia dobór

pożywek.

* Obecność komórek zapalnych

(właściwy materiał z miejsca

toczącego się zakażenia),

* Obecność komórek

nabłonkowych (materiał

pobrany powierzchownie, może

zawierać bakterie ze skóry, nie

będące przyczyną zakażenia).

Narząd Ropna wydzielina

GRAM

wzroku

Plwocina

* ocena mikroskopowa w

małym powiększeniu (obiektyw 10 x):

GRAM

Układ

- komórki nabłonkowe < 10

oddechowy w polu widzenia

- granulocyty > 25 w polu

widzenia

Powyższy materiał zostaje

oceniony jako prawidłowo

pobrany i zostaje

zakwalifikowany do dalszego

badania.

Ślina natomiast:

- komórki nabłonkowe > 25 w

polu widzenia

- granulocyty < 10 w polu

mgr Joanna Kądzielska widzenia

....................................................

Popłuczyny pęcherzykowo-

oskrzelowe

Aspirat z oskrzeli i płuc

Płyn z jamy opłucnej

Bioptaty

Plwocina

Popłuczyny p

ZIEHL-

Gru

ęcherzykowo-

źlica oskrzelowe

NEELSEN

Bronchoaspirat

Popłuczyny żołądkowe

IMMUNOFLUO

Płyn z opłucnej

RESCENCJA

BEZPOŚREDNIA

Płyn mózgowo-rdzeniowy

inne

Osad płynu mózgowo-

Ośrodko rdzeniowego

GRAM

wy układ - granulocyty (etiologia

nerwowy bakteryjna)

BŁĘKIT

- komórki bakteryjne np.

METYLENO

dwoinki Gram-ujemne

WY

(Neisseria meningitidis) lub Gram-dodatnie (Streptococcus

pneumoniae)

Mocz

Układ

- z osadu: granulocyty

moczowo - z pełnego moczu: 1 komórka GRAM

-płciowy

bakteryjna w każdym polu

widzenia świadczy o obecności

ponad 105 jednostek

wzrostowych (CFU) bakterii w

1mL

Pochwa: ocena stopnia

czystości

Ropna wydzielina z cewki

GRAM

Rzeżączka moczowej, z szyjki macicy, BŁĘKIT

ropień gruczołu Bartholina

METYLENO

WY

Zakażenia Aspiraty, bioptaty, materiały bakteriami sródoperacyjne, przetoki, GRAM

beztlenowy punktaty, płyn z otrzewnej, płyn mi

z opłucnej, głębokie odleżyny

mgr Joanna Kądzielska

II. Preparatu bezpośredniego nie wykonuje się z:

• kału (bardzo liczna mikroflora) z wyjątkiem zakażenia u noworodków i małych dzieci oraz badania w kierunku kampylobakteriozy (Campylobacter spp .) i Vibrio spp.

• gardła (bogata mikroflora) z wyjątkiem błonicy (Metoda Grama:

obecność

maczugowców

Corynebacterium

diphtheriae Gram-dodatnich

w układzie X, V, L

i metoda Neissera: poszukiwanie ziarnistości Ernsta-Babesa) oraz Anginy Plauta-Vincenta (Gram-ujemne polimorficzne pałeczki Fusobacterium Gram-ujemne wrzecionowce i krętki), a także w zakażeniu grzybiczym (pleśniawki).