Analiza żywności
Sprawozdanie
Spektrofotometryczne oznaczenie zawartości żelaza (III) w badanej próbce
1. Obliczenia
Aby dokonać obliczeń należy przeprowadzić barwna reakcję jonów żelaza (III) z wytworzeniem czerwono
zabarwionego tiocyjanianu żelaza i pomiarze jego absorbancji.
1
. Wyznaczenie analitycznej długości fali.
długość fali λ absorbancja A
400
0,215
420
0,318
440
0,403
460
0,467
475
0,484
480
0,485
485
0,483
500
0,456
520
0,384
Wykres1
Analityczna długość fali dla żelaza (III) wynosi 480 nm. Przy tej długości fali będziemy mierzyć
nasze roztwory do sporządzenia krzywej wzorcowej, a także otrzymane próbki.
2. Sprawdzenie prawa Lamberta-Beera
a. Krzywa wzorcowa
– dzięki sporządzonej krzywej sprawdzimy czy spełnione jest prawo Lamberta-Beera
(zależność absorbancja od stężenia żelaza (III) ma charakter prostoliniowy) Wykres 2
Stężenie
[μg Fe/20 cm
3
]
Absorbancja 1
Absorbancja 2
25
0,155
0,138
37,5
0,221
0,279
50
0,301
0,301
62,5
0,36
0,400
75
0,495
0,458
87,5
0,626
0,590
100
0,634
0,704
125
0,872
0,824
150
1,028
1,007
Współczynnik determinacji wynosi: 0,9923, co oznacza, że prawo Lamberta-Beera jest spełnione.
R
2
> 0,98
b. Wspó
łczynnik absorpcji-metoda algebraiczna.
Stężenie [μg Fe/20
cm3]
a1
a2
25
0,0062
0,0055
37,5
0,0059
0,0074
50
0,0060
0,0060
62,5
0,0058
0,0064
75
0,0066
0,0061
87,5
0,0072
0,0067
100
0,0063
0,0070
125
0,0070
0,0066
150
0,0069
0,0067
=
� ∗ � ∗
l=1 cm
� = � ∗
� =
0,400
62,5
∗ 1
= 0,0064
a
śr
=0,00647
(wykres 3)
Pomimo tego, że niektóre punkty nie mieszczą się w przedziale + 5% to prawo Lamberta-Beera jest
spełnione. Odchylenia niektórych punktów mogą wynikać z niedokładnego odmierzania
poszczególnych składników reakcyjnych, a także niedokładnego wyzerowania próby ślepej. W
mieszaninie reakcyjnej może także znajdować się inna substancja (absorbująca taka samą długość
fali), która będzie fałszować wynik.
3. Pomiar otrzymanej próbki (nr9)
x mg żelaza(III)
50 cm
3
x 10
5 cm
3
20 cm
3
A
1
=0,220
A
2
=0,219
a. z krzywej
y=0,0069x-0,0221
– równanie funkcji
y
– absorbancja
x- stężenie żelaza(III)(c)
� =
0,220
− 0,0221
0,0069
= 28,68
��
20
� 3
� =
0,219
−0,0221
0,0069
= 31,42
��/20cm3
� ś� =
28,68 + 31,42
2
= 30,05
��
20
� 3
30,05
μgFe/20 cm
3
*10=300,5
μgFe/20 cm
3
=0,3005 mgFe/20cm
3
B
łąd względny:
=
│0,3 − 0,3005│
0,3
∗ 100% = 0,166%
b. z wspó
łczynnika absorpcji
a=0,00647
� =
0,220
0,00647
∗1
= 34,00
��/20cm3
� =
0,219
0,00647
∗1
= 33,84
��/20cm3
� ś� =
34,00 + 33,84
2
= 33,92
��
20
� 3
33,92
μgFe/20 cm
3
*10=339,2
μgFe/20 cm
3
=0,3392 mgFe/20cm
3
B
łąd względny:
=
│0,3 − 0,3392│
0,3
∗ 100% = 13%
2. Wnioski
Wyniki uzyskane podczas obliczeń są bardzo zbliżone do wyniku podanego przez prowadzącego
ćwiczenie:
http://notatek.pl/spektrofotometria-opracowanie?notatka