Aktywność foto-

przełączalnych pochodnych

azobenzenu względem

tyrozynazy izolowanej z

pieczarek

Mariusz Michalczyk

promotor: dr Michał

Jewgiński

Zakład Chemii

Bioorganicznej

Tyrozynaza

http://bioinfo.mol.uj.edu.pl/articles/Karkowska05?
action=AttachFile&do=get&target=Tyrozynaza.jpg

Melanogeneza

Problem :

Deregulacja aktywności

tyrozynazy

Galus, Zandecki, Sajjad, Jóźwiak, Włodarski.: Czynniki modulujące
melanogenezę oraz meotdy identyfikacji zaburzeń barwnikowych, Polski
Merkuriusz Lekarski, 2008

http://magdalenatrzeciak.pl/dermatologia-estetyczna/preparat-mesoline-shine/

Cele pracy

• Izolacja tyrozynazy z Agaricus bisporus;
• Przebadanie inhibitorów z grupy

pochodnych azobenzenu pod kątem ich
potencjału inhibicyjnego wobec
tyrozynazy.

Problemy

Azobenzen

Inhibitory

AC
A

MJLG68

Procedura

Wyniki

Elektroforeza

PageRuler ™ Unstained
Protein Ladder
(Fermentas)

Wyniki

Aktywność preparatu

Czas badania

Aktywność

[U/ml]

Akt.

specyficzna

[U/mg]

Po izolacji

44005

40707

Po oczyszczaniu 66938

46941

Przed kinetyką

5618

22472

W trakcie

kinetyki

2160

8640

Wyniki

Kinetyka

K

M

= 0,4309[mM]

V

max

= 0,0009706

[mM/s]

Kinetyka tyrozynazy

L-DOPA [mM]

V

o

[

m

M

/s

]

0

1

2

3

4

5

0.0000

0.0002

0.0004

0.0006

0.0008

0.0010

0.0012

Vo [mM/s]

Lineweaver-Burke

1/L-DOPA [1/mM]

1/

V

0

[s

/m

M

]

-10

-5

5

10

15

-2000

2000

4000

6000

Vo [mM/s]

Wyniki

Inhibitory

Badanie

K

M

[mM]

V

max

[mM/s]

Bez inhibitora

0,5895

0,001223

0,3-0,6 mM MJLG68-

trans

2,105

0,002243

0,3-0,6 mM MJLG68-

cis

1,898

0,001310

0,3 mM ACA-trans

1,0100

0,001193

0,3 mM ACA-cis

1,093

0,0009980

ACA- trans i ACA-cis

ACA-trans

ACA-cis

MJLG68-trans i MJLG68-cis

Wnioski

• MJLG68-trans mimo strukturalnego

podobieństwa do innych inhibitorów
powoduje zwiększenie szybkości
katalizy;

• Tylko ACA działa zgodnie z modelem

inhibicji kompetycyjnej;

• Stała hamowania dla związku ACA jest

zbliżona do stałej hamowania dla
kwasu kojowego.