Podsumowanie ćwiczenia 8 

Testy wykrywania mutagenów 

środowiskowych

NQO

DMS

Ćwiczenie 9

Polimorfizmy genów naprawy DNA 

RAR 

N

N

H

O

N

N

O

dRTP

NH

2

Go 

A 

G 

C 

Go 

C 

8-oxo-
dGMP

MTH1

Oxidative

 DNA 

damage

A 

OGG1

C 

NEIL1

Go 

C 

G 

A 

T 

Damage 

repaired 

Damage 

repaired 

BER 

BER 

Go 

or

DNA pol

AP 

AP 

Replication 

OGG2

Go 

A 

Go 

AP 

A 

MYH

MMR 

MMR 

TCR 

BER 

GGR 

RAR 

T

 

A 

Replication 

Mutation 

Szlaki naprawy 8-oksyguaniny w komórkach 

ssaków

Niektóre polimorfizmy genów naprawy DNA 

systemu BER

Gen

Zmiana 

genetyczna 

Zmiana aktywności 

enzymatycznej 

Ryzyko 

wystąpienia 

nowotworu 

OGG1 Ser326Cys

wycina 8-oksyG in vitro 

2-6 razy mniej 

efektywnie niż wariant 

podstawowy 326 Ser 

Płuca, 

prostaty, 
nosogardzieli

 

OGG1 Arg154His 

Obniżona aktywność, 

charakter mutatorowy, 

wycina 8-oksyG niezależnie 

od zasady leżącej naprzeciw 

w nici komplementarnej

 

w nowotworze  

trzustki, ryzyko 

nieokreślone 

XRCC1 Arg289His

 

Arg399Gln

Białko platformowe, brak 

aktywności 

enzymatycznej 

Płuca, piersi

MYH

Gly328Asp 
Tyr165Cys

 

obniżają aktywność 

glikozylazy wobec pary 
8-oksyG:A

 

Jelita grubego

 

MYH

Tyr90/stop  
Glu466/sto

p 

Skrócone białka

 

Jelita grubego i 

okrężnicy 

Wykonanie ćwiczenia:

PCR genów OGG1 i XRCC1 do oznaczenia polimorfizmów 

przy pomocy RFLP.

1. Cięcie restryktazą i elektroforeza agarozowa – każda 

grupa robi jedno DNA: (i) własne oraz (ii) od 
pacjentów o różnym genotypie, np. Ser326Ser, 
Cys326Cys, Ser326Cys

3. Dializa przygotowanych uprzednio produktów PCR (ok. 

140 bp.)

4. Elektroforeza kapilarna.