background image

Metody bioinformatyki

Geny i działania na nich

prof. dr hab. Jan Mulawka

background image

Trzy królestwa w biologii

Prokaryota – organizmy, których 

komórki nie zawierają jądra, np.  
bakterie

Eukaryota - organizmy, których 

komórki zawierają jądro

Archea – bakterie żyjące w 

ekstremalnych warunkach (ciśnienie, 
temperatura). Nie mają jądra ale 
przypominają Eukarioty (ekson, intron)

background image

Centralny dogmat biologii 

molekularnej

•               DNA    ---->       RNA      ---->       białko
• Przejście od DNA do RNA     ----    transkrypcja
• Przejście od RNA do białka   ----    translacja

• Białka biorą udział w wielu procesach:           
    enzymy, składniki budulcowe,                       regulatory 

innych procesów

                       

background image

Pojęcie genu

• Gen to minimalny fragment nici DNA zawierający 

informację odpowiedzialną za działanie każdej 

niezależnej funkcji w organizmie

• Gen to taki fragment ciągu nukleotydów DNA, 

który jest niezbędny do syntezy funkcjonalnego 

polipeptydu lub cząsteczki RNA

• Oprócz niezbędnej informacji kodującej ciąg 

aminokwasów w białku lub funkcjonalne RNA 

(tRNA lub rRNA) geny zawierają jeszcze inne ciągi 

nukleotydów DNA, które są niezbędne do 

przeprowadzenia transkrypcji

background image

Pojęcie chromosomu

Chromosom jest to cząsteczka DNA zawarta 

w komórce (spójny kawałek)

Otaczają tę cząsteczkę białka odpowiedzialne 

za ekspresję genów

Liczba różnych chromosomów oraz ich 

wielkość są specyficzne dla każdego gatunku

Prokariota – jeden chromosom

Eukariota – wiele chromosomów. Zawarte są 

one w jądrach. Są one liniowymi podwójnymi 
nićmi DNA

background image

DNA w chromosomach jest 

bardzo mocno skondensowane

Kolisty chromosom DNA E. coli – po 

rozpleceniu dł. ok. 1.4 mm,  mieści się w 
komórce o dł. ok. 0.002 mm i średnicy 
0.001mm

Ludzki – łączna długość ok. 2 m mieści 

się w jądrze komórki o średnicy 0.005 
mm

background image

Przykładowe liczby 

chromosomów

(liczby haploidalne)

Człowiek

23

Rezus

21

Muszka owocowa          4

Pies

39

Kot

19

Koń

32

Karp

52

Cebula

 8

background image

Pojęcie genomu

Genom jest to całkowity DNA zawarty w 

chromosomach danego gatunku

Haploidalny genom – podaje się 

sekwencje połowy chromosomów dla 
określenia całego genomu, ponieważ 
chromosomy eukariotów występują 
zwykle w homologicznych parach

background image

Przykładowe rozmiary 

haploidalnych genomów

• Człowiek

3 500 000 kbp

• Kukurydza 5 000 000 kbp
• Wiroid            0.38 kbp
• Wirus     50 kbp
• Escherichia coli          4 000 kbp
• Dróżdż        14 000 kbp
• Nicień       80 000 kbp
• Muszka owocowa

    170  000 kbp

• Kurczak

 1 200 000 kbp

background image

Poznawanie właściwości 

genomów

• W genomach eukariotów większość DNA nie 

ma poznanego funkcyjnego znaczenia

• Nie koduje białek ani RNA (jest to tzw. junk 

DNA)  -  ciemna materia

• Szacuje się, że 90 % genomu  człowieka nie 

ma funkcyjnego znaczenia

• Nie wiadomo jeszcze, jaka jest rola tej części 

DNA

background image

Podstawowe działania na 

genach

• Replikacja
• Transkrypcja 
• Translacja
• Odwrotna  transkrypcja

background image

Replikacja DNA

Proces pozwalający przekazywanie 

informacji genetycznej z komórek 

rodzicielskich do komórek potomnych w 

sposób prawie doskonały

Wysoka skuteczność jest możliwa dzięki 

mechanizmom ochronnym zdolnym do 

wykrywania i naprawy uszkodzeń 

powstałych w wyniku replikacji

Błędy pojawiają się 1 raz na 10

10

 

prawidłowo łączonych nukleotydów

background image

Replikacja DNA

background image

Fazy replikacji DNA

• inicjalizacja, wydłużanie, terminacja
• miejsce inicjacji „origin”, ma długości ok. 200-

300 par nukleotydów

Aby proces prawidłowo przebiegł:

• matryca DNA musi zostać dokładnie odczytana 
• dostępna musi być odpowiednia ilość wolnych 

nukleotydów

• podczas procesu musi zostać zachowana 

komplementarność nici

background image
background image
background image
background image

Biosynteza białka

• to proces doprowadzający do wytworzenia w pełni 

funkcjonalnych cząsteczek białek
Synteza białka jest procesem wieloetapowym, na który 

składają się w większości komórek:

• transkrypcja - przepisanie informacji z DNA na RNA 
• translacja - odkodowanie informacji zawartej w RNA i na 

tej podstawie utworzenie łańcucha polipeptydowego 

• ukształtowanie struktury drugo- i trzeciorzędowej, czyli 

odpowiednie zwinięcie się łańcucha aminokwasów 

• potranslacyjna modyfikacja cząsteczki białkowej (etap 

nie zawsze obecny) 

background image

Transkrypcja genów 

prokariotycznych

• Geny odpowiedzialne za jeden cel 

metaboliczny (np. synteza  aminokwasu)

    leżą obok siebie (na chromosomie) i ich 

transkrypcja jest wspólnie regulowana

• Taki fragment nazywa się operonem. 

Transkrypcja przebiega według zwykłej zasady 
syntezy. Powstaje mRNA (messanger RNA lub 
informacyjne RNA). Jest to RNA zawierający 
wszystkie instrukcje potrzebne do syntezy 
białka

background image

Transkrypcja

• transkrypcja polega na przepisaniu informacji genetycznej 

z kwasu deoksyrybonukleinowego (DNA) na kwas 

rybonukleinowy (RNA). 

background image
background image
background image
background image
background image
background image

Transkrypcja genów 

eukariotycznych

• U eukariontów geny są  „w kawałkach" 

poprzedzielanych niekodującymi fragmentami

    (intronami) 
• Kodujące części (eksony) oraz introny są 

początkowo kopiowane na pre-mRNA, które 
jest dualną kopią DNA (z zamianą T na U)

• Następnie dzięki procesowi wycinania intronów 

i sklejania pozostałych eksonów (splicing) 
powstaje ostateczne mRNA

background image
background image

Operacja translacji

background image

Kod genetyczny

• Każdemu aminokwasowi odpowiada 

sekwencja trzech nukleotydów (kodon), 
która go koduje 

• Często więcej niż jedna sekwencja 

koduje ten sam aminokwas,

    np. leucyna ma 6 kodonów

background image

Właściwości kodu 

genetycznego 1

• Trzy nukleotydy kodują jeden aminokwas
• Kod jest jednoznaczny czyli jeden kodon koduje 

ściśle określony aminokwas

• Kod jest zdegradowany tzn. jeden aminokwas 

może być kodowany na kilka kodonów (spośród 

64 kodonów, 61 koduje różne aminokwasy, zaś 

3 kodony stanowią sygnał do zakończenia 

syntezy białka)

background image

Właściwości kodu 

genetycznego 2

• Kodon AUG (metionina) koduje początek 

polipeptydu 

• Są trzy kodony stopu (nie kodują żadnego 

aminokwasu): UAA, UGA, UAG 

• Tak więc łącznie 61 kodonów reprezentuje 

20 aminokwasów

• Ciąg nukleotydów (RNA) wyznacza pewien 

ciąg aminokwasów

• W zależności gdzie zaczniemy czytać, 

możemy dostać trzy różne ciągi 

aminokwasów

• Ramka odczytu to ciąg nukleotydów nie 

przerwany kodonem stopu

background image

Właściwości kodu 

genetycznego 3 

• Kod jest uniwersalny, tzn. wspólny dla 

priokariota i eukariota (w tym wypadku 

występują pewne odstępstwa)

• Kod jest niezachodzący – kolejne trójki 

nukleotydów stanowią kolejne kodony

• Kod jest bezprzecinkowy – kolejne kodony 

nie są oddzielone od siebie nukleotydami 

niekodującymi

background image
background image
background image

Cząsteczki  RNA  w 

translacji

• Jest to proces przetwarzania zakodowanej 

(przy pomocy kodonów) informacji w 

cząsteczce  mRNA na białko

• Biorą w nim udział następujące kwasy 

rybonukleinowe:

1.mRNA (informacyjne RNA) zawiera 

zakodowaną informację o białku

2. rRNA (rybosomowe RNA); rybosomy są 

kompleksami składającymi się z wielu 

podjednostek białkowych i rRNA. 

Przeprowadzają one właściwą syntezę białek

background image

3. tRNA, transportujący RNA (transfer RNA)
• Długość: 70-90 nukleotydów
• Ustala odpowiedniość pomiędzy 

aminokwasem i kodonem

• Łączenie pustego tRNA z odpowiadającym 

aminokwasem jest regulowane przez enzym. 

Powyższa odpowiedniość jest osiągnięta 

poprzez tzw. antykodon czyli kodon 

komplementarny

• Są różne tRNA dla różnych aminokwasów. 

Bakterie mają około 30-40 różnych rodzajów 

tRNA, zwierzęta i rośliny około 50

background image
background image

Proces translacja

background image

Proces translacji

1. (Faza inicjacji) tRNA niosący 

metioninę, wraz z innymi białkami 
(inicjującymi) i z mniejszą częścią 
rybosomu (rybosom składa się z dwóch 
nierównych części)łączą się z mRNA w 
pozycji start (AUG). Wówczas dołącza 
się większa część rybosomu.

background image

2. (

Faza wydłużania) Zostaje pobrany następny tRNA, 

którego antykodon pasuje do kolejnego kodonu w 
ciągu mRNA. Polipeptyd wyprodukowany dotąd `wisi' 
przy poprzednim tRNA. Nowy aminokwas zostaje 
dołączony do polipeptydu (na końcu karboksylowym) 
i większy polipeptyd `wisi‘ teraz przy ostatnim tRNA. 
Poprzednie tRNA (puste) zostaje wydalone z 
rybosomu. Wydłużanie polipeptydu jest 
przeprowadzane od końca aminowego (N) w kierunku 
końca karboksylowego (C). Następnie rybosom 
przesuwa się o kolejne trzy pozycje wzdłuż mRNA ( w 
kierunku od 5' do 3').

background image
background image

3. (Terminacja) Po napotkaniu przez rybosom 

kodonu stopu następuje uwolnienie zbudowanego 
polipeptydu, uwolnienie ostatniego pustego tRNA 
i odłączenie rybosomu od mRNA. 

     Kilka rybosomów (po kolei) może pracować w 

tym samym czasie na jednym mRNA. Prędkość 
budowania polipeptydu przez rybosom to 3-5 
aminokwasów na sekundę. Zatem białko o 100-
200 aminokwasach jest produkowane przez ok. 1 
minutę. Duże białka (np. titina, 30600 
aminokwasów) są budowane przez 2-3 godziny.

background image

• syntetyzowane białko podlega następnie 

dalszym przemianom przyjmując 

odpowiednią strukturę i pozostaje białkiem 

wewnątrzkomórkowym (wędruje do aparatu 

Golgiego, wiąże się z siateczką 

cytoplazmatyczną) lub wydzielane jest na 

zewnątrz komórki

• Niezbędna do syntezy wiązań peptydowych 

białek energia czerpana jest z wiązań 

wysokoenergetycznych w cząsteczkach 

ATP. Proces biosyntezy białek może 

zachodzić też w zawierających DNA 

mitochondriach i plastydach

background image

Operacja odwrotnej 

transkrypcji

background image
background image

Działania na genach w 

biologii molekularnej