Nr. 4 

Mateusz Stoszko 

 

KSZTAŁTOWANIE PROCESU

 

BIOTECHNOLOGICZNEGO

 

 

 

Wpływ stężenia alkoholu etylowego na wzrost drożdży. 
 

Przebieg doświadczenia: 

+ rozlano po 10 cm

3

 podłoża GYEP (2% glukozy, 1% ekstraktu drożdżowego, 1% peptonu) do 3 kolbek 

+  sporządzono  3  rozcieńczenia  alkoholu  etylowego  po  0%,  5%,  15%  każdy  w  kolbach  zawierających  podłoże 
GYEP 
+ przygotowane podłoża w kolbkach zaszczepiono zawiesiną drożdży piekarskich (0,2cm

3

) i wymieszano r-r 

+ kolby zważono, policzono liczbę komórek drożdży (przy użyciu komory Thoma) oraz zbadano ich żywotność i 
odżywienie 
+ przeniesiono do inkubacji (hodowla stacjonarna) 
 + po tygodniu od założenia hodowli ponownie kolbki zważono, policzono liczbę komórek, zbadano żywotność i 
odżywienie 

 
Obserwacje:  
Po okresie inkubacji: 

Masy  kolbek  zmalała.  Liczba  komórek  wzrosła  o  ponad  3  rzędy  wielkości.  Żywotność  komórek  znacznie 
zmalała. Po dokonaniu obserwacji mikroskopowej stwierdzono niskie odżywienie komórek drożdży. 

Dane w tabeli na końcu sprawozdania. 
 
Wnioski: 
 

Z  danych  liczbowych  wynika,  że  drożdże  preferują  niskie  stężenia  etanolu  w  środowisku,  największy  wzrost 

osiągnęły w stężeniu 5%, natomiast najwyższą żywotność w środowisku którego początkowe stężenie etanolu wynosiło 
0%. Zmiana masy kolbek była spowodowana reakcjami które komórki drożdży przeprowadzały w podłożu, w wyniku 
których  wydzielał  się  głównie  dwutlenek  węgla,  który  wydostawał  się  z  układu  do  atmosfery,  zmniejszając  masę 
badanego materiału. 
 
 
 

Wpływ pH podłoża hodowlanego na wzrost drożdży. 
 

Przebieg doświadczenia: 
 

+ do 3 zlewek wlano po 20cm

3

 buforów fosforanowych 

 

+ do każdej zlewki dodano po 0,4g sacharozy, 0,2g ekstraktu drożdżowego i 0,2g peptonu 

 

+ przy pomocy filtru strzykawkowego wyjałowiono podłoże do jałowych kolb stożkowych o V = 100cm

3

 

 

+ zaszczepiono podłoża w kolbkach 0,2cm

3

 zawiesiny drożdży piekarskich i dokładnie wymieszano r-r 

 

+ policzono komórki drożdży, zbadano żywotność i odżywienie  

 

+ przeniesiono do inkubacji na 7 dni 

 

+ po tygodniu ponownie zważono kolbki, policzono komórki i zbadano żywotność oraz odżywienie 

 
Obserwacje:  
Po okresie inkubacji: 

Masy wszystkich kolbek zmniejszyły się. Liczba komórek wzrosła o ponad rząd wielkości. Żywotność komórek 
zmalała.  Po  dokonaniu  obserwacji  mikroskopowej  stwierdzono  wyższe  odżywienie  komórek  drożdży  w 
porównaniu z hodowlą wyjściową. 

Dane w tabeli na końcu sprawozdania. 
 
Wnioski: 
 

Drożdżom  sprzyjało  pH  kwaśne.  W  takim  środowisku  wzrosło  odżywienie  drożdży,  żywotność  była  lepsza  w 

porównaniu z pH zasadowym. Także wzrost był wyższy w środowisku kwaśnym. 
 

Wpływ składu podłoża hodowlanego na wzrost drożdży. 
 

Przebieg doświadczenia: 
 

+ do 3 zlewek wlano po 20cm

3

 podłoża bazowego [0,25g (NH

4

)HPO

4

 i 0,25g (NH

4

)

2

SO

4

 na 100 cm

3

 wody] 

 

+ następnie dodano do zlewki: 

 

 

I – 1,4g laktozy   

II – 2,3g rafinozy 

III – 1,4g sacharozy 

 

+ dokładnie wymieszano zawartość zlewek 

 

+ przy użyciu filtra strzykawkowego wyjałowiono podłoża do kolb o V = 100cm

3

 

 

+ zawartość każdej kolby zaszczepiono 0,2cm

3

 zawiesiny drożdży piekarskich i dokładnie wymieszano 

 

+ kolby zważono, policzono komórki, zbadano żywotność i odżywienie 

 

+ kolby przeniesiono do inkubacji a 7 dni 

 

+ po tygodniu ponownie zważono kolbki, policzono komórki, zbadano odżywienie i żywotność 

 
Obserwacje:  
Po okresie inkubacji: 

Masy wszystkich kolbek zmniejszyły się. Liczba komórek wzrosła o ponad rząd wielkości. Żywotność komórek 
zdecydowanie  zmalała.  Po  dokonaniu  obserwacji  mikroskopowej  stwierdzono  wyższe  odżywienie  komórek 
drożdży w porównaniu z hodowlą wyjściową. 

Dane w tabeli na końcu sprawozdania. 
 
Wnioski: 
 

Sacharoza jest najlepiej stymuluje rozwój komórek drożdży. W środowisku wzrosło odżywienie drożdży. Także 

wzrost, liczba komórek była wyższa. 

 
 
 
Porównanie wydajności tworzenia biomasy różnych szczepów drożdży. 
 

Przebieg doświadczenia: 

+  rozlano  jałowo  do  3  kolb  stożkowych  20cm

3

  podłoża  GYEP  (2%  glukozy,  1%  ekstraktu  drożdżowego,  1% 

peptonu) 
 + podłoża każdej z kolb zaszczepiono (po 2 oczka ezy) drożdżami 
  

Piekarskimi 

  

Paszowymi 

  

Winiarskimi 

+ zawartość kolb dokładnie wymieszano – do „rozpuszczenia” grudek kolonii drożdży 
+ zbadano żywotność drożdży z każdej hodowli z pomocą błękitu metylenowego – żywe komórki bezbarwne, 
martwe zabarwione na błękitny kolor 
+  zbadano  odżywienie  komórek  z  każdej  hodowli  z  pomocą  płynu  Lugola  –  komórki  zawierające  glikogen 
barwią się na ciemnobrunatny kolor (komórki dobrze odżywione) pozostałe na jasnożółty (komórki młode) 
+ oznaczono liczbę komórek drożdży w 1cm

3

 każdej z hodowli w komorze Thoma 

+ każdą kolbę zważono i umieszczono w termostacie 
+ po namnożeniu (po tygodniu) ponownie kolbki zważono 
+ oznaczono żywotność, odżywienie oraz liczbę komórek drożdży 

 
Obserwacje:  
Po okresie inkubacji: 

Masa  kolbek  zmalała.  Liczba  komórek  wzrosła  o  ok.  2  rzędy  wielkości.  Żywotność  nieco  spadła  natomiast 
odżywienie pozostało bez większych zmian. 

Dane w tabeli na końcu sprawozdania. 
 
Wnioski: 
 

Drożdże winiarskie wykazały najintensywniejszy wzrost. 

 
 
 
 

 

 

Masa kolbek [g] 

Liczba komórek 

Żywotność [% 

martwych] 

Odżywienie 

 

 

K 

H 

K 

H 

K 

H 

K 

H 

Alkohol 

0 % 

82,60 

81,21 

9,5 ∙ 10

6 

2,88 ∙ 10

9 

0 

4,5 

+ 

- 

5 % 

87,91 

87,04 

5,75 ∙ 10

10 

0 

34 

+ 

- 

15 % 

93,36 

91,49 

4,84 ∙ 10

9 

0 

43 

+ 

+/- 

pH 

3 

78,69 

77,98 

5,5 ∙ 10

6 

1,44 ∙ 10

8 

0 

7,3 

- 

+ 

5 

76,65 

75,49 

8,40 ∙ 10

7 

0 

1,1 

- 

+/- 

8 

86,56 

85,89 

3,20 ∙ 10

7 

0 

15 

- 

- 

Źródło 

węgla 

L 

89,56 

88,98 

6,7 ∙ 10

6 

2,08 ∙ 10

7 

4 

40 

- 

+ 

F 

70,79 

70,37 

3,20 ∙ 10

7 

4 

50 

- 

+ 

S 

78,86 

79,18 

1,33 ∙ 10

8 

4 

50 

- 

+ 

Szczep 

drożdży 

Piekarnicze 

93,33 

91,41 

2,4 ∙ 10

6 

2,92 ∙ 10

8 

0 

5 

+/- 

+ 

Winiarskie 

89,69 

87,02 

9,7 ∙ 10

6 

2,20 ∙ 10

8 

0 

5 

+ 

+ 

Paszowe 

78,54 

77,57 

9,2 ∙ 10

8

  

4,80 ∙ 10

8 

0 

15 

+ 

+