Ć

wiczenie nr 3 

 

(03-06.03.2014) 

GRONKOWCE 

 

Rodzaj 

Staphylococcus 

 

 

1.

  Czynniki determinujące chorobotwórczość 

2.

  Epidemiologia i klinika zakażeń wywoływanych przez gronkowce 

3.

  Mechanizmy  oporności  gronkowców  na  antybiotyki  (produkcja  β-laktamaz, 

metycylinooporność, MLS

B

, oporność na glikopeptydy) 

4.

  Diagnostyka laboratoryjna zakażeń gronkowcowych 

 
Demonstracja: 
1.

  Wzrost szczepów: Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis i Micrococcus 

spp. na podłożu agarowym z krwią baranią i na podłożu Chapmana 

2.

  Oznaczenie koagulazy 

3.

  Badanie mechanizmów lekooporności gronkowców 

− 

oznaczanie wrażliwości na penicylinę 

a.

  test cefinazowy (krążek z nitrocefiną) 

b.

  metoda dyfuzyjno-krążkowa (krążek z penicyliną) 

− 

określenie metycylinooporności 
a.

  metoda dyfuzyjno-krążkowa (krążek z cefoksytyną) 

b.

  testy  wykrywające  białka  PBP  2a,  produktu  genu  mecA,  warunkującego 

oporność na meticylinę (dla Staphylococcus aureus) 

c.

  wykrywanie obecności genu mecA z wykorzystaniem techniki PCR 

− 

identyfikacja  i  interpretacja  fenotypów  oporności  na  makrolidy,  linkosamidy 
i streptograminy B 
a.

  metoda dwóch krążków 

− 

badanie wrażliwości na glikopeptydy 

o

  oznaczanie MIC glikopeptydów 

o

  metoda mikrorozcieńczeń w bulionie 

o

  metoda dyfuzji w agarze z paska nasączonego gradientem antybiotyku 

 
Do wykonania: 

1.

  barwienie metodą Grama preparatu z hodowli Staphylococcus aureus 

2.

  oznaczenie katalazy i czynnika CF