2012-03-22 

1 

Konserwacja nasienia knura, 

inseminacja loch 

Dr Wiesław Bielas 

Konserwacja nasienia 

W niskich temperaturach <0

o

C 

 

W stanie płynnym >0

o

C 

PODSTAWOWA 

METODA 

KONSERWACJI 

NASIENIA KNURA 

!!!! 

Konserwacja w stanie płynnym 

pobranie 2 frakcji nasienia metodą na rękę 

przecedzenie, ocena

 

rozrzedzenie nasienia w stosunku od 1:1 do 

1:7 rozrzedzalnikiem o tem. 33⁰C 

wolne schładzanie mieszaniny do tem. śr 17 ⁰C 

przez ok. 4-5 godz. 

przygotowanie dawek inseminacyjnych: 

objętośd:  

50 -100 ml  

koncentracja: 

3-5 mld plemników o ruchu prawidłowym 

Konserwacja nasienia knura w stanie 

płynnym 

• EDTA: sól kwasu etyleno- di – amino 

tetraoctowego, który cheletuje jony Ca

++, 

Mg

++

 i  

• Zn 

++

, jony uczynniające enzymy proteolityczne  

• Rola innych skladnikow rozrzedzalników 
-glukoza 
-sole 
-antybiotyki 
-… 
 

 

Konserwacja nasienia knura w stanie 

płynnym - rozrzedzalniki 

Składnik 

  

Pliszko I 

Pliszko II 

 

Merck 

Glukoza 

60.00 

 

  60.00 

 

53.68 

EDTA 

 

3.7 

 

  1.85 

1.8 

Cytr sodu 

10.00 

 

  1.5 

3.3 

NaOH 4% 

8.0 

 

  0.6 

- 

NaHCO

3

 

- 

 

  - 

3.3 

Streptom 

0.5 

 

  0.5 

- 

Gentam 

- 

 

  - 

0.018 

Aqua bidest 

1000.0 

 

1000.0 

 

1000.0 

3 dni 15-18

o

C 

6 dni 12-18

o

C 

 

tydzieo w temp 

pokojowej 

 

Inne:  MRA, Androstar, Safecell, BTS 

Konserwacja nasienia knura w niskich temperaturach 

 

 

Ampułki 

   

 

Metody:            

Pelety – kulki na suchym 

lodzie 

Tuby, plastikowe 

słomki 0,5; 5 ml 

2012-03-22 

2 

Konserwacja nasienia knura w niskich temperaturach 

rozrzedzalniki 

ROZRZEDZALNIK NR I Merck (modyfik) 

substancja 

ilośd 

Glukoza 
Cytrynian sodu dwuwodny 
EDTA (wersenian disodowy) 
Na

2

HCO

3

 

 Gentamycyna 
H

2

0 destylowana                               ad 

53, 3 
3, 6 g 
1,8  
1,2 
0,018 
1000 ml 

ROZRZEDZALNIK nr II zimny

 

substancja 

ilośd 

11% laktoza  
żółtko jaja kurzego 

80%  
20%  

Rozrzedzalnik nr III

 

substancja 

ilośd 

rozrzedzalnika nr II 
glicerolu  
Orvus Es Paste (detergent) 

92 ml  
6 ml  
0,2 ml  

Postępowanie w metodzie Hannower 

Pobrad drugą frakcję plemnikową (metoda na 

rękę„) przecedzid, ocenid jakośd nasienia 

Do nasienia dodad rozrzedzalnik Merck        

(l :2)  w temperaturze 30 °C 

pozostawid w temp. pokojowej (20 °C) przez 

1,5 h 

Umieścid mieszaninę w temp 15-18 ° C na kolejne 3 h 

Wirowanie – 10 min/2 tys obr./min 

Odlad supernatant-

zamrażarka! 

Do osadu dodad rozrzedzalnik „zimny„ (nr 2)  

Rozrzedzone nasienie pozostawid w temp,  
                  4-5 °C na 1,5 godz. 

Tuż przed mrożeniem dodad rozrzedzalnik  nr 3,  

tak aby koncentracja wynosiła 1,5 x 10

9

 / ml 

Napełnienie tub: 5- 6 ml nasienia 

Mrożenie w parach ciekłego azotu LN

2 

(-120 °C) 

– 20 minut 

Zamrożenie w LN

2

(-196 °C) 

Konserwacja nasienia knura w niskich temperaturach 

• 

Tuba do łaźni wodnej o temp. 50 °C na 40 sek. 

• Odciąd nasadę tuby, zawartośd zaaspirowad do 

strzykawki wraz z 80 ml rozrzedzalnia Merck (w skład 
którego wchodzi 30% osocza nasienia) 

 

Rozmrażanie 

Inseminacja loch 

Owulacja występuje 30-40 od pierwszych 

objawów rujowych 

Inseminacja loch: 

Termin unasienniania: 

24 h od objawów 

tolerancji

 

Reinseminacja po 12 – 24 h

 

2012-03-22 

3 

 

Dawka inseminacyjna:  

objętośd: 80 -100 ml, liczba plemników od 3 do 5 mld  

 

Sztuczna inseminacja loch 

Klasycznie-doszyjkowo 

Głęboka domaciczna 

Kateter inseminacyjny „GEDIS” 

2012-03-22 

4 

Dawka: 3 miliardy plemników 

Dawka: 1 miliard plemników 

Dawka: 150 milionów plemników