13. Transformacja u bakterii
Cel ćwiczenia
•
Wywołanie sztucznej transformacji u Escherichia coli przy przy pomocy plazmidu pGLO
stosując duże stężenie soli w połączeniu z szokiem cieplnym (transformacja chemiczna)
•
Obliczenie wydajności transformacji
Transformacja
•
Proces, podczas którego komórka biorcy pobiera wolny DNA z otaczającego środowiska
•
Transformacja naturalna (zachodząca w środowisku naturalnym) i sztuczna
(przeprowadzana w laboratorium przy zastosowaniu specjalnych zabiegów jak szok
chemiczny lub spowodowany polem elektrycznym - elektropolacja )
•
Aby mogła zajść transformacja osobniki muszą uzyskać tzw. stan kompetencji czyli
zdolność do pobrania DNA
•
Proces pobierania DNA może być podzielony na dwa etapy: wiązanie DNA z powierzchnią
komórki i przechodzenie przez osłony komórkowe
Plazmidy
•
Dodatkowy fragment DNA zazwyczaj kolisty (może być też liniowy), znacznie mniejszy od
chromosomu bakteryjnego zdolny do niezależnej replikacji
•
Mogą kodować różne funkcje np. oporność na antybiotyki (plazmidy opornościowe R),
elementy strukturalne, systemy transportu w błonie komórkowej, zdolność przenoszenia się
z jednej komórki do drugiej w procesie koniugacji.
