SYSTEMY DOSTARCZANIA GENÓW
W OBRĘBIE STAWÓW
ADENOWIRUSOWY SYSTEM TRANSFERU GENÓW
- OPARTY NA TYPOWYCH WIRUSACH WYWOŁUJĄCYCH ŁAGODNE
STANY ZAPLANE DRÓG ODDECHOWYCH
- INFEKUJĄ BARDZO WYDAJNIE SZEROKIE SPEKTRUM KOMÓREK
- MOŻLIWOŚĆ STOSOWANIA
IN VIVO
- KRÓTKOTRWAŁA EKSPRESJA WPROWADZONYCH GENÓW
- UTRUDNIONE WIELOKROTNE PODAWANIE
293 Cell - ekspresja
genu E1
kotransfekcja
produkcja rekombinowanych adenowirusów
E1
E1
Transgen
Shuttle plasmid
rekombinacja
E1
pA
ITR
ITR
ITR
genom adenowirusa z
usuniętym genem E1
KOMÓRKI 293
produkujące białko E1
PLAZMID NOŚNIKOWY
ADENOWIRUSOWY SYSTEM TRANSFERU GENÓW
RETROWIRUSOWY SYSTEM TRANSFERU GENÓW
- WIRUSY SKONSTRUOWANE SĄ W OPARCIU O WIRUSA MYSIEJ
BIAŁACZKI MOLONEY’A
- INFEKUJĄ DOSYĆ SZEROKIE SPEKTRUM KOMÓREK
- MOŻLIWOŚĆ WYSELEKCJONOWANIA ZMODYFIKOWANYCH
KOMÓREK
- MODYFIKACJA KOMÓREK
EX VIVO
- DŁUGOTRWAŁA EKSPRESJA WPROWADZONYCH GENÓW
(INTEGRACJA Z GENOMEM KOMÓRKI GOSPODARZA)
LTR
LTR
TRANSGENE
IRES
MARKER GENE
+
LTR
LTR
TRANSGEN
IRES
Neo
+
LTR
LTR
TRANSGENE
IRES
MARKER GENE
+
LTR
LTR
TRANSGENE
IRES
MARKER GENE
+
LTR
LTR
TRANSGENE
IRES
MARKER GENE
+
wektor retrowirusowy
transfekcja komórek pakujących
LTR
env
pA
LTR
pA
gag
pol
LTR
LTR
TRANSGENE
IRES
MARKER GENE
+
pączkujący retrowirus
KOMÓRKA PAKUJĄCA
rekombinowane
retrowirusy
USTALONA LINIA
TRANSDUKOWANYCH KOMÓREK
transdukcja komórek docelowych
NIEWIRUSOWE SYSTEMY TRANSFERU GENÓW
„NAGI DNA”
- WSTRZYKIWANIE CZYSTEGO DNA
- WYDAJNY SYSTEM TRANSFERU GENÓW DO KOMÓREK MIĘŚNIOWYCH
- NISKA WYDAJNOŚĆ TRANSFERU GENÓW DO PRZESTRZENI STAWOWEJ
LIPOSOMY
- OPŁASZCZENIE DNA WEWNĄTRZ KULISTYCH STRUKTUR SKŁADAJĄCYCH SIĘ Z
FOSFOLIPIDÓW
- NISKA WYDAJNOŚĆ TRANSFERU GENÓW DO PRZESTRZENII STAWOWEJ
STRATEGIE TERAPII GENOWEJ
W REUMATOIDALNYM ZAPALENIU STAWÓW
PATOGENEZA REUMATOIDALNEGO ZAPALENIA STAWÓW
ANTYGEN + LIMFOCYT T
WYDZIELANIE CYTOKIN
WYTWARZANIE NACZYŃ
(NEOWASKULARYZACJA)
AKTYWACJA MAKROFAGÓW
AKTYWACJA LIMFOCYTÓW B
PROLIFERACJA FIBROBLASTÓW I PRODUKCJA
ENZYMÓW PROTEOLITYCZNYCH
WYDZIELANIE CYTOKIN
(IL-1, TNF-alfa, IL-6)
PRODUKCJA CZYNNIKA
REUMATOIDALNEGO
I PRZECIWCIAŁ KL. IgG
AKTYWACJA OSTEOKLASTÓW
EROZJA W CHRZĄSCE, KOŚCI PODCHRZĘSTNEJ, TOREBCE STAWOWEJ I WIĘZADŁACH
FAZA ZAPALNA
FAZA PROLIFERACYJNA
ZASTOSOWANIE ANTAGONISTY RECEPTORA IL-1
WYDZIELANIE ENZYMÓW PROTEOLITYCZNYCH
IL-1
FIBROBLASTY Z
RECEPTORAMI DLA IL-1
ADENOWIRUS ZAWIERAJĄCY
GEN KODUJĄCY BIAŁKO
BLOKUJĄCE RECEPTOR DLA IL-1
WYPRODUKOWANE
BIAŁKO – ANTAGONISTA
RECEPTORA IL-1
WYDZIELANIE ENZYMÓW PROTEOLITYCZNYCH
ZABLOKOWANIE
RECEPTORÓW DLA IL-1
ZASTOSOWANIE INTERLEUKINY 10 (IL-10)
WYDZIELANIE CYTOKIN
(IL-1, TNF-alfa, IL-6, IFN-gamma, IL-8)
PROLIFERACJA FIBROBLASTÓW
WZMACNIANIE REAKCJI ZAPALNEJ
AKTYWOWANE LIMFOCYTY I MAKROFAGI
ADENOWIRUS ZAWIERAJĄCY
GEN IL-10
IL-10
WYDZIELANIE CYTOKIN
(IL-1, TNF-alfa, IL-6, IFN-gamma, IL-8)
WZMACNIANIE REAKCJI ZAPALNEJ
PROLIFERACJA FIBROBLASTÓW
HAMOWANIE AKTYWOWANYCH LIMFOCYTÓW I MAKROFAGÓW
ZASTOSOWANIE BIAŁKA FasL
AKTYWOWANE LIMFOCYTY ORAZ
PROLIFERUJĄCE FIBROBLASTY MAJĄ
NA SWOJEJ POWIERZCHNI RECEPTOR FAS
ADENOWIRUS ZAWIERAJĄCY
GEN FasL
FasR
FasR
FasR
FasR
AKTYWOWANE LIMFOCYTY ORAZ
PROLIFERUJĄCE FIBROBLASTY MAJĄ
NA SWOJEJ POWIERZCHNI RECEPTOR FAS
BIAŁKO FasL
FasR
FasR
BIAŁKO FasL ŁĄCZY SIĘ Z
RECEPTORAMI Fas (FasR)
NA AKTYWOWANYCH KOMÓRKACH
BIAŁKO FasL
FasR + FasL
FasR + FasL
INICJACJA APOPTOZY
(PROGRAMOWANEJ ŚMIERCI KOMÓRKI)
AKTYWOWANYCH LIMFOCYTÓW
ORAZ FIBROBLASTÓW
HAMOWANIE WEWNĄTRZKOMÓRKOWYCH SZLAKÓW
TRANSDUKCJI SYGNAŁU
ELEMENTY TRANSDUKCJI SYGNAŁU
np. KINAZY SRC, CZYNNIK NF-kB
AKTYWACJA PROCESÓW JĄDROWYCH
ODPOWIEDZIALNYCH ZA PROLIFERACJĘ KOMÓREK
ORAZ WYDZIELANIE CYTOKIN
PRZEZ LIMFOCYTY
RECEPTOR NA POWIERZCHNI
KOMÓRKI AKTYWOWANY PRZEZ
CYTOKINY
JĄDRO
ADENOWIRUS ZAWIERAJĄCY
GENY CZYNNIKÓW BLOKUJĄCYCH
TRANSDUKCJĘ SYGNAŁU
JĄDRO
EKSPRESJA GENÓW KODUJĄCYCH
CZYNNIKI BLOKUJĄCE
ELEMENTY TRANSDUKCJI SYGNAŁU
JĄDRO
BLOKOWANIE TRANSDUKCJI
SYGNAŁU DO JĄDRA
KOMÓRKOWEGO
JĄDRO
BLOKOWANIE TRANSDUKCJI
SYGNAŁU DO JĄDRA
KOMÓRKOWEGO
AKTYWACJA PROCESÓW JĄDROWYCH
ODPOWIEDZIALNYCH ZA PROLIFERACJĘ
ORAZ WYDZIELANIE CYTOKIN
PRZEZ LIMFOCYTY
JĄDRO
HAMOWANIE PROLIFERACJI KOMÓREK
FIBROBLASTY DZIELĄCE SIĘ W OBRĘBIE STAWU
ADENOWIRUS ZAWIERAJĄCY
GEN p16
EKSPRESJA GENU p16
W ZMODYFIKOWANEJ KOMÓRCE
BIAŁKO p16
HAMUJE PODZIAŁY KOMÓRKOWE
KONIEC