UNIWERSYTET PRZYRODNICZY

Wydział Medycyny Weterynaryjnej

KATEDRA BIOCHEMII I FIZJOLOGII ZWIERZĄT

Zakład Biochemii

20-033 Lublin, ul. Akademicka 12

tel. [phone]

09-11-19 www.biochfiz.up.lublin.pl Wersja 2.19.11.09

- 1 z 2 -

Płyny ustrojowe

krew

Zadania 1 – 3 wykona

ć

u

ż

ywaj

ą

c osocza jako próby. Zadanie 4

wykona

ć

u

ż

ywaj

ą

c krew pełn

ą

jako prób

ę

.

Wyniki zada

ń

1 - 2 zanotowa

ć

w tabeli.

Oznaczenie

Wynik

Wykrywanie jonów Cl

-

Wykrywanie jonów SO

4

-2

Wykrywanie jonów HPO

4

-2

Wykrywanie jonów Ca

+2

Wykrywanie

ż

elaza

Wykrywanie glukozy

Zadanie 1.

Wykrywanie nieorganicznych składników osocza krwi

Wykonanie.

Do 5 cm

3

osocza doda

ć

5 cm

3

wody destylowanej i 5 cm

3

5% TCA.

Odczeka

ć

15 min. Po tym czasie zawarto

ść

odwirowa

ć

10 min. 3000

obr./min. W bezbiałkowym przes

ą

czu osocza wykona

ć

nast

ę

puj

ą

ce próby:

a.

Wykrywanie jonów Cl

-

Do 0,5 cm

3

przes

ą

czu doda

ć

2 krople 0,2% AgNO

3

– wytraca si

ę

serowaty osad AgCl

b.

Wykrywanie jonów SO

4

-2

Do 0,5 cm

3

przes

ą

czu doda

ć

2 krople 5% BaCl

2

– powstaje białe

zm

ę

tnienie pochodz

ą

ce od BaSO

4

c.

Wykrywanie jonów HPO

4

-2

Do 0,5 cm

3

przesaczu doda

ć

0,5 cm

3

molibdenianu amonowego i 0,5 cm

3

st

ęż

. HNO

3

. Po zagotowaniu powstaje

ż

ółty osad fosforomolibdenianu

amonowego.

d.

Wykrywanie jonów Ca

+2

Do 0,5 cm

3

przes

ą

czu doda

ć

0,5 cm

3

szczawianu amonowego i kilka

kropli st

ęż

. NH

4

OH – zm

ę

tnienie roztworu pochodzi od szczawianu

wapnia.

UNIWERSYTET PRZYRODNICZY

Wydział Medycyny Weterynaryjnej

KATEDRA BIOCHEMII I FIZJOLOGII ZWIERZĄT

Zakład Biochemii

20-033 Lublin, ul. Akademicka 12

tel. [phone]

09-11-19 www.biochfiz.up.lublin.pl Wersja 2.19.11.09

- 2 z 2 -

e.

Wykrywanie

ż

elaza

Do

0,5

cm

3

przes

ą

czu

doda

ć

kilka

kropel

20%

kwasu

sulfosalicylowego i 0,5 cm

3

st

ęż

. NH

4

OH –

ż

elazo w

ś

rodowisku

alkalicznym tworzy z kwasem sulfosalicylowym zwi

ą

zek wewn

ą

trz

kompleksowy o barwie

ż

ółtej.

Zadanie 2.

Wykrywanie składników organicznych osocza krwi

Wykonanie.

a.

Wykrywanie glukozy

Do 0,5 cm

3

osocza krwi doda

ć

2 krople odczynnika Molischa.

Wymiesza

ć

i ostro

ż

nie wprowadzi

ć

1 cm

3

st

ęż

. H

2

SO

4

. Na pograniczu

obu płynów powstaje czerwono fiołkowy kr

ąż

ek

Zadanie 3.

Wykazywanie wła

ś

ciwo

ś

ci buforowych krwi

Wykonanie.

Do 4 erlenmajerek doda

ć

:

I.10 cm

3

H

2

O dest. i 3 krople bł

ę

kitu bromofenolowego

II.9 cm

3

H

2

O dest., 1 cm

3

osocza i 3 krople bł

ę

kitu bromofenolowego

III.10 cm

3

wody dest. i 2 krople fenoloftaleiny

IV.9 cm

3

wody dest., 1 cm

3

osocza i 3 krople fenoloftaleiny

Do erlenmajerek I i II doda

ć

0,1 M HCl. Do erlenmajerek III i IV

doda

ć

0,1M

NaOH.

Opó

ź

nienie

zakwaszenia

lub

alkalizacji

układu

wyst

ę

puje dzi

ę

ki obecno

ś

ci we krwi układów buforowych.

Zadanie 4.

Wpływ czynników chemicznych i fizycznych na trwało

ść

erytrocytów

Wykonanie.

Do 4 probówek doda

ć

po 4 krople krwi oraz:

−

do pierwszej doda

ć

5 cm

3

0,9% NaCl

−

do drugiej 5 cm

3

wody destylowanej

−

do trzeciej 5 cm

3

0,9% NaCl i par

ę

kropel chloroformu lub eteru

−

do czwartej doda

ć

5 cm

3

2% NaCl

Ka

ż

d

ą

probówk

ę

energicznie wymiesza

ć

i zaobserwowa

ć

zachowanie si

ę

krwinek czerwonych we wszystkich przypadkach.