PODSTAWY BIOTECHNOLOGII PRZEMYSŁOWEJ
KSZTAŁTOWANIE PROCESU BIOTECHNOLOGICZNEGO
A)
I.
WPŁYW STĘŻENIA ALKOHOLU NA WZROST DROŻDŻY
1.
Rozlać jałowo podłoże GYEP (2% glukozy, 1% ekstraktu drożdżowego, 1%
peptonu) po 10 cm
3
do 3 kolb stożkowych
2.
Sporządzić, zachowując warunki jałowości, rozcieńczenia alkoholu
etylowego wg następującego schematu:
Końcowe stężenie alkoholu (%)
0
5
15
Podłoże GYEP (cm
3
)
10
10
10
Woda jałowa (cm
3
)
10
9,0
7,0
Etanol (cm
3
)
0,0
1,0
3,0
3.
Zaszczepić przygotowane podłoża zawiesiną drożdży piekarskich (0,2 cm
3
),
dokładnie wymieszać zaczepione podłoże.
4.
Zważyć kolby i umieścić w cieplarce (hodowla stacjonarna).
5.
Obliczyć liczbę komórek drożdży zawartą w 1 cm
3
założonej hodowli.
II.
WPŁYW pH PODŁOŻA HODOWLANEGO NA WZROST DROŻDŻY
1.
W trzech zlewkach umieścić po 20 cm
3
przygotowanych wcześniej buforów
fosforanowych.
2.
Dodać do każdej ze zlewek po 0,4g sacharozy, 0,2g ekstraktu drożdżowego i
0,2g peptonu. Dokładnie wymieszać podłoże.
3.
Wyjałowić podłoże przy użyciu jałowego filtru strzykawkowego
CHROMAFIL do jałowych kolb stożkowych na 100 cm
3
.
4.
Zaszczepić przygotowane podłoża zawiesiną drożdży piekarskich (0,2 cm
3
),
dokładnie wymieszać.
5.
Zważyć kolby i umieścić w cieplarce.
6.
Obliczyć liczbę komórek drożdży zawartą w 1 cm
3
założonej hodowli.
III.
WPŁYW SKŁADU PODŁOŻA HODOWLANEGO NA WZROST
DROŻDŻY
1.
Rozlać po 20 cm
3
podłoża bazowego (0,25g (NH
4
)
2
HPO
4
i 0,25g (NH
4
)
2
SO
4
na 100 cm
3
wody) do 3 zlewek.
2.
Następnie dodać do zlewki nr 1 - 1,4 g laktozy (I próba), do zlewki nr 2 - 2,3 g
rafinozy (II próba) oraz do zlewki nr 3 - 1,4 g sacharozy (III próba).
3.
Dokładnie wymieszać roztwory (do całkowitego rozpuszczenia się cukrów).
4.
Wyjałowić podłoża przy użyciu jałowego filtru strzykawkowego
CHROMAFIL do kolb stożkowych na 100 cm
3
.
5.
Zaszczepić pożywki zawiesiną drożdży piekarskich (0,2 cm
3
), ponownie
dokładnie wymieszać.
6.
Zważyć kolby i umieścić w cieplarce.
7.
Obliczyć liczbę komórek drożdży zawartą w 1 cm
3
założonej hodowli.
