Alicja Pastuszak Magdalena Prajs

182097 177693

Gr: N1

Gdańsk, 19 stycznia 2011 r.

Zaplanowany eksperyment krzyżówkowy:

Hodowla Drosophila melanogaster

CEL:

Eksperymentalna ocena mechanizmów dziedziczenia cech szczepów użytych do krzyżówek

PRZEBIEG:

Do eksperymentu pierwotnie chciałyśmy wykorzystać szczepy mutantów D. melanogaster typu Yellow (Y) oraz White- nubin (w-nub) hodowanych przez tydzień w penicylinówkach, niestety w wyniku otrzymania przez całą grupę laboratoryjną małej ilości dorosłych owadów wszystkich mutantów do badań posłużyły nam szczepy:

• Yellow (Y) - muszki o normalnej, czerwonej barwie oczu i jasnym tułowiu;

• White (W) - muszki o białych oczach i normalnej barwie tułowia;

Zostały założone dwie równoległe hodowle krzyżówek tych mutantów:

Hodowla A której początek miały dać: samica Y oraz samce W, jednakże z nieznanych przyczyn samica umarła nim zdołała złożyć jakiekolwiek jaja, co ostatecznie przesądziło o zakończeniu tej hodowli. O wynikach pochodzących z tej hodowli będziemy mówić tylko w formie teoretycznej.

Hodowla B początek której dały dwie samice W oraz trzy samce Y.

1. Kalendarium prowadzonych badań:

Data:	Wydarzenie:	Uwagi:
	Zakładanie pokolenia P.	Przygotowałyśmy 20 penicylówek z pożywką. W każdej buteleczce umieściłyśmy bibułkę a na niej jedna larwę (10 Y oraz 10 W-nub); zamknięte penicylówki odstawiłyśmy do tygodniowej inkubacji.
	Zakładanie Hodowli pokolenia F1	Niestety tylko nieliczne larwy przeszły w formy dojrzałe. Wymieniamy się pomiędzy sobą uzyskanymi osobnikami tworząc z konieczności większe grupy i uzupełniamy ewentualne braki samcami pochodzącymi z hodowli czystych. W wyniku wymian zakładamy pokolenie F1 hodowlę A i B powstałe odpowiednio z1 samica Y i 2 samców W oraz 2 samic W i 3 samców Y złapanych z hodowli czystych.
	Kontrola rozwoju hodowli	W wyniku śmierci samicy z hodowli A rezygnujemy z niej, hodowlę B pozostawiamy na kolejny tydzień w śmietanówce z racji na mała ilość jaj i larw
	Usuwanie pokolenia P	Usuwamy pokolenia rodzicielskie z butelki, aby zapobiec krzyżówkom wstecznym. Larwy pokolenia F1 pozostawiłyśmy w Śmietanówkach
	Zakładanie pokolenia F2	Przeniosłyśmy dorosłe owady pokolenia F1 do nowych śmietanówek z pożywką w celu uzyskania pokolenia F2.
	Zliczanie osobników pokolenia F1	Przesypujemy osobniki pokolenia F1 do czystych Śmietanówek i usypiamy je za pomocą eteru, dokonujemy ich podziału pod względem fenotypu i płci a następnie zliczamy
	Zliczanie pokolenia F2 Zakończenie hodowli	Przesypujemy osobniki pokolenia F2 do czystych Śmietanówek i usypiamy je za pomocą eteru, dokonujemy ich podziału pod względem fenotypu i płci a następnie zliczamy

2. Wyniki podliczenia osobników z poszczególnych hodowli

Fenotyp	F1					Fenotyp	F2
		Hodowla A (1 Y i 2 W)		Hodowla B (2♀W i 3♂Y)					Hodowla A (teoretycznie)		Hodowla B
		♀	♂	♀	♂				♀	♂	♀	♂
W	-	-	-	90		W	-	38	52	50
YW	-	-	-	-		YW	-	12	13	14
N	50	50	80	-		N	100	37	44	43
Y	-	-	-	-		Y	-	13	14	16
	100		170				200		246
	170						446

3. Teoretyczne krzyżówki.

A, a - gen warunkujący barwę oczu

B, b - gen warunkujący wielkość skrzydeł

Hodowla A

Pokolenie rodzicielskie: 1 samica Yellow i 2 samce White

P: ♀ X^W X^W bb x ♂ X^w Y BB

F1
♀\♂	X^a B	Y B
X^A b	X^AX^a Bb	X^AY Bb

W pokoleniu F1 otrzymamy następujące genotypy:

w stosunku 1:1

W pokoleniu F1 otrzymamy następujące fenotypy:

• Wszystkie samice o normalnych oczach i normalnych tułowiach

• Wszystkie samce o oczach normalnych i normalnych tułowiach

X^AX^a Bb i X^AY Bb stosunek fenotypowy: 1:1

Krzyżujemy ze sobą osobniki z pokolenia F1: ♀ X^AX^a Bb x ♂ X^AY Bb

F2
♀\♂	X^A B	X^A b	Y N	Y n
X^A B	X^A X^A BB	X^A X^A Bb	X^A Y BB	X^A Y Bb
X^A b	X^AX^ABb	X^AX^Abb	X^A Y Bb	X^A Y bb
X^a B	X^A X^a BB	X^A X^a Bb	X^a Y BB	X^a Y Bb
X^a b	X^A X^a Bb	X^A X^a bb	X^a Y Bb	X^a Y bb

W pokoleniu F2 otrzymamy następujące genotypy:

♀	X^A X^A BB, X^AX^ABb, X^AX^Abb, X^A X^a BB, X^A X^a Bb, X^A X^a bb
W stosunku:	1:2:1:1:2:1
♂	X^A Y BB, X^A Y Bb, X^A Y bb, X^a Y BB, X^a Y Bb, X^a Y bb
W stosunku:	1:2:1:1:2:1
W pokoleniu F2 otrzymamy następujące fenotypy:		♀	♂
białe oczy, normalny tułów		0/16	3/16
białe oczy, jasny tułów		0/16	1/16
czerwone oczy, normalny tułów		6/16	3/16
czerwone oczy, jasny tułów		2/16	1/16

stosunek fenotypowy: 6: 2: 3: 1: 3: 1

Płeć	Klasa fenotypowa	Wartość oczekiwana	Wartość otrzymana
♀	oczy białe, normalny tułów	0	0
		oczy białe, jasny tułów	0	0
		oczy normalne, normalny tułów	75	75
		oczy normalne, jasny tułów	25	25
	♂	oczy białe, normalny tułów	37,5 ≈ 38	38
		oczy białe, jasny tułów	12,5≈ 13	12
		oczy normalne, normalny tułów	37,5 ≈ 38	37
		oczy normalne, jasny tułów	12,5≈ 13	13

Hodowla B

Pokolenie rodzicielskie: 2 samice white i 3 samce Yellow

P: ♀ X^a X^a B B x ♂ X^A Y bb

F1:
♀\♂	X^A b	Y b
X^a B	X^AX^a Bb	X^aY Bb

W pokoleniu F1 otrzymamy następujące genotypy:

X^AX^a Bb i X^aY Bb w stosunku 1:1

W pokoleniu F1 otrzymamy następujące fenotypy:

• Wszystkie samice o normalnych oczach i normalnym kolorze tułowia

• Wszystkie samce o oczach białych i normalnym kolorze tułowia

stosunek fenotypowy: 1:1

Krzyżujemy ze sobą osobniki z pokolenia F1: ♀ X^AX^a Bb x ♂ X^aY Bb

F2
♀\♂	X^a B	X^a b	Y B	Y b
X^A B	X^A X^a BB	X^A X^a Bb	X^A Y BB	X^A Y Bb
X^A b	X^A X^a Bb	X^A X^a bb	X^A Y Bb	X^A Y bb
X^a B	X^a X^a BB	X^a X^a Bb	X^a Y BB	X^a Y Bb
X^a b	X^a X^a Bb	X^a X^a bb	X^a Y Bb	X^a Y bb

W pokoleniu F2 otrzymamy następujące genotypy:

♀	X^AX^a BB, X^AX^a Bb, X^AX^a bb, X^aX^a BB, X^aX^a Bb, X^aX^a bb
W stosunku:	1:2:1:1:2:1
♂	X^A Y BB, X^A Y Bb, X^A Y bb, X^a Y BB, X^a Y Bb, X^a Y bb
W stosunku:	1:2:1:1:2:1
W pokoleniu F2 otrzymamy następujące fenotypy:			♀	♂
białe oczy, normalny tułów			3/16	3/16
białe oczy, jasny tułów			1/16	1/16
czerwone oczy, normalny tułów			3/16	3/16
czerwone oczy, jasny tułów			1/16	1/16

stosunek fenotypowy: 3: 1: 3: 1: 3: 1: 3: 1

Płeć	Klasa fenotypowa	Wartość oczekiwana	Wartość otrzymana
♀	oczy białe, normalny tułów	46,125 ≈ 46	52
		oczy białe, jasny tułów	15,375≈ 15	14
		oczy normalne, normalny tułów	46,125 ≈ 46	44
		oczy normalne, jasny tułów	15,375≈ 15	13
	♂	oczy białe, normalny tułów	46,125 ≈ 46	50
		oczy białe, jasny tułów	15,375≈ 15	14
		oczy normalne, normalny tułów	46,125 ≈ 46	43
		oczy normalne, jasny tułów	15,375≈ 15	16

4. Hipoteza zerowa i test χ²

Gen warunkujący barwę oczu jest sprzężony z płcią, natomiast gen warunkujący kolor tułowia jest genem autosomalnym. Za podstawę hipotezy zerowej przyjmujemy krzyżówki teoretyczne. Aby przyjąć lub odrzucić tę tezę przeprowadziłyśmy test





Test dla hodowli A

Płeć	Klasa fenotypowa	Wartość oczekiwana	Wartość otrzymana
♀	oczy normalne, normalny tułów	75	75
		oczy normalne, jasny tułów	25	25
	♂	oczy białe, normalny tułów	37,5 ≈ 38	38
		oczy białe, jasny tułów	12,5≈ 13	12
		oczy normalne, normalny tułów	37,5 ≈ 38	37
		oczy normalne, jasny tułów	12,5≈ 13	13


= (75-75)²/75 + (25-25)²/25 + (38-37,5)²/37,5 + (12-12,5)²/12,5 + (37-37,5)²/37,5 + (13-12,5)²/12,5


≈ 0 + 0 + 0,007+ 0,02 + 0,007 + 0,02


= 0,054

df = 5		χtab= 11,070		0,05 < P < 0,99
P = 0,05		χ^2otrzymane= 0,054		0,99 < P < 1,00

Wartość krytyczna otrzymana mieści się w przedziale 0,99 - 1,00 jest za tym mniejsza od wartości przewidzianej w tabeli, dlatego przyjmujemy hipotezę zerową.

Test χ² dla hodowli B

Płeć	Klasa fenotypowa	Wartość oczekiwana	Wartość otrzymana
♀	oczy białe, normalny tułów	46,125 ≈ 46	52
		oczy białe, jasny tułów	15,375≈ 15	14
		oczy normalne, normalny tułów	46,125 ≈ 46	44
		oczy normalne, jasny tułów	15,375≈ 15	13
	♂	oczy białe, normalny tułów	46,125 ≈ 46	50
		oczy białe, jasny tułów	15,375≈ 15	14
		oczy normalne, normalny tułów	46,125 ≈ 46	43
		oczy normalne, jasny tułów	15,375≈ 15	16


= (46,125 -52)²/46,125 +(15,375-14)²/15,375 +(46,125 -44)²/46,125 +(15,375-13)²/15,375 +(46,125 -50)²/46,125 +(15,375-14)²/15,375 +(46,125 -43)²/46,125 +(15,375-16)²/15,375 ≈ 0,75 + 0,37 + 0,1 + 1,2 + 1,3 + 0,33 + 0,12 + 0,21 + 0,03 + 0,68


= 2,03

df = 7		χtab= 14,067		0,05 < P < 0,99
P = 0,05		χ^2otrzymane= 2,03		0,90 < P < 0,95

Wartość krytyczna otrzymana mieści się w przedziale 0,99 - 0,95 jest za tym mniejsza od wartości przewidzianej w tabeli, dlatego przyjmujemy hipotezę zerową.

---