Przedmiot:						Fizjologia roślin	Rok akademicki/ data wykonania ćwiczenia	2011/2012 semestr letni 17 lut. 2012
Kierunek/ specjalność:						Biologia podstawowa
Numer ćwiczenia	I/2	Temat ćwiczenia:		Wyznaczenie potencjału wody epidermy liścia spichrzowego cebuli metodą plazmolizy granicznej
Literatura.:					Kopcewicz J., Lewak S. Fizjologia roślin. PWN Warszawa, 2007.
Materiał:					Epiderma liścia spichrzowego cebuli.
Aparatura:					Mikroskop optyczny, szkiełka podstawowe i nakrywkowe.
Sprzęt laboratoryjny:
Odczynniki:					sacharoza 1M.
Czas wykonania:					20 min.
Wstęp merytoryczny			Potencjał osmotyczny Ψs jest wynikiem obecności w wodzie substancji osmotycznie czynnych (np. jony, cukry proste i disacharydy). Ma on zawsze wartość ujemną a jego wielkość odpowiada ciśnieniu, jakie wywiera woda czysta, przenikająca do roztworu przez błonę półprzepuszczalną. Potencjał wody Ψk jest miarą zdolności wody do wykonania pracy przepływu. Wartość potencjału wyznacza się przez porównanie z potencjałem czystej wody, przyjętego umownie jako zero. Wartość potencjału wody po obu stronach błony decyduje o kierunku przepływu wody: komórka zanurzona w roztworze hipotonicznym pobiera wodę, komórka zanurzona w roztworze hipertonicznym oddaje wodę, natomiast komórka zanurzona w roztworze izotonicznym pozostaje w stanie dynamicznej równowagi. Utrata wody skutkuje utratą turgoru, zmniejszeniem objętości wakuoli i w konsekwencji obkurczeniem protoplastu i jego odstawaniem od ściany komórkowej, co określa się jako plazmoliza.
Sposób wykonania :			Z 1 molowego roztworu sacharozy (342,3g/mol) przygotować roztwory o stężeniu: 0,9; 0,8; 0,7; 0,6; 0,5; 0,4; 0,3; 0,2 i 01 mol/kg (stężenie molowe to liczba moli na 1 kg rozpuszczalnika). Roztwory rozdzielić do opisanych probówek. Wykonać kolejno 9 preparatów epidermy wewnętrznej strony liścia spichrzowego cebuli, umieszczając materiał w kolejnych roztworach sacharozy (zaleca się zacząć od najbardziej stężonego). Po ok. 3 minutach oglądać preparaty pod mikroskopem. Wybrać preparat, w którym ok. 50% komórek wykazuje plazmolizę kątową, roztwór ten przyjąć za izotoniczny dla całego skrawka.
Ocena wyników			Obliczyć potencjał wody w tkance zgodnie z równoważnością Ψk równa się Ψs roztworu, będącego w równowadze z tkanką. Ψs roztworu oblicza się ze wzoru van't Hoffa: Ψs = -inRT Obliczyć potencjał osmotyczny roztworu wg. wzoru: P= n*22,4*T/273 Gdzie: i - współczynnik izotoniczny dysocjacji, dla sacharozy =1 n - stężenie molowe roztworu R - stała gazowa (83,138 hPa*dm^3*mol^-1*K^-1) T - temperatura w skali Kelvina (273+temperatura w skali Celsjusza)

---