KOŁO NR 1
1. Jakiego efektu spodziewasz się dezynfekując ręce podczas chirurgicznego mycia rąk 70% etanolem?
Przede wszystkim etanol zadziała dezynfekująco na skórę. Dzięki właściwościom denaturacyjnym, jakie wywiera na białka, wywoła efekt bakteriobójczy na większość drobnoustrojów. Jeśli skóra będzie pod działaniem 70% etanolu przez 2 min., to ilość drobnoustrojów zmniejszy się o około 90%. Niestety niektóre bakterie przeżyją, a nawet będą się namnażać w takich warunkach. Działanie na grzyby i wirusy niestety jest niepewne, a na zarodniki etanol nie działa. Poza działaniem dezynfekcyjnym etanol będzie działał garbująco na skórę. Efekt ten polega na zatykaniu porów i gruczołów, co zapobiega wydostawaniu się drobnoustrojów z głębszych warstw skóry na powierzchnię.
2. Jaka grupa bakterii wytwarza przetrwalniki? Co odpowiada za wytrzymałość przetrwalników ?
Zdolność do sporulacji (wytwarzania przetrwalników) wykazują 2 rodzaje bakterii - Bacillus i Clostridium. Każda komórka tworzy pojedynczy, uśpiony przetrwalnik, który jest odporny na ciepło, promieniowanie, wysychanie i subst. chemiczne (włącznie z 70% etanolem). 10-15% całkowitej masy przetrwalnika stanowi dwupikolinian wapnia odpowiedzialny za oporność przetrwalników na ciepło.
Przetrwalniki są wytwarzane w fazie stacjonarnej cyklu wzrostu bakterii, kiedy dostępność składników odżywczych jest czynnikiem ograniczającym oraz ustala się równowaga między wzrostem i podziałem komórek a ich śmiercią. Jest to sposób różnicowania się komórek prokariotycznych, który zostaje pobudzony po umieszczeniu bakterii w warunkach ograniczonego dostępu do substancji odżywczych. Sporulacja zaczyna się zaraz po pozbawieniu bakterii składników odżywczych i trwa około 8 godzin. Nie są wymagane ani zewnętrzne źródła energetyczne lub odżywcze. Przetrwalnik uwalniany jest w chwili, gdy kom. macierzysta ulegnie lizie i pozostaje w uśpieniu do czasu, gdy warunki środowiska staną się sprzyjające.
3. Na czym polega odczyn wiązania dopełniacza?
Jest to klasyczna metoda badań serologicznych w diagnostyce chorób zakaźnych. Zasadą odczynu jest reakcja antygenu z przeciwciałem przy udziale dopełniacza (CF). Jest to odczyn lityczny, niewidoczny gołym okiem. Do wykazania reakcji CF wykorzystuje się układ hemolityczny, w którego skład wchodzi surowica hemolityczna królicza (zawierająca przeciwciała wobec krwinek czerwonych barana) i krwinki barana jako antygen. Jest to układ wskaźnikowy, który określa czy dopełniacz został związany, czy nie, we właściwej reakcji CF.
brak hemolizy erytrocytów barana - wynik CF (+)
hemoliza erytrocytów barana - wynik CF (-) [dopełniacz został związany ze składnikami ukł. wskaźnikowego]
Powszechnie wykorzystywany jest dopełniacz świnki morskiej. Surowice ludzkie wykorzystywane do badań przeciwciał w odczynie CF powinny być zinaktywowane (ogrzewanie do 56o C przez około 30min) w celu unieczynnienia znajdującego się w nich własnego dopełniacza.
Odczyn CF najczęściej wykorzystywany jest jako test ilościowy do określenia miana przeciwciał reagujących z określonymi antygenami drobnoustrojowymi; rzadziej do badania antygenów. Umożliwia on wykrycie przeciwciał wiążących dopełniacz, czyli jedynie klasę IgM i IgG. Nie pozwala on jednak na odróżnienie od siebie tych dwóch klas przeciwciał. Jest to odczyn bardziej swoisty niż odczyny aglutynacyjne, ale mniej czuły. Przeciwciała wiążące dopełniacz są wykrywane w 2-4 tygodniu od zakażenia, a aglutyniny stwierdza się w 7-14 dniu. Wykorzystywany w serologicznej diagnostyce zakażeń bakteryjnych, wirusowych i grzybiczych oraz w diagnostyce zakażeń pasożytniczych.
4. Które z materiałow diagnostycznych a. krew, b. mocz, c. kał NIE przetransportujeszna podłożu transportowo-namnazającym do laboratorium? Uzasadnij.
Nie sieje się jedynie kału. Przed posianiem należy wykonać zawiesinę, a to możliwe jest jedynie w warunkach laboratoryjnych. (?)
5. Zasadnicza różnica między epidemią i endemią?
Epidemia to wystąpienie większej niż zwykle liczby zachorowań na ograniczonym terenie i w określonym czasie. Zazwyczaj pojawia się nagle i ma tendencję do samoistnego wygasania. Epidemia ma zawsze koniec. Może być punktowa, gdy zakażenie pochodzi z jednego źródłą lub postępująca, gdy mamy do czynienia z różnymi źródłami.
Endemia natomiast to stałe występowanie choroby na określonym terenie, przy czym liczba zachorowań utrzymuje się na podobnym poziomie. Na terenie endemicznym choroba trwa z mniejszym lub większym nasileniem, ale nigdy nie wygasa i ma tendencję do łagodniejszego przebiegu wśród miejscowej ludności. Endemia nigdy nie ma końca.
6. Skutki uboczne antybiotykoterapii.
powstawanie i namnażanie szczepów lekoopornych (wyodrębnienie grupy szczególnie opornych bakterii powodujących zakażenia szpitalne)
zniszczenie flory fizjologicznej (dysbakterioza, awitaminoza, podatność na kolonizację przez patogeny np. Candida albicans)
alergia (wstrząs anafilaktyczny, odczyny miejscowe, wysypki skórne)
toksyczność (trwałe lub przejściowe uszkodzenie narządów, trwałe uszkodzenie skóry, biegunka poantybiotykowa, rzekomobłoniaste zapalenie jelit)
1. przewaga podloza stalego nad plynnym
Podłoże stałe pozwala na wysianie bakterii metodą izolacyjną, a ta zaś pozwala na wyodrębnienie pojedynczych kolonii. Możemy policzyć kolonie (CFU), a także przeprowadzić ich charakterystykę. Dzięki temu możemy ocenić czy materiał został poprawnie pobrany, czy mamy doczynienia z jednym rodzajem bakterii, czy też z większą ilością. Mając pojedyncze kolonie możemy wykonać preparat bezpośredni o wysokiej wartości diagnostycznej (nie musimy obawiać się, że przeoczymy jakiś rodzaj drobnoustrojów). Możemy także wykonać antybiogramy dla poszczególnych badanych drobnoustrojów.
2. jakimi metodami mozna otrzymac MIC
MIC - najmniejsze stęż. Chemioterapeutyku hamujące rozwój bakterii
metoda seryjnych rozcieńczeń
Metody półilościowe - określa się w nich hamowanie wzrostu bakterii tylko przez 2 lub 3 stężenia krytyczne dla stopni wrażliwości - S, I, R
Metody dyfuzyjne:
Płytkowo-dyfuzyjna - z wykorzystaniem krążków bibuły nasączonych różnymi stężeniami antybiotyku, takimi jakie osiągają one w surowicy (ICS, NCCLS); strefa zahamowania wzrostu wokół krążka będzie stanowiła MIC
E-test - paski nasycone antybiotykiem z gradientem stężeń
3. jalowienie: endoskop, narzedzia chirurgiczne, plyn infuzyjny
endoskop - sterylizacja plazmowa, autoklaw (?), chlorheksydyna, formalina
narzędzia chirurgiczne - autoklaw, sterylizacja plazmowa, formalina, chlorheksydyna
płyn infuzyjny - autoklaw
4. rodzaje szczepionek + przyklady
monowalentne - szczepionka BCG (przeciwko gruźlicy)
poliwalentne - szczepionka przeciwko krztuścowi, błonicy i tężcowi (Di-Per-The)
żywe, zjadliwe - podskórnie przecinkowiec cholery
żywe, atenuowane - wirusowe (ospa, odra, grypa); bakteryjne (gruźlica, dżuma)
zabite, pełnowartościowe - krztusiec, czerwonka, dur brzuszny
z oczyszczonymi frakcjami antygenowymi po autolizie - H. Influenzae B
anatoksyny (inaktywowane egzotoksyny) - szczepionka Di-Per-The
rekombinowane - WZW typu B
5. ktore nosicielstwo jest najniebezpieczniejsze epidemiologicznie i dlaczego
Nosicielstwo utajone, bo brak objawów.
6. sposob odkazenia skory przed pobraniem krwi do badania bakteriologicznego
-umyć skórę wodą z mydłem
-przetrzeć skórę jodyną i odczekać 3 min.
-przetrzeć skórę 70% etanolem i odczekać 3 min
podstawowa różnica między precypitacja a aglutynacja.
Aglutynacja - reakcja zachodząca pomiędzy upostaciowionym antygenem a przeciwciałem. Próbówkowa pozwala na określenie miana i klasy przeciwciał. Szkiełkowa pozwala na szybką identyfikację drobnoustrojów. Lateksowa natomiast wykrywa nawet najmniejsze lub nieupostaciowione antygeny w płynach ustrojowych.
Precypitacja - reakcja zachodząca między bezpostaciowym antygenem (białko, toksyny) a przeciwciałem. Nie można stwierdzić czy w reakcji bierze udział 1 czy więcej układów antygen-przeciwciało.
2. na pałeczki, laseczki, gronkowce działamy temp. 100 C przez 30 min. co wyrośnie na agarze z krwią
Wyrosną laseczki, dlatego że w niesprzyjających warunkach wytwarzają przetrwalniki odporne na działanie wysokich temperatur.
3. podział bakterii ze wzgl. na preferencje temperatury i zakres T najbardziej dla nas niebezpiecznych.
psychrofilne
mezofilne 20 - 40 -> chorobotwórcze (przedział odpowiada temperaturze organizmu)
termofilne
4. rola przenosiciela czynnego w łancuchu epidemiologicznym
Przenosiciel czynny to taki, w którym drobnoustrój rozmnaża się np. wesz w przypadku duru plamistego, bądź w którym przechodzi cykl rozwojowy np. komar w przypadku malarii.
5. co przetransportujesz na podlozu tran posr. - namnazajacym: krew, plwociny, mocz i why
Na podłożu takim transportuje się płyny fizjologicznie jałowe czyli krew, płyn mózgowo-rdzeniowy +ewentualnie mocz pobrany z cewnika lub z wkłucia nadłonowego. Przyczyna: jeśli w płynie jałowym są drobnoustroje to jest ich raczej mało bardzo i ciężko je wykryć, a na podłożu transportująco - namnażającym one się namnożą, co ułatwi diagnostykę.
6. skleroza....jaki proces powala bakteriom g (-) przekazac cechy lekkooporności (koniugacja)
Bakterie G- przekazują sobie lekooporność na drodze koniugacji przy użyciu fimbrii płciowych (fimbrie łączą się z polisacharydami na powierzchni komórki biorcy; następnie kurczą się, aby zbliżyć kom. dawcy i biorcy; DNA plazmidowe ulega cięciu; jedna nić pozostaje w organizmie dawcy, a druga trafia do biorcy; następnie obydwie są powielane). Jest to przeniesienie info od dawcy do biorcy, pamiętaj że to info jest pozachromosomalne- plazmidowe. Oprócz genów lekooporności przekazywane są też cechy zdolności do wytwarzania czynników toksycznych.
1.Jaka jest zaleznosc u paleczek G(-) miedzy antygenem somatycznym a endotoksyna?
Antygen somatyczny to taki, który znajduje się w ścianie komórkowej. U pałeczek G- antygen somatyczny O jest identyczny z endotoksyną LPS.(zbudowany z polisacharydowego rdzenia, białka które jest antygenem O i lipidu A odpowiadającego za toksyczność).
2. Czego uzyjesz do sterylizacji materialow opatryunkowych i uzasadnij:
a)metoda plazmowa
b)autoklaw 121 °C przez 21'
c)2% aldehyd glutarowy
d)suszenie w temperaturze 180 °C
[nie wiem czy cos jeszcze i nie wiem czemu;/bo nie rozumiem tego do konca…może żeby nie zniszczyc tych matreialow opatrunkowych,a inne metody może niszcza?]
3. Jak antybiotyk wplywa na powstanie szczepow opornych?
Drobnoustroje nabywają oporność poprzez przekazanie tej cechy poprzez koniugacje w przypadku bb.G-, transdukcje i transformacje w przypadku G+. Ale tak zdobyta lekooporność pozostaje cechą obojętną jeśli brak kontaktu z antybiotykiem, bo lekooporność uzyskują pojedyncze komórki. Dopiero kontakt z antybiotykiem jako czynnikiem selekcjonującym powoduje wybicie komórek wrażliwych a rozwój komórek uodpornionych.
4. Co da dluzsza odpornosc, anatoksyna czy antytoksyna? Uzasadnij.
Antytoksyna ( najpierw def, bo może tez będzie…) to podanie gotowych przeciwciał przeciw toksynie/antygenowi, które będą neutralizowac lub kłaczkować antygen. Te przeciwciała podaje się w surowicy odpornościowej z fenolem jako środkiem konserwującym np. błonicza, tężcowa. To są GOTOWE PRZECIWCIALA i antytoksyna jest ciałem obcym, więc organizm będzie się bronił poprzez produkcje własnych przeciwciał, wiec antytoksyna nie działa długo, tyle ze szybko.
Anatoksyna-toksoid, toksyna pozbawiona właściwości chorobotwórczych ,ale zachowująca antygenowość. Stosowana w szczepionkach np. tężcowa, błonicza. Daje dłuższą odporność, bo mobilizuje org. do produkcji własnych p/ciał, tyle ze działa po pewnym czasie( bo ustrój musi mieć czas na produkcje p/cial).
5. Warunki ktore musi spelniac powietrze w sali operacyjnej.
-brak bakterii chorobotwórczych
-bakterii niechorobotwórczych może być do 1000CFU/m2/h
6. Co przetransportujesz w temperaturze 4 °C do laboratorium i uzasadnij:
a) krew
b) mocz
c) płyn mózgowo-rdzeniowy
Mocz-bym dodała, że pobrany metodą strumienia środkowego, bo wtedy jest niejałowy. W 4 stp. żeby nie namnażały się drobnoustroje.
1.mieszanina pałeczek i gronkowców wysiano na podłoża:
a) agar mięsny - gronkowce
b)czekoladowe - o ile jest świeży, to wyrośnie na nim H.influenzae (pałeczki)
c)agar krwawy - gronkowce do oceny hemolizy; pałeczki (np. H. influenzae o ile w mieszaninie jest też s.aureus);
d)mc conkey -pałeczki,wybiórczo-różnicujące
e)chapman - wybiórczo-różnicujace dla gronkowców
na ktorym podłożu co wyrośnie
2. jakie znasz metody kontroli prawidłowego przebiegu autoklawowania
Metoda fizyczna:
wskaźniki stanu technicznego
sprawdzanie czy pojemnik zamknięty jest hermetycznie
odczyty z nanometru, termometru
czy kocioł wypełniony jest wodą częściowo
Metody chemiczne:
kontrola sterylizacji za pomocą taśmy nasączonej jakimś związkiem chem. (po przekroczeniu jakiejś temperatury topi się i zmienia kolor)
wskaźniki sterylizacji umieszczone w fiolkach
Metody biologiczne:
sporotesty, czyli bibułki z przetrwalnikami (w przypadku autoklawu jest to Bacillus stearotharmophilus; „sporal A”)
wkłada się je do autoklawu w 3 miejscach
po okresie steryluzacji wyjmujemy bibułkę i wkładamy do podłoża płynnego, następnie inkubujemy w temp.370C
jeśli powstanie zmętnienie to mamy wynik (+)
aby wydać wynik (-) hodujemy przez tydzień
metodę stosuje się 1 raz w miesiącu
metoda przyspieszona - do autoklawu wkładamy 3 filki zawierające przetrwalniki i podłoże; po sterylizacji zgniatamy fiolki i inkubujemy przez 2 dni w temp. 560C; kolor bez zmian to wynik (-); kolor żółty to wynik (+)
3. którymi odczynami serologicznymi zbadasz nieupostaciowany antygen
odczyn precypitacji:
probowkowa - zachodzi między bezpostaciowym antygenem (białko, toksyna) a przeciwciałem; nie można stwierdzić ile układów antygen-przeciwciało bierze udział w reakcji; antygen nawarstwia się w probówce nad surowicą bo jest lżejszy; na granicy zetknięcia się obu roztworów powstaje warstwa precypitatu
immunodyfuzja - wykonywana w żelu agarowym; prosta (dyfunduje jeden składnik, a drugi dodamy do żelu) i podwójna (gdy dyfundują 2 składniki - antygen i przeciwciało; można identyfikować nieznany antygen/przeciwciało)
immunoelektroforeza - uczula się białko przeciwciałem; przeprowadza się elektroforezę; następnie odczytuje się rozkład białek (antygenów)
4. u pacjentów po operacji wykryto gronkowca złocistego jakimi metodami określisz, że to ten sam szczep
-należy wykonać antybiogramy i je porównać
-typowanie bakteriofagowe
-typowanie biochemiczne
-typowanie genetyczne
-typowanie serologiczne
5. wyjaśnij jakie jest stężenie antybiotyku na granicy faz w odczynie bibkowym
w odczynie bibkowym jest kac ;p na którego nie mamy teraz czasu;/ pewnie chodzi o bibułkowy…no to na granicy faz jest MIC-czyli minimalne stężenie ANTYBIOTYKU o działaniu BAKTERIOSTATYCZNYM (bo MBC-to bakteriobójczo!!!)
6. różnice w transporcie krwi i moczu do badania laboratoryjnego
-krew 37stp a mocz jeśli nie jałowy to w 4stp, a jak z wkłucia nadłonowego lub cewnika to tez w 37stp
-krew na podłożu transportująco-namnażającym ,a mocz nie, chyba ze jest nadłonowy albo z cewnika