| Ćwiczenie nr 4 | Kinga Nowak | Grupa poniedziałek 12:00 |
|---|---|---|
| 20 kwietnia 2015 r. – data ćwiczenia | Pomiar natężenia fotosyntezy przy użyciu elektrody Clark’a. Obserwacja ruchów chloroplastów w listkach -poprawa | |
| 27 kwietnia - data oddania sprawozdania |
Pomiar natężenia fotosyntezy przy użyciu elektrody Clark’a.
Celem ćwiczenia jest obserwacja zmieniającego się natężenia fotosyntezy przy zmieniających się warunkach oświetleniowych (obecność i brak światła).
Wykonanie ćwiczenia.
Skalibrowano elektrodę za pomocą ditionianu sodu (wiąże on całą ilość tlenu w 1 ml H2O). Zanotowano początkowe napięcie i dodawano porcjami substancję do momentu, w którym wartość napięcia przestanie się zmieniać. Otrzymana różnica między pomiarami wskazuje na wartość rozpuszczalności tlenu w wodzie przy określonej temperaturze. Przepłukano komorę usuwając ditionian. Wprowadzono do komory roślinę (rzęsę). Dokonywano pomiaru natężenia oddychania w warunkach ciemności i światła. Zapisywano wyniki w minutowych odstępach. Po zakończeniu przepłukano elektrodę.
Obserwacje.
Wartość napięcia przed dodaniem ditionaniu sodu – 1815 mV
Wartość napięcia po zatrzymaniu się spadku – 395 mV
Zmiana napięcia – 1419 mV
Stężenie tlenu w temp 21 stopni Celsjusza to 271,72 nmol/ml. Odpowiada temu zmiana napięcia o 1419 mV.
Pomiary w ciemności: 1775, 1767, 1761, 1751, 1739, 1736, 1715, 1712, 1704, 1695, 1691, 1676, 1680, 1660, 1657, 1646, 1639 [mV]. Oznacza to, że roślina pobiera tlen zawarty w wodzie w ciemności.
Pomiary na świetle: 1557, 1602, 1619, 1633, 1650, 1662, 1675, 1686, 1693, 1707, 1717[mV]
Wyniki.
Średnia ze zmian natężenia w ciemności wyniosła 8,5 mV. Można zatem z proporcji obliczyć ile tlenu zużywa roślina w ciągu jednej minuty.
1419mV – 271,72 nmol/ml
8,5mV – x
X=1,6 mola O2 zużywanego w ciągu jednej minuty w jednym mililitrze wody
Z proporcji wyliczono, że jeżeli zużycie jest takie przy 0,0091 g suchej masy to przy 1 g suchej masy zużycie będzie wynosiło 175,82 nmoli O2 w jednej minucie.
Obliczono średnią różnicę pomiarów na świetle : 12,45 mv.
Z proporcji obliczamy produkcję tlenu w ciągu minuty:
1419mV - 271,72 nmol/ml
12,45mV – y
y=2,38mola O2 wytwarzanego w ciągu jednej minuty w jednym mililitrze wody
Z proporcji (tak jak w poprzednim przypadku) obliczono ilość produkowanego tlenu z 1 g suchej masy – 261,54 nmole.
Ruchy chloroplastów.
Wykonanie:
Na szkiełku podstawowym w wkropli wody umieszczono listki (Funaria hygrometrica). I obserwowano zaraz po przebywaniu w ciemności i po dłuższym naświetlaniu.
Obserwacje.
Chloroplasty układają się przy słabym świetle jak najbliżej powierzchni, natomiast w intensywnym świetle układają się tak, aby mała powierzchnia była naświetlona (boki komórki, ustawiają się węższą stroną do światła).
Wyniki:
Chloroplasty układają się w ten sposób, aby przy słabym oświetleniu móc wykorzystać jak najwięcej światła do fotosyntezy, natomiast, gdy ilość światła jest znaczna, ustawiają się tak, aby chlorofil nie uległ uszkodzeniu w czasie naświetlania.
Wykrywanie bakterii wiążących wolny azot z rodzaju Azotobacter.
Wykonanie: W erlenmajerce przygotowano pożywkę składającą się z 1 g mannitolu, 0.02g KH2PO4 oraz 100 ml wody destylowanej. Do pożywki dodano kilka grudek ziemi ogrodowej i zatkano korkiem z waty. Następnie umieszczono w temp. 25 stopni Celsjusza na okres tygodnia. Po tygodniu zebrano fragment cienkiej błonki wytworzonej na powierzchni pożywki i umieszczono go na szkiełku podstawowym, wybarwiono błękitem metylenowym i obserwowano komórki Azotobacter.
Obserwacje: Rysunek zaobserwowanych bakterii.
Wnioski: Zaobserwowano komórki Azotobacter w roztworze. Świadczy to o zdolności wiązania azotu z powietrza tych bakterii, ponieważ w pożywce nie było azotu.