pomiar widm absorpcji i oznaczanie stężenia ryboflawiny w roztworach wodnych za pomocą spektofotometru

Temat: Pomiar widm absorpcji i oznaczanie stężenia ryboflawiny w roztworach wodnych za pomocą spektofotometru.



Światło jest promieniowaniem elektromagnetycznym, które możemy zaobserwować, czyli jest promieniowaniem optycznym. W spektroskopii promieniowanie optyczne to przedział fal elektromagnetycznych widzialnych oraz podczerwień i ultrafiolet. Dzięki falowej naturze światła można zauważyć zjawiska załamania, odbicia , rozproszenia lub pochłaniania podczas oddziaływania światła z substancją.

Natężenie światła przechodzącego przez substancję ulega zmianie. Jest to spowodowane możliwością odbicia części energii, rozproszenia lub absorpcji. Prawo Lamberta-Beera wskazuje, że natężenie światła przechodzącego przez roztwór jest zależne od kilku czynników: natężenia światła padającego, stężenia roztworu, grubości warstwy i współczynnika absorpcji substancji rozpuszczonej.

Współczynnik absorpcji jest funkcją długości fali światła pochłanianego. Absorbancję można wyznaczyć ze wzoru

A = lg (I0/I)

Lub

A = c l

I0 – natężenie światła padającego

I – natężenie światła po przejściu przez kuwetę

- molowy współczynnik absorpcji

c – stężenie roztworu

l – grubość warstwy


W spektroskopii używa się także transmitancji:


T = (I/I0) 100%


T – transmitancja

Transmitancję można także zdefiniować w zależności od absorbancji:


A = lg (100/T)


Widmo absorpcji jest to zależność współczynnika absorpcji od długości fali lub częstotliwości fali. Widmo jest charakterystyczne dla danej substancji w określonych warunkach fizykochemicznych.

Absorbancja dla danej długości fali jest równa iloczynowi wartości współczynnika absorpcji i stałej wartości c l .

Związek pomiędzy absorbancją i molowym współczynnikiem absorpcji opisuje wzór Bouguera-Lamberta-Beera:


A() = () c l


- długość fali

A – absorbancja


Podczas przeprowadzenia doświadczenia sporządzono roztwory ryboflawiny o określonym stężeniu poprzez rozcieńczenie stężonego roztworu ryboflawiny. Korzystając ze wzoru:


V0 C0 = C1 V1


C0 – stężenie wyjściowe ( 10-5M)

C1 [mol/dm3]

V1 [cm3]

V0 [cm3]

VH2O [cm3]

1

1,2 * 10-6

10

1,2

8,8

2

2,4 * 10-6

10

2,4

7,6

3

3,6 * 10-6

10

3,6

6,4

4

4,8 * 10-6

10

4,8

5,2

5

6 * 10-6

10

6,0

4,0

6

7,2 * 10-6

10

7,2

2,8

7

8,4 * 10-6

10

8,4

1,6


Obliczanie V0:

  1. 1,2 * 10-6 * 10-3 / 10-5 = 0,0012 dm3 = 1,2cm3

  2. 2,4 * 10-6 * 10-3 / 10-5 =0,0024 dm3 = 2,4cm 3

  3. 3,6* 10-6 * 10-3 / 10-5 =0,0036 dm3 = 3,6cm3

  4. 4,8 * 10-6 * 10-3 / 10-5 = 0,0048 dm3 = 4,8cm3

  5. 6,0 * 10-6 * 10-3 / 10-5 = 0,006 dm3 = 6 cm3

  6. 7,2 * 10-6 * 10-3 / 10-5 = 0,0072 dm3 = 7,2cm 3

  7. 8,4 * 10-6 * 10-3 / 10-5 = 0,0084dm3 = 8,4 cm3


[V0] = mol/dm3 / mol/dm3 * dm3 = dm3


Obliczanie VH2O:

  1. 10 – 1,2 =8,8 cm3

  2. 10 – 2,4 = 7,6 cm3

  3. 10 – 3,6 = 6,4 cm3

  4. 10 – 4,8 = 5,2 cm3

  5. 10 – 6 =4 cm3

  6. 10 – 7,2 =2,8 cm3

  7. 10 – 8,4 = 1,6 cm3





Wyszukiwarka

Podobne podstrony:

więcej podobnych podstron